鼻咽癌中EB病毒潛伏感染與免疫細(xì)胞因子IL-17-IL-17R信號(hào)軸的關(guān)系.pdf

1、目的：研究EBER和IL-17、IL-17R在鼻咽黏膜慢性炎及鼻咽癌組織中表達(dá)的意義及關(guān)系，研究recombinant human IL-17細(xì)胞因子對(duì)鼻咽癌細(xì)胞系C666-1和CNE-2Z細(xì)胞活性的影響，探討鼻咽癌中EB病毒潛伏感染與免疫細(xì)胞因子IL-17/IL-17R信號(hào)軸的關(guān)系。
　　 方法：采用原位雜交和免疫組化SP法檢測(cè)92例鼻咽癌、15例鼻咽黏膜慢性炎中EBER和IL-17R、IL-17蛋白的表達(dá)。免疫細(xì)胞化學(xué)和We

2、stern blot方法檢測(cè)鼻咽癌細(xì)胞系C666-1和CNE-2Z細(xì)胞IL-17R蛋白的表達(dá)。分別用不同濃度recombinanthuman IL-17細(xì)胞因子(0.1ng/mL、0.5ng/mL、1ng/mL、5ng/mL、10ng/mL、50ng/mL、100ng/mL、500ng/mL)作用于鼻咽癌細(xì)胞系C666-1和CNE-2Z細(xì)胞24h、48h、72h，CCK8法檢測(cè)細(xì)胞增殖活性。
　　 結(jié)果：⑴EBER和IL-17、

3、IL-17R蛋白在57例鼻咽癌原發(fā)灶中的表達(dá)陽(yáng)性率分別為91.23％(52/57)、63.16％(36/57)、77.19％(44/57)，而在15例鼻咽黏膜慢性炎組織中的陽(yáng)性表達(dá)率分別為0％(0/15)、33.33％(5/15)、26.7％(4/15)。組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.01或P＜0.05)。⑵92例鼻咽癌組織中，EBER在各臨床病理因素分組中均高表達(dá)，組間差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05)。IL-17蛋白在鼻咽癌原發(fā)灶

4、轉(zhuǎn)移組(P＜0.01)、復(fù)發(fā)組(P＜0.05)及TNMⅢ、Ⅳ期組中(P＜0.05)均高表達(dá)，組間差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。IL-17R蛋白在鼻咽癌復(fù)發(fā)組高表達(dá)，組間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。⑶92例鼻咽癌組織中，EBER與IL-17蛋白表達(dá)呈正相關(guān)（r=0.219，P＜0.05）;EBER與IL-17R蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)（r=0.339，P＜0.01）。IL-17與IL-17R蛋白表達(dá)呈顯著正相關(guān)（r=0.684，P＜0.01）。⑷

5、免疫細(xì)胞化學(xué)法和Western blot均可檢測(cè)到鼻咽癌細(xì)胞系C666-1和CNE-2Z細(xì)胞中有IL-17R蛋白呈膜陽(yáng)性表達(dá)。⑸分別用50ng/mL(P＜0.05)、100ng/mL和500ng/mL(P＜0.01)濃度recombinanthuman IL-17作用于C666-1細(xì)胞24h，細(xì)胞活性均明顯高于對(duì)照組。分別用100ng/mL(P＜0.05)和500ng/mL(P＜0.01)濃度recombinant human IL-1

6、7作用于C666-1細(xì)胞48h，細(xì)胞活性均明顯高于對(duì)照組。分別用50ng/mL和500ng/mL濃度recombinant human IL-17作用于C666-1細(xì)胞72h，細(xì)胞活性均明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。⑹用各種濃度recombinant human IL-17作用于CNE-2Z細(xì)胞24h，對(duì)細(xì)胞活性無(wú)明顯影響(P＞0.05)。分別用100ng/mL(P＜0.05)和500ng/mL(P＜0.01)濃度recombinan

7、t human IL-17作用于CNE-2Z細(xì)胞48h，細(xì)胞活性均明顯高于對(duì)照組。分別用50ng/mL、100ng/mL和500ng/mL濃度recombinant human IL-17作用于CNE-2Z細(xì)胞72h，細(xì)胞活性均明顯高于對(duì)照組(P＜0.05)。
　　 結(jié)論：①鼻咽癌組織中EBER和IL-17蛋白、IL-17R蛋白均呈高表達(dá)，三者表達(dá)有正相關(guān)性。鼻咽癌原發(fā)灶中淋巴細(xì)胞高表達(dá)IL-17蛋白與鼻咽癌復(fù)發(fā)、轉(zhuǎn)移及臨床TN

8、M分期進(jìn)展均有關(guān)，IL-17蛋白促腫瘤進(jìn)展的作用可能與鼻咽癌細(xì)胞IL-17R蛋白表達(dá)呈正相關(guān)。②recombinant human IL-17細(xì)胞因子對(duì)體外培養(yǎng)的鼻咽癌細(xì)胞系C666-1和CNE-2Z細(xì)胞均有促增殖作用，recombinant human IL-17對(duì)鼻咽癌CNE-2Z細(xì)胞的促增殖作用呈時(shí)間和劑量依賴(lài)性。③鼻咽癌中EBV潛伏感染與免疫細(xì)胞因子IL-17/IL-17R信號(hào)軸之間有相關(guān)性。EBV潛伏感染可能通過(guò)激活鼻咽癌組織