甾體類化合物

1、,,,,,,甾醇類,C21甾類,+ C3,+ CH3COOH,甲型強(qiáng)心苷,乙型強(qiáng)心苷,二、生物合成途徑,,,,甾醇,甾體皂苷元,三、甾體類化合物的顏色反應(yīng)原理：甾核 強(qiáng)酸（無水條件） 脫水 雙鍵轉(zhuǎn)位 形成共體系 多烯陽碳離子鹽 系列顏色1、Liebermann-Burchard反應(yīng) L－B 反應(yīng) 黃～紫紅～（褪去）：三萜AC2O－濃H2SO4

2、最 后——污綠：甾體2、Salkowski反應(yīng)氯仿－濃硫酸反應(yīng) CHCL3層——綠色熒光 H2SO4——紅或蘭色,,,,,,,,,3、Tschugaev反應(yīng)冰HAC—乙酰氯 反應(yīng)——因結(jié)構(gòu)不同顯不同顏色4、Rosen-Heimer反應(yīng)三氯乙酸反應(yīng) CCL3COOH加熱60℃ 顯紅～紫紅色 （甾體皂苷） 加熱100℃顯紅～紫紅色（三萜）5、Ka

3、hlenberg反應(yīng) SbCL5反應(yīng)——紫色,,第二節(jié) 強(qiáng)心苷類,一、概述1、定義——存在天然界的一類具有強(qiáng)心作用的甾體苷類2、臨床應(yīng)用——20～30種西地蘭——去乙?；攸S苷丙（C）狄戈辛——異羥基洋地黃毒苷強(qiáng)心靈——黃莢次苷甲、乙及單乙酰黃莢次苷混合物3、應(yīng)用 毒毛旋花子——箭毒，非洲土著各族用 海蔥——埃及古羅馬時(shí)用以治療水腫 蟾酥——強(qiáng)心

4、、解毒、消腫，六神丸的主要原料,,,二、結(jié)構(gòu)與分類,甲 型(強(qiáng)心甾烯類) 乙 型(蟾酥甾烯類),甲型強(qiáng)心苷元以強(qiáng)心甾為母核命名，17位多為β 構(gòu)型；乙型強(qiáng)心苷元以海蔥甾或蟾酥甾為母核。,（一）苷元部分,1、母核分類 甲型強(qiáng)心苷（五元不飽和內(nèi)酯） Δ 20（22）五元內(nèi)酯；Δα/βγ內(nèi)酯

5、 乙型強(qiáng)心苷（六元不飽和內(nèi)酯） Δ 20；22 六元內(nèi)酯；Δ αβ， γδ δ內(nèi)酯,,2、四環(huán)稠和,一般甾核——順/反 反 反 強(qiáng)心甾核——順/反 反 順 A/B 多數(shù) ——順式（5－βH）

6、如： 洋地黃毒苷 少數(shù)—— 反式（5－αH） 如：烏本苷,,3、取代基性質(zhì)及構(gòu)象 C3—OH —— 多數(shù)β體（順式）；少數(shù)α體（反式）命名冠以表（epi）字C14－OH（β）取代 C13－CH3 （β）取代；C10－CH3 （β）取代 （－CH2OH、－CHO、-COOH）,4、命名,洋地黃毒苷元—— 3β、14－二OH

7、，5β強(qiáng)心甾－20（22）－烯,,海蔥苷元—— 3β、14－二OH，海蔥甾－4、20、22－三烯,（二）糖部分 （C3—OH與糖結(jié)合）,種類 α－OH糖 6－去氧糖甲醚D－毛地黃糖 6－去氧糖——D－雞納糖 α－去氧糖 2、6－去氧糖—— D－毛地黃毒糖

8、 2、6－去氧糖甲醚——D－加拿大麻糖,,,,（三）糖與苷元連接方式,Ⅰ型—— 苷元 —（2、6去氧糖）x－（D－glc）yⅡ型—— 苷元－（6去氧糖）λ－（D－glc）y 多Ⅲ型—— 苷元 －（D－glc）y實(shí)例：毛地黃葉——含30多種強(qiáng)心苷 苷元 R

