G-CSFRI型異構(gòu)體在髓系白血病細(xì)胞中的表達(dá)及其臨床意義.pdf

1、目的:研究G-CSFR I型異構(gòu)體在髓系白血病細(xì)胞中的表達(dá)及其臨床意義。
　　方法:
　　1.收集89例急性髓系白血病(非急性早幼粒細(xì)胞白血病)[AML(non-APL)]患者緩解前及21例緩解后骨髓標(biāo)本,以9例正常人骨髓標(biāo)本作為對照,Ficoll分離液梯度分離骨髓單個(gè)核細(xì)胞。
　　2.收集13例初診AML(non-APL)患者外周血標(biāo)本,以10例正常人骨髓標(biāo)本作為對照,Ficoll分離液梯度分離單個(gè)核細(xì)胞,流式細(xì)胞分

2、選儀分選CD34+細(xì)胞。
　　3.實(shí)時(shí)定量PCR(QRT-PCR)檢測上述各組細(xì)胞G-CSFRI型異構(gòu)體mRNA的表達(dá)水平,比較其與FAB分型、外周血白細(xì)胞數(shù)及幼稚細(xì)胞比例的關(guān)系。
　　4.以HL-60及U937細(xì)胞為研究對象,QRT-PCR檢測ATRA處理后HL-60及U937細(xì)胞G-CSFRI型異構(gòu)體的表達(dá)變化。
　　5.MTT法及流式細(xì)胞術(shù)檢測G-CSF對ATRA誘導(dǎo)的G-CSFRI型異構(gòu)體上調(diào)的HL-60、U9

3、37細(xì)胞增殖、分化的影響。
　　結(jié)果:
　　1.AML緩解前骨髓單個(gè)核細(xì)胞G-CSFRI型異構(gòu)體表達(dá)水平低于緩解后及正常對照兩組(P<0.05);其中12例自身對照的AML患者有11例緩解前G-CSFRI型異構(gòu)體的表達(dá)水平低于緩解后(P<0.05)。13例分選的AMLCD34+細(xì)胞G-CSFRI型異構(gòu)體表達(dá)水平也低于正常對照CD34+細(xì)胞及未分選的AML細(xì)胞(P<0.05)。
　　2.AML患者G-CSFRI型異構(gòu)體的

4、表達(dá)水平與外周血白細(xì)胞數(shù)(r=-0.290,p<0.01)和幼稚細(xì)胞比例(r=-0.362,p<0.01)呈負(fù)相關(guān),即G-CSFRI型異構(gòu)體表達(dá)水平低的AML患者,其外周血白細(xì)胞數(shù)及幼稚細(xì)胞比例越高。此外,不同F(xiàn)AB分型的AML患者G-CSFRI異構(gòu)體表達(dá)水平無明顯差異。
　　3.ATRA能顯著上調(diào)HL-60及U937細(xì)胞G-CSFRI型異構(gòu)體的表達(dá),同時(shí)抑制細(xì)胞增殖及誘導(dǎo)細(xì)胞分化(P<0.01)。
　　4.G-CSF能促進(jìn)

5、HL-60及U937細(xì)胞增殖(P<0.05),而不能誘導(dǎo)HL-60及U937細(xì)胞分化。ATRA能抑制G-CSF對HL-60及U937細(xì)胞的促增殖作用(P<0.01),G-CSF與ATRA聯(lián)合能促進(jìn)ATRA對HL-60及U937細(xì)胞的促分化作用(P<0.05)。ATRA處理細(xì)胞24h后加用G-CSF對HL-60及U937細(xì)胞的促分化作用較兩藥同時(shí)用明顯,但差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　結(jié)論:
　　1.G-CSFRI型異構(gòu)體在AML患