甜菜夜蛾抗蟲酰肼品系選育及其抗性發(fā)展監(jiān)測研究.pdf

1、甜菜夜蛾抗蟲酰肼品系選育及其抗性發(fā)展監(jiān)測研究結(jié)果如下： 1．采用群體汰選與單對汰選相結(jié)合的方法對甜菜夜蛾進行了12代室內(nèi)汰選，其抗性倍數(shù)只有敏感品系的5．24倍，抗性發(fā)展緩慢；群體汰選中穿插幾代單對汰選可以加速抗性品系的選育。 2．蟲酰肼對甜菜夜蛾蛹期影響明顯，汰選品系（如F1為4．50％）化蛹率明顯低于敏感品系（93．33％）。當飼毒濃度相同時，化蛹率有恢復的趨勢，如F6、F7、F8三代飼毒濃度都為0．67 mg/kg

2、，化蛹率分別為3．70％、9．08％、11．20％。隨著汰選世代增加，畸蛹率先是緩慢增加，到F7代時達到最大33．81％， F8代開始下降，但均比敏感品系高。汰選品系雌雄蛹重均下降，提高飼毒濃度時下降程度加大，如飼毒濃度由F8代0．67mg/kg增加到F9代0．80 mg/kg，雌蛹重由89．43 mg下降到75．19 mg。雌雄蛹性比變化很小，雌蛹比率在46．24～59．51％之間。說明對敏感品系施加選擇壓影響汰選品系的生長發(fā)育，但對

3、種群性比影響較小。 雌雄成蟲羽化率都低于敏感品系，F(xiàn)5代最低，分別比敏感品系低79．38％、71．07％，后又緩慢恢復。汰選品系雌雄成蟲畸蛾率比敏感品系高，分別是敏感品系的1．43～3．17倍、1．11～3．13倍。說明蟲酰肼對甜菜夜蛾成蟲羽化有一定抑制作用。 汰選品系雌雄成蟲LT50分別比敏感品系縮短了1．59d、2．17d；單雌產(chǎn)卵量顯著低于敏感品系，F(xiàn)10代最低，僅為敏感品系的0．30倍；孵化率變化較小，但仍比敏感

4、品系低， F10、F11代與敏感品系差異極顯著，分別相當于敏感品系的56．03％和55．53％。說明蟲酰肼對甜菜夜蛾成蟲的影響不僅表現(xiàn)在成蟲壽命的縮短，而且表現(xiàn)在單雌產(chǎn)卵量、孵化率的下降。 3．汰選品系無毒飼養(yǎng)子代與汰選品系當代相比，化蛹率、畸蛹率、平均蛹重、羽化率、畸蛾率、成蟲死亡中時、單雌產(chǎn)卵量及孵化率均有不同程度的恢復，如F6（3）、F6（6）代單雌產(chǎn)卵量比F6代分別增加到了180．67、229．00粒/♀；化蛹率F7（1

5、）、F7（2）、F7（3）代比F7代分別增加到了61．12％、58．52％、65．85％，但仍未恢復到敏感品系的水平。表明蟲酰肼是一種緩效且持效性較強的殺蟲劑，其對子代的后續(xù)效應至少可以影響3代，汰選品系要恢復到敏感品系可能需要多個世代的積累。 4．飼毒法室內(nèi)毒力測定結(jié)果表明，對蟲酰肼產(chǎn)生抗藥性的甜菜夜蛾對甲氧蟲酰肼、氟啶脲、溴蟲腈和毒死蜱抗性倍數(shù)分別為1．00、0．89、0．82和0．94，無明顯交互抗性；與滅多威、高效氯氰菊

6、酯和多殺菌素抗性倍數(shù)分別為1．45、1．78和2．52倍，有一定程度的交互抗性。 5．蟲酰肼處理甜菜夜蛾敏感品系和第九代汰選品系同一天所產(chǎn)卵塊，其孵化抑制中濃度分別為179．38、160．71 mg/kg，幼蟲存活抑制中濃度分別為18．64、30．53mg/kg，說明蟲酰肼對甜菜夜蛾敏感品系、汰選品系卵孵化率及孵化后幼蟲存活率均有抑制作用，但對孵化的抑制作用是敏感品系小于汰選品系，對孵化后幼蟲存活的影響則是前者大于后者。

