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文檔簡(jiǎn)介
1、為了減少癌癥的發(fā)病率和死亡率,通過(guò)癌癥化學(xué)預(yù)防來(lái)逆轉(zhuǎn)或延遲致癌作用是一種可以選擇的、相對(duì)費(fèi)用低廉的戰(zhàn)略方案。最近,由于在食物供給中的日常使用、多樣和有效的抗癌分子機(jī)制、對(duì)健康人群的可接受性以及很大的治療指數(shù),提取或純化的植物化學(xué)物成為癌癥化學(xué)預(yù)防藥物研究的焦點(diǎn)。在大量被研究的植物化學(xué)物中,姜黃素類化合物脫穎而出,在細(xì)胞培養(yǎng)和臨床前動(dòng)物模型試驗(yàn)中表現(xiàn)出了巨大的癌癥化學(xué)預(yù)防活性。但是,由于水溶性差、穩(wěn)定性低以及生物利用度低等缺點(diǎn),姜黃素并沒(méi)
2、有實(shí)現(xiàn)臨床應(yīng)用。鑒于此,本論文通過(guò)簡(jiǎn)單的溶劑沉淀法或化學(xué)沉淀法,制備出了三種載藥量高、生理環(huán)境下穩(wěn)定、低毒、生物相容性好、刺激響應(yīng)型的姜黃素納米復(fù)合物,提高了姜黃素的水溶性和穩(wěn)定性,增強(qiáng)了其生物活性和生物利用度;同時(shí),探究了姜黃素納米復(fù)合物的抗氧化性及在體內(nèi)外抑制癌細(xì)胞增殖的能力和機(jī)制,為食品中難溶性功能因子的開發(fā)以及姜黃素納米復(fù)合物在癌癥化學(xué)預(yù)防中的應(yīng)用提供了重要的理論參考和科學(xué)依據(jù)。本論文主要研究?jī)?nèi)容與結(jié)果如下:
(1)姜
3、黃素-聚乙烯吡咯烷酮納米膠囊的制備及其體外癌癥化學(xué)預(yù)防活性研究。
通過(guò)簡(jiǎn)單的酯化作用和溶劑沉淀法制備出了姜黃素-聚乙烯吡咯烷酮納米膠囊。電鏡、光譜表征和穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明,姜黃素-聚乙烯吡咯烷酮納米膠囊是直徑約為50nm、載藥量為89.54±3.65%、載藥率為96.77±1.02%的球形顆粒,在磷酸鹽緩沖溶液中具有較高的水解穩(wěn)定性和光照穩(wěn)定性,而且能夠有效、持續(xù)地釋放負(fù)載的姜黃素分子。自由基清除和細(xì)胞毒性試驗(yàn)結(jié)果表明,姜黃素
4、-聚乙烯吡咯烷酮納米膠囊對(duì)二苯代苦味酰基自由基和羥基自由基都有較高的清除能力,而且能夠通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡抑制HepG2人肝癌細(xì)胞增殖。
(2)姜黃素-納米硒復(fù)合顆粒的制備及其體外癌癥化學(xué)預(yù)防活性研究。
通過(guò)pH-協(xié)助的方法制備出了姜黃素-納米硒復(fù)合顆粒。電鏡、光譜表征和穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明,姜黃素-納米硒復(fù)合顆粒是直徑約為125 nm的球形顆粒,姜黃素分子通過(guò)Se-O鍵牢固地結(jié)合到了納米硒表面,這同時(shí)提高了姜黃素和納米硒
5、在磷酸鹽緩沖溶液和無(wú)血清培養(yǎng)基中的穩(wěn)定性。自由基清除試驗(yàn)結(jié)果表明,在低濃度時(shí),姜黃素-納米硒復(fù)合顆粒的自由基清除能力主要是負(fù)載的姜黃素分子的自由基清除能力,納米硒沒(méi)有表現(xiàn)出明顯的自由基清除能力;而在高濃度時(shí),納米硒和姜黃素都具有顯著的自由基清除能力,且二者表現(xiàn)出協(xié)同作用。姜黃素-納米硒復(fù)合顆??梢酝ㄟ^(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞中半胱天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和半胱天冬氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)活化以及促進(jìn)細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)生成
6、來(lái)誘導(dǎo)HepG2細(xì)胞凋亡,進(jìn)而抑制HepG2細(xì)胞增殖。
(3)姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒的制備及其體外癌癥化學(xué)預(yù)防活性研究。
通過(guò)“一鍋法”制備出了負(fù)載姜黃素的類沸石咪唑骨架納米顆粒,再經(jīng)透明質(zhì)酸表面修飾得到了姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒。電鏡、光譜表征和穩(wěn)定性試驗(yàn)結(jié)果表明,姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒是直徑約為130 nm、載藥量為10.1%、載藥率為88.2%、形狀呈截頂立方
7、體的顆粒。通過(guò)改變反應(yīng)體系中姜黃素的濃度,成功實(shí)現(xiàn)了對(duì)類沸石咪唑骨架納米顆粒大小和形狀的調(diào)控。藥物釋放試驗(yàn)表明,姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒具有pH響應(yīng)的特性,在酸性磷酸鹽緩沖溶液中,釋放姜黃素的速率明顯加快。細(xì)胞毒性試驗(yàn)表明,姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒能夠?qū)⒏邉┝康慕S素選擇性遞送到MCF-7人乳腺癌細(xì)胞中,使MCF-7細(xì)胞阻滯于細(xì)胞周期的S期和G2/M期,同時(shí)增加MCF-7細(xì)胞內(nèi)ROS的生成,誘導(dǎo)MCF-7
8、細(xì)胞凋亡,最終抑制MCF-7細(xì)胞增殖。
(4)姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒在體內(nèi)抑制乳腺癌生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移的研究。
通過(guò)建立4T1肺轉(zhuǎn)移小鼠模型研究了姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒在體內(nèi)用于癌癥化學(xué)預(yù)防的能力。細(xì)胞毒性試驗(yàn)表明,姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒能夠通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡來(lái)抑制4T1小鼠乳腺癌細(xì)胞增殖,而且經(jīng)姜黃素-類沸石咪唑骨架-透明質(zhì)酸納米顆粒處理后,4T1細(xì)胞在體外的遷移和侵襲能
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