炎癥因子對非小細胞肺癌細胞表達IL-17R的影響.pdf

1、目的：探討人重組炎癥因子(inflammatorycytokines)對體外培養(yǎng)的人非小細胞肺癌A549和H460細胞株白介素17受體(interleukin17R,IL-17R)表達水平的影響。
　　方法：分別用不含或者含有不同濃度或兩兩組合的人重組炎癥因子(LPS、TNF-a、IL-6、IL-8、IL-1β)的RPMI-1640培養(yǎng)基培養(yǎng)A549、H460兩種細胞株,然后進行:(1)定量RT-PCR法檢測炎癥因子作用后A549

2、、H460細胞表達IL-17RmRNA的水平。(2)流式細胞術(shù)檢測炎癥因子刺激A549、H460細胞后IL-17R膜蛋白的表達水平。
　　結(jié)果：發(fā)現(xiàn):(1)用不同濃度或兩兩組合的人重組炎癥因子處理6h后,A549細胞的IL-17RmRNA的表達:在IL-8(10pg/ml)、TNF-a+IL-8(10pg/ml+10pg/ml)、LPS+IL-8(10pg/ml+100ng/ml)、LPS+IL-1β(100ng/ml+0.1ng

3、/ml)、IL-1β+IL-6(0.1ng/ml+10pg/ml)、IL-1β+IL-8(0.1ng/ml+10pg/ml)、IL-6+IL-8(10pg/ml+10pg/ml)較對照組增高有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),在TNF-a(100pg/ml、1ng/ml)、LPS(10ng/ml)、IL-1β(1ng/ml)較對照組下降有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),IL-6各濃度(10pg/ml、50pg/ml、100pg/ml、1ng/ml

4、、10ng/ml、100ng/ml)均無明顯統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05);H460細胞的IL-17RmRNA的表達:在IL-6(1ng/ml;10ng/ml;100ng/ml)、TNF-a(1ng/ml;10ng/ml;100ng/ml)、TNF-a+LPS(100ng/ml+10ng/ml)、TNF-a+IL-1β(100ng/ml+1ng/ml)、TNF-a+IL-6(100ng/ml+100ng/ml)、LPS+IL-6(10ng/

5、ml+100ng/ml)較對照組增高明顯有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),而在IL-8(10ng/ml、100ng/ml)、TNF-a(50pg/ml)、IL-1β(0.01ng/ml)、IL-1β+IL-8(1ng/ml+10pg/ml)、IL-6+IL-8(100ng/ml+10pg/ml)較對照組下降有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),LPS各濃度(10ng/ml、100ng/ml、1000ng/ml)與對照組比較差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.

6、05)。
　　(2)我們選用以上能使A549、H460細胞表達IL-17RmRNA增高的炎癥因子濃度來刺激這兩種細胞,流式細胞術(shù)來測定其膜蛋白的表達量,其結(jié)果如下:A549細胞的IL-17R膜蛋白的表達:在TNF-a+IL-8(10pg/ml+10pg/ml)、IL-1β+IL-6(0.1ng/ml+10pg/ml)IL-17R膜蛋白的增高較對照組有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),與其基因表達相吻合,而其余四個濃度IL-17R膜蛋白的

7、表達較對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05),并沒隨基因表達增高而增高。H460細胞的IL-17R膜蛋白的表達:在TNF-a(100ng/ml)、TNF-a+IL-1β(100ng/ml+1ng/ml)、TNF-a+IL-6(100ng/ml+100ng/ml)、LPS+IL-6(10ng/ml+100ng/ml)IL-17R膜蛋白的表達較對照組增高有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05),其他濃度較對照組差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。

8、　　結(jié)論：(1)單個炎癥因子體外刺激A549、H460細胞;IL-8(10pg/ml)能促進A549細胞IL-17RmRNA的表達,LPS、TNF-a、IL-1β均在特定濃度抑制其mRNA的表達,IL-6各濃度對其基因的表達無影響。TNF-a、IL-6的高濃度能夠促進H460細胞IL-17RmRNA的表達,IL-8、IL-1β在特定濃度抑制其基因的表達,LPS各濃度對其基因的表達無影響。(2)我們選用每種炎癥因子的最適濃度(基因表達趨勢