近江牡蠣（Ostrea rivularis）兩個(gè)野生種群遺傳多樣性的研究.pdf

1、近江牡蠣(Ostrearivularis)廣泛分布在我國(guó)南北沿海，多棲息在河口附近鹽度較低的內(nèi)灣，是我國(guó)主要的養(yǎng)殖貝類之一。作為經(jīng)濟(jì)貝類，通過(guò)對(duì)其分子遺傳學(xué)水平的研究可以讓人們更好的保護(hù)、利用和開(kāi)發(fā)這種資源，創(chuàng)造更好的經(jīng)濟(jì)效益。廣東沿海對(duì)近江牡蠣的養(yǎng)殖有三百余年的悠久歷史，湛江官渡和陽(yáng)江程村兩地的近江牡蠣是目前廣東沿海具有規(guī)模性開(kāi)發(fā)和應(yīng)用價(jià)值的兩個(gè)天然種群，但是對(duì)它們?cè)诜肿铀降难芯繀s很少。因此本實(shí)驗(yàn)以此兩地的野生近江牡蠣為研究對(duì)象，以

2、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性(RAPD)和rDNA-ITS1序列分析為實(shí)驗(yàn)技術(shù)手段，結(jié)合形態(tài)學(xué)特征統(tǒng)計(jì)分析對(duì)這兩個(gè)地理種群進(jìn)行遺傳多樣性分析，結(jié)果表明： (一)形態(tài)學(xué)特征分析： 為了評(píng)價(jià)種群間的差異，共測(cè)量了九個(gè)形態(tài)指標(biāo)：總重(TW)、右殼長(zhǎng)(RAPM)、右殼高(RDVM)、右殼凸(RT)、韌帶長(zhǎng)(HL)、左殼長(zhǎng)(LAPM)、左殼高(LDVM)、左殼凸(LT)和閉殼肌痕寬(SW)。湛江種群的九個(gè)形態(tài)指標(biāo)平均值分別為23.68g、53.

3、05mm、79.80mm、20.50mm、18.74mm、55.43mm、82.06mm、20.75mm和15.27mm；陽(yáng)江種群的九個(gè)形態(tài)指標(biāo)平均值分別為35.55g、60.58mm、97.62mm、23.53mm、19.80mm、66.11mm、103.19mm、32.40mm和17.90mm。 為了消除貝體規(guī)格大小對(duì)參數(shù)值的影響，將每只貝的所有參數(shù)分別除以左殼高(左殼高除外)予以校正，得出8個(gè)形態(tài)學(xué)比例性狀(X1～X8)進(jìn)

4、行主成分分析。共構(gòu)建4個(gè)主成分，其貢獻(xiàn)率分別為34.8﹪、21.2﹪、15.3﹪和13.2﹪，累積貢獻(xiàn)率為84.5﹪。 (二)隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性(RAPD)分析： 選用12個(gè)擴(kuò)增效果好、穩(wěn)定的引物進(jìn)行擴(kuò)增，共得到157個(gè)位點(diǎn)，平均每個(gè)引物可產(chǎn)生13個(gè)位點(diǎn)，片段長(zhǎng)度在200～2200bp之間。分析結(jié)果顯示：湛江、陽(yáng)江兩個(gè)種群的多態(tài)位點(diǎn)比例為89.62﹪和89.57﹪；遺傳多樣性指數(shù)為0.4170和0.4334；種群間平均遺傳距

5、離D為0.0327、平均遺傳相似性為0.9681以及平均遺傳分化系數(shù)(Gst)為0.0437。 (三)rDNA-ITS1序列分析： 用合適的引物擴(kuò)增了核糖體DNA轉(zhuǎn)錄間隔子Ⅰ區(qū)間的序列，得到18S、5.8S部分序列和ITS1全部序列(包含引物)，其中ITS1序列片段長(zhǎng)度為478～485bp，共有11個(gè)變異位點(diǎn)，兩個(gè)為轉(zhuǎn)換(A/G)，其他為插入/缺失(A/-、T/-)。湛江和陽(yáng)江種群各獲得8個(gè)基因型，其中兩種群共享一個(gè)基因