不同價(jià)態(tài)錳化合物對PC-,12-細(xì)胞的毒性及鈣穩(wěn)態(tài)的影響.pdf

1、目的：錳中毒是在生產(chǎn)環(huán)境下長期、密切接觸錳化合物所引起的慢性中樞神經(jīng)系統(tǒng)的損害。以往研究證實(shí)錳中毒主要累及中腦黑質(zhì)神經(jīng)元，因?yàn)榇瞬课缓氐纳窠?jīng)元具有蓄積金屬元素的特性。錳化合物對黑質(zhì)和紋狀體多巴胺類神經(jīng)遞質(zhì)的合成、釋放和代謝具有明顯的影響，但其中毒的具體機(jī)制尚不清楚。本實(shí)驗(yàn)選擇可在體外條件下合成、釋放及貯存多巴胺類遞質(zhì)的PC12細(xì)胞作為體外測試系統(tǒng)，對不同價(jià)態(tài)錳離子的神經(jīng)毒作用機(jī)制進(jìn)行研究。 方法：不同價(jià)態(tài)錳化合物對PC12細(xì)

2、胞毒性測試，用四唑鹽比色實(shí)驗(yàn)(MTT)檢測細(xì)胞的存活和生長；采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測不同價(jià)態(tài)錳化合物對PC12細(xì)胞鈣穩(wěn)態(tài)的影響；用原位細(xì)胞凋亡檢測試劑盒——即原位缺口末端標(biāo)記法檢測不同價(jià)態(tài)錳化合物對PC12細(xì)胞凋亡的影響。 結(jié)果：1.MTT實(shí)驗(yàn)檢測結(jié)果顯示不同價(jià)態(tài)錳化合物對PC12細(xì)胞有顯著抑制作用，即隨染毒劑量增加和時間的延長，細(xì)胞毒性增大，Mn3+對PC12細(xì)胞的細(xì)胞毒性作用強(qiáng)于Mn2+；2.應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)可觀察到細(xì)胞內(nèi)鈣水平