9、1 R2 毛地黃毒苷元 H H 羥基毛地黃毒苷元 H OH 異羥基毛地黃毒苷元 OH H

10、 雙羥基毛地黃毒苷元 OH OH,,四、理化性質(zhì),（一）理化性質(zhì) 1、形狀——苷多為無色結(jié)晶或無定形粉末C-17位為β構(gòu)型者味 苦，α－構(gòu)型者不苦但無強(qiáng)心作用。對(duì)粘膜有刺激性2、溶解性——苷可溶于水，丙酮、及醇等極性溶劑，略溶于 EtOAC、含醇CHCL3，幾乎不溶于醚、苯、石油醚等非極性溶 劑。 苷元難溶于極性溶劑，易溶于CHCL3、EtOAC等。

11、,毛地黃毒苷 烏本苷 特例 ：親脂性苷——毛地黃毒苷（含3個(gè)糖，共有5個(gè)OH）

12、 難溶于水（1：100000）易溶于CHCL3(1:40) 親水性苷——烏本苷 （含1個(gè)糖，有8個(gè)OH） 易溶于水(1:75)，難溶于CHCL3,3、堿水解反應(yīng),（1）?；釴aHCO2 、KHCO2 只作用于 α－去氧糖上的?；鵆a（OH）2 、 Ba（OH）2 作用于 α－去氧糖上的酰

13、 基、苷元上的?；?（2）內(nèi)酯環(huán)堿解 △ 《1》強(qiáng)堿水解 內(nèi)酯開環(huán) H＋ 環(huán)合,,,,,,（2）強(qiáng)堿/ 醇溶液——使△20（22）轉(zhuǎn)位，并使分子異構(gòu)化 活性亞甲基 異構(gòu)化物（Ⅰ） 異構(gòu)化物（Ⅱ）甲型強(qiáng)心苷的活性亞甲基產(chǎn)物可產(chǎn)生顯色反應(yīng),乙型

14、強(qiáng)心苷在醇性苛性堿中，內(nèi)酯環(huán)開裂生成酯，再脫水生成異構(gòu)化物,4、脫水反應(yīng)——叔醇易脫水,,C5—OH、C14－OH H＋ 脫水苷元,5、苷鍵水解1、 酸催化水解（1）溫和酸水解——適于Ⅰ型強(qiáng)心苷 Ⅰ型強(qiáng)心苷0.02～0.05MOL / L 苷元 ＋ x（ α －去氧 HCL / 稀醇△30’ 糖）＋雙糖（此法只能切斷α－去

15、氧糖苷鍵，α－OH糖苷鍵不能斷裂）（2）強(qiáng)烈酸水解—— 適于Ⅱ型、Ⅲ型強(qiáng)心苷強(qiáng)心苷 3～5％ HCL△ 脫水苷元＋x（單糖） （此法因酸度高，加熱時(shí)間長(zhǎng)，有時(shí)需要加壓，所以苷元易脫水）,,,,（3）HCL－Me2CO法（Mannich水解）鈴蘭毒苷 HCL/ Me2CO （室溫2周） 毒毛旋花子苷元＋氯代L－rha丙酮化合物2、酶催化水解—— 只斷裂D－glc 苷鍵Ⅰ型、Ⅱ型強(qiáng)心苷 酶解

16、 次生苷 ＋ D－glc Ⅲ型強(qiáng)心苷 酶解 苷元＋D－glc例如：Ⅰ型－紫花毛地黃苷A 紫花苷酶 毛地黃毒苷 ＋ D－glcⅡ型－紫花毛地黃苷B 紫花苷酶 羥基毛地黃毒苷＋ D－glcⅢ型－烏沙苷 酶解 烏沙苷元 ＋L－鼠李糖蝸牛消化酶——（混和酶）可水解強(qiáng)心苷所有的苷鍵,,,,,,,（三）顯色反應(yīng),《一》作用于αβ不飽和內(nèi)酯環(huán)的反應(yīng)——只適應(yīng)于甲型強(qiáng)心苷1、legal反應(yīng)（亞

