抗M2受體自身抗體對心房電生理特性的影響及其機制的研究.pdf_第1頁
已閱讀1頁,還剩131頁未讀, 繼續(xù)免費閱讀

下載本文檔

版權(quán)說明:本文檔由用戶提供并上傳,收益歸屬內(nèi)容提供方,若內(nèi)容存在侵權(quán),請進行舉報或認領(lǐng)

文檔簡介

1、研究背景及目的:心房顫動是臨床最常見的心律失常之一。心房顫動發(fā)病率高,嚴(yán)重危害人類健康,是醫(yī)療資源的嚴(yán)重負擔(dān)。因此,加強對房顫防治的研究具有重要臨床意義。房顫的發(fā)病機制復(fù)雜,目前尚未完全明確。許多心臟疾病是房顫的危險因素:心衰、高血壓、心臟瓣膜病等。迷走神經(jīng)興奮后釋放乙酰膽堿,作用于M2受體,改變心房的電生理特性,在房顫的發(fā)生、發(fā)展中有重要的作用。
  M2受體自身抗體是近年來在擴心病、高心病、Chagas心肌病等心臟疾病患者中發(fā)

2、現(xiàn)的一種抗體。前期的研究發(fā)現(xiàn),M2受體自身抗體作用于M2受體細胞外第二環(huán),起部分激動劑的作用,在擴心病等心肌疾病的發(fā)生、發(fā)展中起重要作用。迷走神經(jīng)系統(tǒng)興奮有利于房顫發(fā)生,而且擴心病、高心病、Chagas心肌病等心肌疾病均是心房顫動的高危因素,M2受體自身抗體是否與這些疾病的房顫發(fā)生率高有關(guān)系?近期的臨床調(diào)查顯示,M2受體自身抗體陽性的擴心病患者心房顫動發(fā)病率明顯增高,而且在部分被認為是孤立性房顫的患者中也可以檢出M2受體自身抗體,說明在

3、這些患者中,M2受體自身抗體通過某種方式改變了心房肌的電生理特性,可以促進心房顫動的發(fā)生。但M2受體自身抗體對心房電生理特性有何影響,其作用機制是什么,均不清楚,值得研究。
  本課題通過建立M2受體自身抗體陽性家兔模型,觀察長期M2受體自身抗體負荷對心房電生理特性的影響;研究該模型心房肌組織M2受體及其下游離子通道表達的變化;初步探討M2受體自身抗體對心房影響的機制。旨在從自身免疫的角度提出心房顫動發(fā)病的新機制,為心房顫動的防治

4、提供新思路和理論依據(jù)。
  研究方法:本研究通過給家兔注射人工合成多肽復(fù)合物建立M2受體自身抗體陽性家兔模型,采用ELISA、離體心臟灌流、心臟電生理實驗、比色法、RT-PCR、Westernblot、組織病理學(xué)分析等方法和技術(shù),觀察:(1)動物模型M2受體自身抗體的滴度、特異性;(2)M2受體自身抗體陽性家兔的心率、有無自發(fā)心律失常;(3)M2受體自身抗體陽性家兔的心房有效不應(yīng)期、心房有效不應(yīng)期的頻率適應(yīng)性、房內(nèi)傳導(dǎo)時間、竇房結(jié)

5、功能、心房重復(fù)反應(yīng)、Burst刺激下房顫的發(fā)生率;(4)M2受體及其下游離子通道的表達變化、心房組織cAMP含量變化、乙酰膽堿酯酶活性變化以及心房的纖維化程度變化。
  研究結(jié)果:(1)合成的特征性多肽與生物大分子KLH連接成功。注射多肽-KLH復(fù)合物4周后家兔可檢出抗體,4周以后實驗動物持續(xù)穩(wěn)定表達該抗體,滴度符合要求;Westernblot實驗證實該抗體可特異性識別M2受體,與臨床患者檢出的M2受體自身抗體一致。(2)M2受體