7、 蟲酰肼處理甜菜夜蛾敏感品系和第八代汰選品系初孵幼蟲，幼蟲存活率和化蛹率隨處理濃度的增加而降低，幼蟲歷期延長，與0．08 mg/kg相比，0．40mg/kg幼蟲存活率分別為0．04、0．24倍，化蛹率分別為0．05、0．21倍，幼蟲歷期分別延長了2．71、6．19d。同一濃度下，汰選品系幼蟲存活率和化蛹率均高于敏感品系，幼蟲存活率分別是敏感品系的1．54—10．01倍，化蛹率分別是1．70—8．01倍，幼蟲歷期比敏感品系縮短0．94～2

8、．59d，表明汰選品系受影響小于敏感品系。 蟲酰肼處理甜菜夜蛾敏感品系和第十一代汰選品系3齡幼蟲，與0．20 mg/kg相比，0．125mg/kg幼蟲化蛹率分別為6．00、4．60倍，說明化蛹率隨蟲酰肼濃度的增加而降低。雌雄蛹重均有遞減的趨勢，兩品系同一濃度下差異不大。雌蛹比例隨濃度增加變化較小，敏感品系雌蛹比例≤50．00％，汰選品系雌蛹比例≥50．00％。羽化率除在2．00 mg/kg濃度時影響較大外，其它處理濃度下影響較小

9、。 種群適合度研究表明，汰選品系相對敏感品系存在生長發(fā)育和繁殖不利性，相對適合度為0．31。 6．采用分光光度法測定解毒酶比活力，結(jié)果表明汰選品系及其分時處理、自然品系CarE比活力分別是敏感品系的1．20、1．34、1．94、1．80、2．67倍，差異極顯著；GST比活力分別是敏感品系的2．34、5．11、5．62、3．76、0．96倍，差異極顯著，說明蟲酰肼具有誘導CarE和GST活性增強的作用，甜菜夜蛾對蟲酰肼抗藥

10、性的形成可能與此有關(guān)。 CarE酶動力學研究發(fā)現(xiàn)，汰選品系Km值是敏感品系的0．83倍，差異顯著，即汰選品系具有更大的底物親和力，這可能是導致汰選品系CarE活性增強的原因。自然品系Km值、Vmax值分別是敏感品系的2．33倍和4．97倍，與敏感品系、汰選品系間均存在極顯著的差異，說明自然品系不僅酶分子結(jié)構(gòu)發(fā)生了明顯的變化，而且酶量的表達也明顯的增加。酯酶同工酶電泳酶譜在遷移率、譜帶數(shù)目、酶帶染色深淺等方面均存在明顯差異，分析

11、結(jié)果與CarE活力測定、酶動力學研究結(jié)果相符。 7．采用分光光度法測定靶標酶AchE比活力，結(jié)果表明汰選品系及其分時處理、自然品系A(chǔ)chE比活力與敏感品系相比，比值在1．09～2．33之間，差異極顯著，表明AchE對蟲酰肼敏感，甜菜夜蛾對蟲酰肼產(chǎn)生抗藥性與AchE無關(guān)。 8．采用分光光度法測定保護酶比活力，與敏感品系相比，汰選品系CAT、POD、SOD比活力分別達到了0．94、0．82、3．72倍，自然品系CAT、POD

12、、SOD比活力分別達到了2．79、4．33、7．40倍，汰選品系3個分時處理CAT、POD、SOD比活力分別是敏感品系的1．43、1．52、4．75倍，1．42、1．44、3．54倍，2．19、3．39、6．54倍，比活力均有不同程度上升，且3個分時處理比活力均是先上升，接著稍下降，后又快速上升，其變化規(guī)律基本一致，其中SOD比活力的變化較CAT、POD明顯，由此可以推斷甜菜夜蛾對蟲酰肼抗藥性的增強可能與其體內(nèi)保護酶系中SOD有關(guān)，而與

13、CAT、POD有一定關(guān)系。 9．采用分光光度法測定表皮酚氧化酶PO和幾丁質(zhì)酶比活力，結(jié)果表明甜菜夜蛾蟲酰肼汰選品系這兩種酶比活力比敏感品系分別上升37．64％和27．37％，自然品系兩酶比活力分別上升59．63％和60．29％，說明這兩種酶可能參與了蟲酰肼抗藥性的產(chǎn)生。PO動力學研究表明，汰選品系Km、Vmax分別是敏感品系的2．53、2．52倍，差異極顯著，說明PO與底物的親和力下降，但酶量的表達增加，PO活性的增強是酶量的過