p53選擇性剪接異構(gòu)體在腎細胞癌中的表達及其臨床意義的研究.pdf

1、山東大學博士學位論文p53選擇性剪接異構(gòu)體在腎細胞癌中的表達及其臨床意義的研究姓名：宋偉申請學位級別：博士專業(yè)：外科學（泌尿外科）指導教師：呂家駒20090418山東大學博士學位論文的易感基因具有反式激活作用，可引起細胞周期的停滯和凋亡。現(xiàn)在的研究還證實雖然p53、p63和p73三者作用密切相關(guān)但他們自己還有獨特的生物學作用，p63、p73基因中有些剪接異構(gòu)體可以顯性負調(diào)節(jié)p53的活性，起著類似癌基因的作用。選擇性剪接是指一個前體mRN

2、A通過選擇不同的剪接位點組合產(chǎn)生不同mRNA剪接變異體的過程，經(jīng)常發(fā)生在隱蔽的位點，致使外顯子遺漏和(或)內(nèi)含子保留。選擇性剪接是基因表達的轉(zhuǎn)錄后水平的調(diào)控，是控制基因表達的重要機制，它使基因表達呈現(xiàn)多樣性，很多研究證實選擇性剪接和細胞的生理、發(fā)育調(diào)控以及疾病的發(fā)生有關(guān)。通過選擇性啟動子和多種剪接形式，p53現(xiàn)今比較明確的至少可以表達包括有p53、p53fl、p53y、A133p53、A133p5313、A133p537、A40p53、

3、A40p5313和A40p53y九種剪接異構(gòu)體。這些異構(gòu)體在人體組織中的表達情況和作用機制尚不完全清楚。以往的研究顯示，這些剪接異構(gòu)體在『F常人類組織中有不同程度的表達，而這種表達有組織特異性的特點，還證實p53剪接異構(gòu)體和全長p53之間有著及其復(fù)雜的相互作用機制，它們不但可以調(diào)節(jié)p53的轉(zhuǎn)錄活性而且本身還具有不同生物學作用。有關(guān)p53剪接異構(gòu)體在乳腺癌、神經(jīng)細胞腫瘤、急性白血病、頭頸部鱗癌等腫瘤組織中的表達情況的研究，提示p53異構(gòu)體

4、的異常表達可能與人類多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有密切關(guān)系。據(jù)我們所知，目前國內(nèi)外尚沒有具體關(guān)于p53剪接異構(gòu)體在腎癌中的表達情況和作用機制的研究。本課題借鑒以往的研究經(jīng)驗，選取相對比較穩(wěn)定表達的包括p53、p5313、p53“／、A133p53、A133p5313和A133p531六種異構(gòu)體為研究對象，旨在分析這六種p53剪接異構(gòu)體在腎癌組織以及癌旁F常腎臟組織中mRNA和蛋白的表達情況，并通過聯(lián)系腎癌的臨床、病理指標進行統(tǒng)計學分析，探討p5

5、3及其選擇性剪接異構(gòu)體與腎癌的發(fā)生發(fā)展的關(guān)系，進一步研究腎癌的發(fā)病機制，爭取為腎癌的早期診斷和免疫基因治療探索出新的思路和方法。材料與方法：選取2007年6月至2008年3月間，在山東省立醫(yī)院泌尿外科行腎癌根治術(shù)的腎細胞癌患者47例。所有標本均行病理學檢查，根據(jù)WHO1997年制定的腎實質(zhì)上皮性腫瘤分類標準，其中透明細胞癌41例，嗜色細胞癌5例，嫌色細胞癌1例。所取癌旁腎組織，距腫瘤邊緣至少大于2cm，而且行病理檢查均未發(fā)現(xiàn)癌細胞。所有