重組hIL-10抗家兔皮膚移植反應(yīng)及其對Treg細胞、IL-10、TGF-β的影響.pdf

1、目的：經(jīng)rhIL-10或CsA作用，觀察家兔皮膚移植后移植皮片出現(xiàn)排斥的時間、移植皮片存活時間及外周血液中Treg細胞、IL-10、TGF-β的變化，研究IL-10在抗移植排斥反應(yīng)治療中Treg細胞、調(diào)節(jié)因子IL-10、TGF-β的變化，探討IL-10抗免疫排斥作用的機制。觀察IL-10單獨或與CsA協(xié)同應(yīng)用的抗免疫排斥效果，為減少CsA藥品副作用尋找新型抗移植免疫的藥物，為IL-10的臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。方法：（1）家兔36只，分受

2、體和供體各18只，每只供體兔為1只受體兔供皮，于背部行皮膚移植手術(shù)。受體隨機分成6組分別為①rhIL-10小劑量組：rhIL-105μg/kg/d；②rhIL-10大劑量組：rhIL-1010μg/kg/d，③CsA小劑量組：CsA5mg/kg/d；④CsA大劑量組：CsA10mg/kg/d；⑤聯(lián)合組：rhIL-105μg/kg/d+CsA5mg/kg/d；⑥陰性對照組：NS1ml/d。各組均于術(shù)前1天開始肌注給藥，連續(xù)用藥10天。（2

3、）術(shù)后每天觀察移植皮片情況，以移植皮片色澤變暗、發(fā)黑變硬、紅腫水皰及皮片翹起等現(xiàn)象來判定移植排斥，以移植皮片面積80％出現(xiàn)以上現(xiàn)象視為皮片壞死，記錄排斥反應(yīng)時間及皮片存活時間。（3）各組分別于術(shù)前1天、術(shù)后1、4、7、14、21、28天采集外周血，流式細胞術(shù)檢測外周血CD4+CD25+Treg/CD4+T細胞比值，酶聯(lián)免疫吸附試驗檢測外周血細胞因子IL-10、TGF-β水平。比較各組方案對皮片存活時間及各項指標的影響。（4）術(shù)后30天采

4、集外周血，檢測血清IL-10抗體。結(jié)果：（1）實驗組家兔移植皮片出現(xiàn)排斥的時間與⑥對照組相比均有一定程度延緩，除①組外其他實驗組與⑥組相比差異均有顯著性（P<0.05）。（2）家兔移植皮片存活時間較⑥組明顯延長，且差異顯著（P<0.05）。實驗組之間比較，⑤組較①組皮片存活時間長，且差異顯著（P<0.05）。⑤組較③組皮片存活時間長，差異無顯著性（P>0.05）。（3）皮膚移植術(shù)后各組家兔外周血CD4+CD25+Tre/CD4+T細胞比

5、值較術(shù)前明顯升高（P<0.05）。術(shù)后4天、術(shù)后7天①組與②組均高于⑥組、③組、④組且差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。術(shù)后7天④組比⑥組低，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。⑤組與①組及③組比較，差異有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.05）。（4）皮膚移植術(shù)后各組家兔外周血IL-10水平較術(shù)前明顯升高（P<0.05）。①組、②組在術(shù)后1、4、7天均較③組、④組、⑤組高（P<0.05）。（5）皮膚移植術(shù)后各組家兔外周血TGF-β水平較術(shù)前明顯升高（

6、P<0.05）。①組、②組、③組、④組、⑤組在術(shù)后各采樣點TGF-β水平差異均無統(tǒng)計學(xué)意義（P>0.05）。（6）家兔術(shù)后外周血IL-10水平與CD4+CD25+Treg/CD4+T細胞水平呈正相關(guān)。（7）各組家兔用藥血清IL-10抗體與抗體陽性對照組有顯著性差異（P<0.05）。結(jié)論：（1）IL-10可推遲家兔移植皮片出現(xiàn)排斥的時間，可以延長移植皮片的存活時間。（2）IL-10抗皮膚移植反應(yīng)與CsA有一定的協(xié)同作用。（3）IL-10抑