17、硝酰鐵氰化鈉）—— 深紅或藍(lán)色2、kedde反應(yīng)（3、5－二硝基苯甲酸）——深紅3、raymaond反應(yīng)（間二硝基苯）—— 紫紅～藍(lán)色4、Baljet反應(yīng)（苦味酸）——橙～橙紅色（注：以上反應(yīng)均需在醇性NaOH溶液中進(jìn)行，，因此，應(yīng)先排除遇堿變紅的反應(yīng)：蒽醌以、查耳酮、橙酮等成分）,《二》作用于α－去氧糖的反應(yīng),1、keller－kiliani（K.K）反應(yīng) （試管反應(yīng)）FeCL3-冰HAC反應(yīng)——只適于游離α－去氧糖或α－

18、去氧糖苷現(xiàn)象：HAC層顯藍(lán)綠色；界面顯紅色（對(duì)結(jié)合在Ⅰ型強(qiáng)心苷中的α－去氧糖和乙?；摩粒パ跆遣环磻?yīng)）2、對(duì)二甲氨基苯甲醛反應(yīng) （紙片反應(yīng)） 噴試劑后90℃加熱30’——顯紅色（分子重排后的縮合反應(yīng)） 3、占噸氰醇反應(yīng)（xanthydrol）——適于任何α－去氧糖苷 樣品＋試劑 水浴△3’ 紅色4、過碘酸-對(duì)硝基苯胺反應(yīng) （顯色劑） 樣品——噴過碘酸試劑10’后再噴對(duì)硝基苯胺試劑 深黃色

19、噴 5％NaOH/MeOH 綠色,三． 強(qiáng)心苷的提取分離,原料強(qiáng)心苷提取分離比較困難： 1. 含強(qiáng)心苷成分比較復(fù)雜，含量較低，2. 強(qiáng)心苷為多糖苷, 常與多糖、皂苷、色素、鞣質(zhì)等性質(zhì)相近成分共存， 3. 共存酶的存在及酸、堿等，易造成強(qiáng)心苷的水解，使成分復(fù)雜化。,,溶劑法（相似者相溶原則）： 原生苷 甲醇、乙醇次生苷 乙醚、氯仿、氯仿-甲醇混合溶劑常用提取溶劑 : 甲醇、70%乙醇（提取效率高；能使酶破壞失活）,

20、,提取,溶劑法: 油脂類雜質(zhì)（種子類藥材）：壓榨法或石油醚脫脂（原料/醇提濃縮液） 葉綠素（地上部分藥材）：靜置析膠法（醇提液濃縮至適當(dāng)醇濃度靜置） 鉛鹽法: 沉淀酚酸類雜質(zhì)（鞣質(zhì)等）， 應(yīng)注意調(diào)整含醇量，減少強(qiáng)心苷的損失注意某些強(qiáng)心苷的脫酰基反應(yīng)吸附法: 活性炭吸附除去葉綠素等脂溶性雜質(zhì)氧化鋁吸附除去糖類、水溶性色素、皂苷等，注意調(diào)整醇濃度,,純化,兩相溶劑萃取法：依分配系數(shù)差異（K）逆流分流法： 依分配系數(shù)

21、差異（K）液滴逆流分溶法（DCCC）: 依分配系數(shù)差異（K）色譜分離法： 對(duì)親脂性苷（單糖苷、次生苷、苷元）：吸附原理 對(duì)弱親脂性苷（原生苷）：分配原理,分離,六、強(qiáng)心苷的波譜特征,（一）UV 甲型強(qiáng)心苷 △αβγ內(nèi)酯λ 220nm（log 4.34）乙型強(qiáng)心苷△αβ，γδ δ內(nèi)酯λ 295～300nm （log 3.95）（二）IR V C＝O 峰可區(qū)別甲型、乙型不同苷元1、甲型強(qiáng)心苷 V C＝O 1

22、800～1700cm－1 有兩個(gè)V C＝O 正常V C＝O 1756 cm－1 ； 非正常Vc＝o 1783 cm－1 2、乙型強(qiáng)心苷Vc＝o 比甲型強(qiáng)心苷低40cm－1也有正常和非正常峰之分 V C＝O 乙型 小于 甲型 （因乙型六元環(huán)共軛體系長(zhǎng)）,,,2、逆流分配法——分離黃花夾竹桃苷A、B采用此法層析法 3、親

