宮頸鱗癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)乙酰肝素酶的表達及臨床意義.pdf

1、背景與目的:
　　流行病學(xué)調(diào)查顯示，宮頸癌發(fā)病率有上升趨勢，嚴重威脅著女性的生命，位居女性惡性腫瘤死因之首。宮頸癌最主要的轉(zhuǎn)移途徑是淋巴轉(zhuǎn)移，而腫瘤的侵潤與遠處轉(zhuǎn)移是惡性腫瘤治療成功的主要障礙，淋巴轉(zhuǎn)移是目前明確的導(dǎo)致臨床治療失敗和死亡的重要原因。
　　腫瘤的浸潤轉(zhuǎn)移能力由腫瘤細胞的多種生物學(xué)行為決定，其中腫瘤細胞對其周圍基質(zhì)蛋白的降解能力是一個重要方面，乙酰肝素酶(heparanase，HPA)是一種葡萄糖醛酸內(nèi)切酶，它能

2、在數(shù)個位點降解硫酸乙酰肝素，破壞細胞外基質(zhì)(extra cellular matrix，ECM)和基膜(basement membrane，BM)的完整性，促進腫瘤的局部侵襲和遠處轉(zhuǎn)移。我們的前期研究及一些國外的研究已證實HPA在宮頸癌原發(fā)灶中的表達顯著增高，是宮頸癌的重要生物標(biāo)志物。細胞角蛋白19(Cytokeratin19，CK19)為細胞角蛋白家族中分子量最小的成員，是構(gòu)成鱗狀上皮細胞骨架的重要蛋白質(zhì)之一，表達范圍嚴格，特異表達于

3、女性生殖道上皮，已成為上皮性腫瘤細胞較為敏感和特異的標(biāo)志。
　　國內(nèi)外都在尋找宮頸癌轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)特異性和敏感性的生物分子指標(biāo)，如能在術(shù)前準(zhǔn)確的預(yù)測淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移情況，即可準(zhǔn)確的了解腫瘤的范圍，選擇合適的治療方案，但目前對于淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的診斷，尚缺乏有效的手段?；贖PA與宮頸癌以及與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系，本研究通過免疫組織化學(xué)法檢測宮頸鱗癌原發(fā)灶及轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HPA的表達情況，首次分析了宮頸鱗癌淋巴結(jié)HPA的表達與臨床預(yù)后因素間的關(guān)系，以期

4、為宮頸鱗癌淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移診斷提供一新的分子指標(biāo)。
　　材料與方法:
　　收集鄭州大學(xué)第二附屬醫(yī)院病理科2007年1月-2012年12月確診的、臨床資料完整的宮頸鱗癌石蠟標(biāo)本102例，其中術(shù)后常規(guī)病理診斷為淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者53例（A組）、淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者49例（B組）。A組選取原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)及未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)3個部位，B組選取原發(fā)灶和淋巴結(jié)2個部位，用于免疫組織化學(xué)染色。
　　免疫組織化學(xué)S-P法分別檢測A、B兩組所選部位組織中

5、的HPA表達情況，同時行常規(guī)HE染色，HPA陽性的淋巴結(jié)行CK19染色，以證實其為轉(zhuǎn)移的宮頸癌病灶。圖像分析技術(shù)記錄各組中HPA表達的平均灰度值，計算出陽性單位。
　　采用SPSS17.0統(tǒng)計軟件進行分析，圖像分析數(shù)據(jù)采用(x)±s表示，各組間比較采用方差分析;HPA表達率采用卡方檢驗;生存曲線采用Kaplan-Meier方法;生存率比較采用Log-rank檢驗;多因素分析采用Cox回歸分析法。檢驗水平α=0.05。
　　結(jié)

6、果:
　　1.術(shù)后常規(guī)病理診斷淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（A組）中HPA的表達情況:A組原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HPA呈陽性表達均為48例，陽性率為90.6％，術(shù)后常規(guī)病理診斷未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)HPA呈陽性表達7例(13.2％);原發(fā)灶、轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)與未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中HPA平均灰度值逐漸增高，而陽性單位逐漸降低，組內(nèi)比較，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(F灰度值=30.521，P灰度值=0.000;F陽性單位=6.351，P陽性單位=0.021);
　　2.術(shù)后常

7、規(guī)病理診斷無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移組（B組）中HPA的表達情況:B組原發(fā)灶HPA呈陽性表達40例(81.6％)，術(shù)后常規(guī)病理診斷未轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)HPA呈陽性表達5例(10.2％);B組原發(fā)灶HPA平均灰度值明顯低于淋巴結(jié)(F=21.397，P=0.000)，原發(fā)灶HPA陽性單位明顯高于淋巴結(jié)(F=4.827，P=0.037)。
　　3.宮頸鱗癌中HPA的表達與宮頸鱗癌臨床病理特征的關(guān)系:淋巴結(jié)HPA的表達率與宮頸鱗癌分期(P=0.013)、分化程

8、度(P=0.000)、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移(P=0.000)均密切相關(guān)。
　　4.宮頸鱗癌中HPA的表達與生存時間的關(guān)系:Kaplan-Meier生存分析顯示，所有患者的中位生存時間(MOS，medianoverallsurvival)為(49.0±5.9)個月，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者MOS為36.0個月，明顯低于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者的58.5個月(P=0.023);淋巴結(jié)HPA陽性表達者MOS為38.5個月，淋巴結(jié)HPA陰性MOS為57.0個月，二者比較

9、差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P=0.040）。Cox模型多因素分析顯示淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移、HPA表達是影響宮頸癌患者預(yù)后的獨立危險因素(P＜0.05)。
　　結(jié)論:
　　1.HPA在宮頸鱗癌原發(fā)灶和轉(zhuǎn)移淋巴結(jié)中的表達均顯著增高，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移是宮頸癌的獨立預(yù)后因素，可作為宮頸鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的生物學(xué)檢測指標(biāo);
　　2.宮頸鱗癌淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移者MOS明顯低于淋巴結(jié)未轉(zhuǎn)移者，淋巴結(jié)HPA陽性表達者MOS明顯低于淋巴結(jié)HPA陰性表達者，提示淋巴結(jié)HPA