SURVIVIN和PTEN的表達與宮頸鱗癌淋巴結轉移的關系及其臨床意義的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、宮頸癌是最常見的婦科惡性腫瘤,占女性生殖系統惡性腫瘤的首位,其中又以宮頸鱗狀細胞癌(Squamous cell carcinoma,SCC)最為多見。我國是宮頸癌的高發(fā)地區(qū),尤其在農村,其發(fā)生率及死亡率均居婦女惡性腫瘤的首位。宮頸癌的臨床分期、腫瘤分級及淋巴結轉移被公認為是影響宮頸癌預后的重要因素,正確評估宮頸癌生物學行為及其預后情況,對臨床治療及改善患者的生存質量具有極其重要的意義。 腫瘤的發(fā)生發(fā)展是一個多因素作用的復雜過程,

2、癌基因的激活,抑癌基因的失活和細胞的凋亡等均參與了宮頸癌的發(fā)生發(fā)展過程。淋巴系統的轉移亦是多基因異常共同作用的結果,通過細胞信號傳導、生長周期調控、凋亡調節(jié)等網絡來控制腫瘤細胞的增殖、分化及轉移。近年來,宮頸鱗狀細胞癌的淋巴結轉移已被認為是重要的預后因素并引起廣泛的重視。如何在術前檢測是否發(fā)生淋巴結的轉移有待于進一步的研究。 Survivin是近年發(fā)現的凋亡抑制蛋白,主要是抗凋亡和調節(jié)細胞有絲分裂,參與細胞增殖,調節(jié)腫瘤血管生成

3、。它主要是通過抑制蛋白酶級聯過程中位于下游的半胱天冬氨酸酶caspase-3和caspase-7的活性而發(fā)揮凋亡抑制作用。 PTEN是一個具有脂質磷酸酶活性和蛋白磷酸酶活性的腫瘤抑癌基因,主要是阻斷細胞接受的外界生存增殖信號,誘導凋亡;抑制細胞增殖、遷移;抑制P13K/AKT信號傳導,促進凋亡。 Survivin和PTEN是腫瘤細胞浸潤與轉移的重要調節(jié)因子,與胃癌、乳腺癌、膀胱癌、卵巢癌、子宮內膜癌等多種腫瘤的轉移及預后密切相關

4、。Survivin和PTEN的表達與宮頸癌的發(fā)生進展中的作用也逐步受到重視,但目前相關的研究較少,且研究結果不完全一致,有必要進一步探討。本研究采用免疫組化方法,通過觀測Survivin和PTEN在慢性宮頸炎組織、有/無淋巴結轉移的宮頸鱗癌中的表達情況,來分析Survivin和PTEN在宮頸鱗癌淋巴結轉移中的表達情況及臨床意義。 目的: 研究Survivin和PTEN在慢性宮頸炎組織中,無腹膜后淋巴結轉移和有腹膜后淋巴結

5、轉移的宮頸鱗癌中的表達,探討其在宮頸鱗癌的淋巴轉移中的作用。 材料與方法: 1.標本來源 取中山大學附屬二院和深圳市寶安區(qū)人民醫(yī)院2007年1月~2007年9月的宮頸鱗癌患者65例,慢性宮頸炎患者10例?;颊吣挲g24-63歲,平均43.6±8.6歲。所有病例取標本前均未實行放療和化療,資料完整,且經病理確診。其中伴有腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌患者35例,年齡24-63歲,平均43.5±7.5歲。無腹膜后淋巴結轉移宮

6、頸鱗癌患者30例,年齡30-61歲,平均42.2±9.1歲,兩組相比較無統計學差異。宮頸鱗癌按國際婦產科聯盟(FIGO,1996)臨床分期,其中有淋巴結轉移組包括Ⅰ期13例,Ⅱ期22例,無淋巴結轉移組Ⅰ期24例,Ⅱ期6例,兩組相比較有統計學差異。細胞分化程度,有淋巴結轉移組G12例,G218例,G315例;無淋巴結轉移組G11例,G216例,G313例。兩組相比較無統計學差異。全部標本經10%福爾馬林液固定,石蠟包埋。 2.實驗

7、分組 將所選病例分為3組:慢性宮頸炎組10例,無腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組30例,有腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組35例。 3.實驗試劑 Survivin多克隆抗體、PTEN單克隆抗體、即用型SP試劑盒和DAB試劑盒均購自福州邁新生物技術有限公司。 4.免疫組化檢測 采用S-P法染色,切片常規(guī)脫蠟水化后,加入過氧化酶阻斷溶液阻斷內源性過氧化物酶的活性,抗原修復后加入第一抗體,室溫下孵育后再加入鏈霉素抗

8、生物素蛋白-過氧化物酶溶液,DAB顯色,蘇木素復染、脫水、透明、封片。 5.試驗對照 陰性對照組:用PBS代替一抗。陽性對照組:采用已知的子宮頸鱗癌組織切片。 6.結果判斷 免疫組化染色結果按盲法由一位有經驗的病理醫(yī)生獨立進行判斷。光學顯微鏡下觀察并攝片,見細胞中出現棕黃色顆粒的細胞為陽性信號。陽性信號采用Image-pro-plus5.0圖像分析系統進行定量分析,Survivin和PTEN免疫反應產物的

9、標記用光密度(A)表示,在鏡下隨機選取5個視野,每個視野系統自動隨機測定3個不同的部位,提取陽性細胞,測定Survivin和PTEN的A值。 7.統計分析 數據采用SPSS12.0統計軟件處理,實驗數據符合正態(tài)分布者用均數±標準差表示,正態(tài)數據多組間比較采用單因素方差分析,兩組間的比較采用最小顯著差異法(LSD,Least significant Difference)檢驗,非正態(tài)數據兩組間的比較采用Wilcoxon秩和

10、檢驗,采用pearson進行相關分析,取p<0.05為標準。 結果: 1.Survivin和PTEN在慢性宮頸炎組織,宮頸鱗癌組織中的表達 Survivin在慢性宮頸炎組、無腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組、有腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組中的平均光密度值(A)分別為:0.121±0.145,0.217±0.018,0.308±0.051。Survivin的表達在有腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組高于無腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組

11、和慢性宮頸炎組(p<0.05),無腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組高于慢性宮頸炎組(p<0.05)。 PTEN在慢性宮頸炎、無腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組、有腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組中的平均光密度值(A)分別為:0.300±0.024,0.215±0.034,0.126±0.022。PTEN的表達在慢性宮頸炎組高于宮頸鱗癌組(p<0.05),無腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組高于有腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組的表達(p<0.05)。

12、2. Survivin和PTEN在有淋巴結轉移的宮頸鱗癌組織表達的相關性 在宮頸鱗癌組織中,Survivin的表達上調,PTEN的表達下調,提示淋巴結轉移的發(fā)生,二者在有腹膜后淋巴結轉移宮頸鱗癌組中,Survivin與PTEN表達的相關系數R=-0.639,兩者有負相關性。(P<0.05)。 結論: 1.宮頸鱗癌組織中Survivin表達上調,PTEN的表達下調。Survivin及PTEN的表達與宮頸鱗癌的淋巴轉

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