PLC-γ1調(diào)節(jié)人胃腺癌遷移的機制研究.pdf

1、廈門大學學位論文原創(chuàng)性聲明本人呈交的學位論文是本人在導師指導下，獨立完成的研究成果。本人在論文寫作中參考其他個人或集體已經(jīng)發(fā)表的研究成果，均在文中以適當方式明確標明，并符合法律規(guī)范和《廈門大學研究生學術(shù)活動規(guī)范( 試行) 》。另外，該學位論文為( ) 課題( 組)的研究成果，獲得( ) 課題( 組) 經(jīng)費或?qū)嶒炇业馁Y助，在( ) 實驗室完成。( 請在以上括號內(nèi)填寫課題或課題組負責人或?qū)嶒炇颐Q，未有此項聲明內(nèi)容的，可以不作特別聲明。)聲

2、明人( 簽名) ：茁疇枷J 。／o 年等月f 9 日摘要腫瘤轉(zhuǎn)移是指腫瘤細胞從原發(fā)部位通過淋巴道、血管或體腔等途徑轉(zhuǎn)移到其他部位繼續(xù)生長的過程。胃癌是世界上發(fā)病率最高的惡性腫瘤之一，其較高死亡率與腫瘤細胞的轉(zhuǎn)移密切相關(guān)。阻斷遷移、侵襲等腫瘤轉(zhuǎn)移的基本步驟對腫瘤治療至關(guān)重要。近年來分子靶向治療因其針對性強、對正常細胞損傷小而成為治療惡性腫瘤的優(yōu)先選擇。深入探討信號分子在腫瘤轉(zhuǎn)移中作用機制可為篩選治療腫瘤的有效分子靶點提供依據(jù)。P L C

3、一7 1 ( p h o s p h o i n o s i t i d e ．s p e c i f i cp h o s p h o l i p a s e ．7 1 ) 在腫瘤遷移中有著重要的作用，激活的P L C - 丫1 水解磷脂酰肌醇4 ，5 一二磷酸( p h o s p h a t i d y l i n o s i t o l4 ，5 - b i s p h o s p h a t e ，P I P 2 ) ， 生成第

4、二信使肌醇1 , 4 ，5 ．三磷酸( i n o s i t o l1 ，4 ，5 一t r i p h o s p h a t e ，I P 3 ) 和甘油二酯( d i a c y l g l y c e r o l ，D A G } ，繼而誘導鈣離子的釋放，激活P K C ，最終影響細胞的生長、凋亡、侵襲、轉(zhuǎn)移等多個生物學行為。本論文以體外培養(yǎng)的人胃癌細胞系B G C 8 2 3 與S G C 7 9 0 1 以及部分臨床標本為

5、研究對象，探討了P L C ．y 1 在胃癌細胞中調(diào)控腫瘤遷移的作用，并進一步闡明了其在遷移作用中的分子機制。首先采用免疫組化和w e s t e r nb l o t t i n g 的方法，統(tǒng)計分析了正常人胃黏膜組織及胃腺癌組織中P L C ．7 1 蛋白表達。結(jié)果顯示：P L C 吖1 在胃腺癌組織中，尤其是在淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的胃腺癌中表達較高。籍此推測P L C ．T I 與胃腺癌遷移相關(guān)，可能參與了胃腺癌的遷移過程，并在組織芯片中進

6、一步得到驗證。為了探討P L C ．T 1 是否具有調(diào)控胃腺癌細胞遷移的能力，體外培養(yǎng)胃腺癌細胞系B G C 8 2 3 與S G C 7 9 0 1 。經(jīng)劃痕實驗，t r a n s w e l l 和鬼筆環(huán)肽的方法觀察到P L C ．7 1 的活性的抑制可有效阻斷細胞的遷移；同時，w e s t e r n b l o t t i n g 與R T - P C R檢測到P L C - 7 1 的活性被抑制可使M M P 9 蛋白及m

7、 R N A 表達水平減少；隨后，通過相關(guān)抑制劑及R N A 靜默技術(shù)檢測P L C ．7 1 的兩個經(jīng)典下游信號軸I P 3／C a 2 + ／C a M K I I 與D A G ／P K C 均通過調(diào)節(jié)E R K ／M M P 參與胃腺癌細胞遷移活動。細胞遷移活動受細胞內(nèi)復(fù)雜的信號網(wǎng)絡(luò)調(diào)控，探討P L C ．T 1 與相關(guān)信號分子間的關(guān)聯(lián)是深入研究其在遷移過程中的作用機制所必需。已有文獻證實的蛋白激酶B ( P K B ／A k