橄欖酚類化合物的分離純化和結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、橄欖(Canarium album L．)為我國(guó)珍貴的藥食兩用資源，具有解酒護(hù)肝、抗菌消炎、抗病毒和解毒等約理功效，橄欖中酚類化合物是其主要的藥效成分，但國(guó)內(nèi)外有關(guān)橄欖酚類化合物組成的研究報(bào)道不多。本論文對(duì)我國(guó)橄欖果實(shí)中的酚類化合物進(jìn)行提取、分離和純化，并對(duì)酚類化合物單體的化學(xué)結(jié)構(gòu)進(jìn)行鑒定研究，以明確橄欖酚類的具體組成，對(duì)于橄欖資源的深加工利用和橄欖中藥的藥理研究具有重要的指導(dǎo)意義和應(yīng)用價(jià)值。 首先采用化學(xué)和儀器分析方法對(duì)福建閩

2、侯檀香橄欖果實(shí)不同部分的化學(xué)組成進(jìn)行了分析測(cè)定，結(jié)果表明，橄欖果肉中蛋白質(zhì)含量為1.7g/100g，脂肪含量為1.1g/100g，可溶性糖含量分別為蔗糖635 mg/100g、果糖232 mg/100g、葡萄糖52mg/100g、棉子糖30 mg/100g和麥芽糖7 mg/100g，有機(jī)酸含量分別為蘋(píng)果酸537 mg/100g、檸檬酸64mg/100g、酒石酸34 mg/100g、奎寧酸28 mg/100g、草酸24 mg/100g、富

3、馬酸14 mg/100g和乙酸11 me/100g，由改良Folin-Ciocalteus比色法測(cè)定的橄欖果肉部分中的酚類成分含量為1.5g/100g，高于地中海油橄欖和普通水果，而橄欖核中酚類含量較低(0.2g/100g)；橄欖核仁中蛋白質(zhì)和脂肪含量之和高達(dá)82.3％，蛋白中氨基酸種類齊全，橄欖核仁油不飽和脂肪酸相對(duì)含量為73.3％，核仁中鈣、鐵等礦物元素豐富，橄欖核仁資源具有很好的開(kāi)發(fā)利用前景。 采用溶劑浸提法、超聲波輔助提

4、取和微波輔助提取方法對(duì)橄欖果肉中的酚類化合物進(jìn)行了提取研究，結(jié)果表明，橄欖酚類化合物的最佳提取溶劑為60～70％(V/V)丙酮溶液，但在實(shí)際工業(yè)應(yīng)用中以60％(V/V)乙醇溶液為宜，溶劑浸提法的最佳提取時(shí)間為1 h，溫度為20～30℃，固液比1:20，提取次數(shù)2次；超聲輔助提取的最適功率為80 w，最佳提取時(shí)間25min；微波輔助提取的最適功率為340 w，提取時(shí)間為30 s。三種提取方法的酚類得率差別不顯著(P>0.05)，提取物酚類

5、組成基本相同，提取率均可達(dá)90％以上，提取物中酚類含量約為34％，相比于溶劑浸提法，超聲波和微波輔助提取方法可顯著縮短橄欖酚類的提取時(shí)間，提高提取效率。 采用大孔樹(shù)脂吸附法對(duì)橄欖酚類提取物進(jìn)行了純化研究，結(jié)果表明，AB-8型大孔吸附樹(shù)脂對(duì)橄欖酚類化合物具有較好的吸附和解吸性能，較適合于橄欖酚類成分的純化，樹(shù)脂柱(ф2.5 cm×30cm)的純化工藝條件為：酚液pH值為其自然pH(3.7)，酚液濃度10 mg/ml，吸附流速2 m

6、l/min，吸附溫度為室溫，此時(shí)樹(shù)脂對(duì)酚類化合物吸附量最大，當(dāng)上樣體積達(dá)2倍柱床體積時(shí)酚類開(kāi)始泄漏，當(dāng)達(dá)到9倍柱床體積時(shí)，樹(shù)脂吸附達(dá)到飽和，對(duì)吸附飽和的樹(shù)脂進(jìn)行洗脫，先用3.5倍柱床體積的去離子水洗去糖、蛋白等雜質(zhì)，然后采用2.5倍柱床體積的90％(V/V)乙醇溶液以1 ml/min的洗脫流速?zèng)_洗樹(shù)脂，酚類解吸率可達(dá)95％以上。純化后的橄欖酚類產(chǎn)品純度從原先粗提物的34％提高到86％，純化倍數(shù)達(dá)2.5倍，高于專利報(bào)道的76％的產(chǎn)品純度，

7、產(chǎn)品酚類得率為1.4％，回收率為74％。 利用硅膠柱層析、AB-8型大孔吸附樹(shù)脂柱層析、聚酰胺柱層析、TSKgel Toyopearl HW-40柱層析以及制備硅膠薄層層析等多種方法對(duì)橄欖酚類提取物中的酚類組成進(jìn)行了分離純化并采用HPLC法對(duì)各酚類化合物的相對(duì)含量進(jìn)行測(cè)定，結(jié)果表明，從橄欖果實(shí)中提取分離出了16種酚類化合物單體，并通過(guò)UV、IR、HPLC-ESI-MS、1D NMR(<'1>H-NMR、<'13>C-NMR、DE

8、PT-135)和2D NMR(<'1>H-<'1>HCOSY、HMQC、HMBC)等波譜檢測(cè)技術(shù)及結(jié)合化學(xué)方法對(duì)酚類化合物單體的結(jié)構(gòu)進(jìn)行了鑒定，橄欖果實(shí)酚類化合物組成分別為：沒(méi)食子酸28.6％、3，3′-二甲氧基-2，2′，4，4′-四羥基聯(lián)苯二甲酸1.5％、六羥基聯(lián)苯二甲酸(HHDP)的烷基化衍生物Ⅳ1.7％和Ⅴ4.1％、沒(méi)食子酸甲酯3.8％、金絲桃苷2.3％、山萘酚-3-O-β-D-葡萄糖苷2.9％、穗花衫雙黃酮1.1％、六羥基聯(lián)苯