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1、目的:在體外制成oxLDL自身免疫復(fù)合物,將其與U937巨噬樣細(xì)胞共同培養(yǎng),通過研究其對(duì)U937巨噬樣細(xì)胞泡沫化和活化的影響,來了解oxLDL免疫學(xué)機(jī)制致動(dòng)脈粥樣硬化的機(jī)制.方法:采用密度離心法(密度=1.010至1.065g/ml)從健康人血漿中提取低密度脂蛋白(LDL),用Gu<'2+>氧化成oxLDL;從136例住院病人血清中用親和層析法提取oxLDL自身抗體.在體外制成兩種形式不同的免疫復(fù)合物:聚乙二醇沉淀的不溶性免疫復(fù)合物(P
2、EG-IC)和RBC吸附的可溶性免疫復(fù)合物(RBC-IC),把這兩種免疫復(fù)合物加入到U937巨噬樣細(xì)胞的培養(yǎng)基中,以oxLDL作陽性對(duì)照,并用熱聚合人γ球蛋白(HAGG)封閉Fcγ受體作阻斷對(duì)照,檢測(cè)各組干預(yù)后的U937巨噬樣細(xì)胞內(nèi)膽固醇及膽固醇酯和上清液中基質(zhì)金屬蛋白酶-1的水平.細(xì)胞內(nèi)膽固醇酯(CE)與總膽固醇(TC)用液相色譜—質(zhì)譜聯(lián)用法測(cè)定,培養(yǎng)液中MMP-1水平用酶聯(lián)免疫吸附法測(cè)定(ELISA).結(jié)論:1.oxLDL的免疫學(xué)機(jī)
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