6、自身抗體(M2-AAB)陽性動物可觀察到房性早搏、短陣房速,對照組無;M2-AAB陽性動物心率較正常對照稍慢,但差異無顯著性(P>0.05)。(3)離體心臟灌流電生理實驗顯示:與正常對照相比,M2-AAB陽性動物心房有效不應(yīng)期(AERP)顯著縮短(P<0.01);AERP頻率適應(yīng)性顯著下降(P<0.05);房內(nèi)傳導(dǎo)時間顯著延長(P<0.01);竇房結(jié)恢復(fù)時間和校正的竇房結(jié)恢復(fù)時間均顯著延長(P<0.05);S1S2刺激誘發(fā)的心房重復(fù)反應(yīng)

7、(RAR)明顯增多(P<0.01);Burst刺激下的房顫誘發(fā)率明顯增高(P<0.05)。(4)心房M2受體在心房分布不均勻,左房高于右房(P<0.05);M2-AAB陽性動物左、右心房M2受體密度均增加(P<0.05);M2-AAB陽性動物心房組織cAMP含量下降(P<0.05);M2-AAB陽性動物心房組織乙酰膽堿酯酶活性下降(P<0.05)。(5)乙酰膽堿敏感鉀通道的兩個組成基因Kir3.1(GIRK1)和Kir3.4(GIRK4

8、)在心房分布不均勻,其mRNA水平左房高于右房(P<0.05);M2-AAB陽性動物Kir3.1和Kir3.4在左、右心房的mRNA水平較正常對照均增加(P<0.05);Kir3.4的蛋白水平亦為左房高于右房(P<0.05),M2-AAB陽性動物Kir3.4在左、右心房的蛋白水平較正常對照均增加(P<0.05)。(6)L型鈣通道在左、右心房分布無差別;M2-AAB陽性動物L(fēng)型鈣通道α亞單位的mRNA和蛋白水平較正常對照均增加(P<0.0

9、5)。(7)與正常對照相比,M2-AAB陽性動物的心房纖維化程度顯著增加(P<0.01)。
  研究結(jié)論:(1)注射合成多肽-KLH復(fù)合物可建立持續(xù)、高效、特異地表達M2受體自身抗體的動物模型(2)長期的M2-AAB刺激可造成心房電重構(gòu),改變心房電生理特性,損害竇房結(jié)功能,有利于房顫的發(fā)生。(3)長期的M2-AAB刺激可激活M2受體信號轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),引起乙酰膽堿敏感鉀通道和L型鈣通道的重構(gòu),可能是M2-AAB陽性動物心房電生理變化的原

溫馨提示

  • 1. 本站所有資源如無特殊說明,都需要本地電腦安裝OFFICE2007和PDF閱讀器。圖紙軟件為CAD,CAXA,PROE,UG,SolidWorks等.壓縮文件請下載最新的WinRAR軟件解壓。
  • 2. 本站的文檔不包含任何第三方提供的附件圖紙等,如果需要附件,請聯(lián)系上傳者。文件的所有權(quán)益歸上傳用戶所有。
  • 3. 本站RAR壓縮包中若帶圖紙,網(wǎng)頁內(nèi)容里面會有圖紙預(yù)覽,若沒有圖紙預(yù)覽就沒有圖紙。
  • 4. 未經(jīng)權(quán)益所有人同意不得將文件中的內(nèi)容挪作商業(yè)或盈利用途。
  • 5. 眾賞文庫僅提供信息存儲空間,僅對用戶上傳內(nèi)容的表現(xiàn)方式做保護處理,對用戶上傳分享的文檔內(nèi)容本身不做任何修改或編輯,并不能對任何下載內(nèi)容負責(zé)。
  • 6. 下載文件中如有侵權(quán)或不適當(dāng)內(nèi)容,請與我們聯(lián)系,我們立即糾正。
  • 7. 本站不保證下載資源的準(zhǔn)確性、安全性和完整性, 同時也不承擔(dān)用戶因使用這些下載資源對自己和他人造成任何形式的傷害或損失。

最新文檔

評論

0/150

提交評論