聯(lián)合裝載EGFR siRNA和姜黃素的碳納米管制劑及其抗癌活性研究.pdf

1、在許多國家和地區(qū)，肺癌的發(fā)病率占惡性腫瘤的首位。絕大數(shù)肺癌起源于支氣管粘膜上皮。目前肺癌治療主要以外科切除為主化療為輔，手術(shù)治療僅適用于肺癌細(xì)胞未發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移和淋巴轉(zhuǎn)移時，而且成功率不高，化療雖是治療癌癥的一種的常用方法，但是化療藥物的毒副作用及其耐藥性，極大的限制了其在臨床的的使用。中國傳統(tǒng)中藥因其具有多靶點(diǎn)、多效應(yīng)的作用，及不良反應(yīng)小、不易產(chǎn)生耐藥性等優(yōu)點(diǎn)，逐漸成為抗腫瘤研究中的新熱點(diǎn)。同時，隨著分子生物學(xué)得飛速發(fā)展，毒副作用較低的

2、基因治療越來越受到人們的關(guān)注。
　　 表皮生長因子受體(EGFR)是原癌基因cerbB1的表達(dá)產(chǎn)物，是表皮生長因子受體(HER)家族成員之一。HER家族在細(xì)胞生理過程中發(fā)揮重要的調(diào)節(jié)作用。EGFR表達(dá)于正常上皮細(xì)胞表面，但在一些腫瘤細(xì)胞中過度表達(dá)，特異性抑制EGFR表達(dá)可以降低表皮生長因子活性，從而抑制癌細(xì)胞生長直至癌細(xì)胞死亡，所以EGFR可以作為基因治療的理想靶點(diǎn)。
　　 在以EGFR為靶點(diǎn)的腫瘤基因治療中，一般采用s

3、iRNA干擾技術(shù)來沉默靶向基因，本實(shí)驗(yàn)根據(jù)RNA干擾的設(shè)計原則，以EGFR為靶點(diǎn)、設(shè)計靶向EGFR基因的小干擾RNA，以EGFR高表達(dá)的肺癌細(xì)胞A549研究對象，采用SRB和RT-PCR的方法，從3條siRNA序列中篩選出沉默率較高的siRNA序列。
　　 碳納米管特殊的光學(xué)性質(zhì)、大的比表面積、高的熱穩(wěn)定性、化學(xué)惰性、中空結(jié)構(gòu)、獨(dú)特的跨膜能力均使碳納米管成為理想的藥物載體，尤其是碳納米管大的比表面積更是為藥物提供了更大的空間，同

4、時碳納米管的穩(wěn)定性和靈活性可以提高藥物的生物利用度。因此碳納米管在腫瘤的靶向治療中具有很大的潛力。
　　 姜黃素(curcumin)是一種來源于姜黃的天然黃色多元酚類化合物，姜黃素在體內(nèi)和體外可通過多種機(jī)制產(chǎn)生抗癌活性，抑制腫瘤的細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)多種腫瘤細(xì)胞的體外凋亡，姜黃素現(xiàn)在已經(jīng)應(yīng)用于體內(nèi)多種癌癥的治療和預(yù)防，并已進(jìn)入二期臨床試驗(yàn)階段。但是姜黃素較低的水溶性和生物利用度限制了姜黃素在抗癌治療中的使用。本實(shí)驗(yàn)以修飾的碳納米管為載

5、體，有效的增加姜黃素的水溶性，使其濃度提高至1.8mg/ml。O-SWNTs-Cur-DOTAP載藥體系的粒徑穩(wěn)定在254±2.34nm，電位在15±1.11mv。紅外和差示熱分析結(jié)果說明載藥體系中姜黃素不是以結(jié)晶狀態(tài)存在。體外釋放中載藥體系顯示了速釋和緩釋結(jié)合的特點(diǎn)，姜黃素的載藥體系在溫度加速實(shí)驗(yàn)和光照加速實(shí)驗(yàn)中顯示出了一定的穩(wěn)定性。體內(nèi)藥動實(shí)驗(yàn)說明姜黃素的載藥體系與姜黃素相比具有一定的優(yōu)勢。
　　 化學(xué)治療和放射治療的治療原