23、脂性單糖苷和苷元——吸附層析（硅膠） 4、弱親脂性強(qiáng)心苷（極性相近）——DCCC法例如： R R’ R’’ 黃莢次苷A CHO H H

24、 黃莢次苷B CH3 H H 黃莢次苷C CH2OH H H 黃莢次苷D COOH H H 極性：

25、 D ＞ C ＞ A ＞ B 洗脫順序 B A C D,,,,七、強(qiáng)心苷的生理活性,1、C3－O－糖，可改變強(qiáng)心作用，單糖本身無強(qiáng)心作用2、甾體母核的立體結(jié)構(gòu)與毒性的關(guān)系3、強(qiáng)心苷對(duì)動(dòng)物腫瘤有抑制作用,第三節(jié) 甾 體 皂 苷,一、定義 甾體皂苷(steroidal saponins)是一類由含有27個(gè)碳原子的螺甾醇或呋甾醇與糖

26、結(jié)合而成的寡糖苷。 存在：大多存在于單子葉植物的百合科，石蒜科和薯蕷科等植物中。常用中藥知母、天門冬、麥門冬、七葉一枝花等都含有大量甾體皂甙。 用途：甾體皂甙元是合成甾體避孕藥及激素類藥物的原料。,二、化學(xué)結(jié)構(gòu)分類,依據(jù)皂苷元骨架螺甾烷結(jié)構(gòu)中C25的構(gòu)型和環(huán)的環(huán)合狀態(tài)，可將其分為以下四種類型。,螺甾烷醇類C25為S構(gòu)型、βF L型 neo 型,異螺甾烷醇類C25為R構(gòu)型、αFD型 iso 型,呋甾烷醇

27、F環(huán)為開鏈衍生物,變形螺甾烷醇類F環(huán)為五元四氫呋喃環(huán),二、理化性質(zhì)1、與三萜相似1）性狀 —— 甾體皂苷元有較好晶形 2）溶解性 ——皂苷元溶于Pet 等親脂性溶劑，難溶 于水，皂苷極性加大，水溶性增強(qiáng) 3）表面活性4）與金屬沉淀——中性皂苷：可與堿性醋酸鉛沉淀2、皂苷與甾醇形成穩(wěn)定的分子復(fù)合物（如膽甾醇）條件：1）3β-OH甾醇 3α-OH或3-OH?；荒芊磻?yīng) 2）A

28、/B 環(huán)反式或5位有雙鍵更易于形成,,3、顯色反應(yīng) E試劑（鹽酸對(duì)二甲氨基） A試劑 （Ehrlish) (茴香醛）螺甾 不反應(yīng) 黃 色呋甾 紅 色 黃 色4、呋甾烷醇

29、 F環(huán)開裂的皂苷不產(chǎn)生溶血作用，且表面活性降低,五、甾體皂苷元的波譜特征,1、UV λ nm（200～400）飽和甾體皂苷 無吸收含單雙鍵 205～225 （ε900）含C＝O 285 （ε500）含αβ不飽和酮基 240 （ε11000）含共軛二烯 235

30、,2、IR,指紋區(qū)可區(qū)別C25兩種異構(gòu)體 25βF（L 螺甾烷）：B帶（921cm-1）＞ C帶 （900 cm-1） 25αF（D 異螺甾烷）：C帶 （900 cm-1）＞B帶（921cm-1）,3、MS,EI－MS 139（100％ 基峰） 115 （m 中強(qiáng)峰） 126 （w 弱峰） 或,4、NM

31、R,1、高場(chǎng) 4個(gè)CH3 δ C18 ＜ C19 S C21 ＞ C27 d2、略低場(chǎng) C16－H ；C26－2H ——因與O相鄰δ處在較低磁場(chǎng)3、其他CH2，CH 在1.5～2.5之間呈堆積峰,,5、藥理活性1）抗炎作用2）抗腫瘤——從云南白藥平重樓中分離的甾體皂苷Ⅰ和Ⅳ對(duì)P388、1210、KB細(xì)胞具有顯著的抑制作用。 3）降低膽固醇