花錨的化學(xué)成分與生物活性研究.pdf

1、花錨為龍膽科(Gentianaceae)花錨屬(Halenia)-年生植物花錨Haleniacorniculata(L.)Cornaz的全草。分布于俄羅斯，蒙古等地，我國，除華南、華東外，其他地區(qū)均有分布，主產(chǎn)東北、華北及陜西等地。蒙藏醫(yī)常用治療肝炎等“協(xié)日”和“熱”過盛即中醫(yī)中所指的濕邪熱毒所致疾病，而中醫(yī)少用。本文對其生藥學(xué)特征加以概述，并歸納總結(jié)了該屬植物的化學(xué)成分與藥理作用。在抗實驗性肝損傷活性指導(dǎo)下對花錨的氯仿與正丁醇層萃取物

2、的化學(xué)成分進行了系統(tǒng)研究，通過體內(nèi)外實驗探討了花錨與肝損傷的關(guān)系。并對花錨及從中分離得到的大部分化合物進行了抗骨質(zhì)疏松的體內(nèi)外藥效學(xué)研究。 通過化學(xué)與免疫性肝損傷動物模型，確定了花錨的氯仿與正丁醇層萃取物為抗實驗性肝損傷作用的活性部位。以此為指導(dǎo)，利用多種現(xiàn)代化學(xué)分離手段，從這兩部分中分離得到了22個化合物。通過紅外、紫外、質(zhì)譜核磁等波譜學(xué)方法并結(jié)合化合物的理化性質(zhì)鑒定了它們的結(jié)構(gòu)，分別為：1-羥基-2，3，4，5-四甲氧基()

3、酮(1)，1-羥基-2，3，4，7-四甲氧基()酮(2)，1-羥基-2，3，4，5，7-五甲氧基()酮(3)，1-羥基-2，3，5-三甲氧基()酮(4)，1，3-二羥基-4，5-二甲氧基()酮(5)，1-羥基-3，5-二甲氧基()酮(6)，1，8-二羥基．3，5-二甲氧基()酮(7)，1，3-二羥基-4，7-二甲氧基()酮(8)，2，3，5-三甲氧基-1-O-櫻草糖氧基()酮(9)，2，3，4，5-四甲氧基-1-O-櫻草糖基()酮(10

4、)，2，3，4，7-四甲氧基-1-O-櫻草糖基()酮(11)，木犀草素(12)，芹菜素(13)，7-O-葡萄糖基木犀草素(14)，(7S)-7-caffeoyloxysweroside(15)，表段馬錢子半縮醛內(nèi)酯(16)，獐牙菜苷(17)，8-羥基-2-甲基色原酮(18)，1-羥基-2，3，7-三甲氧基()酮(19)，1，3，5-三羥基()酮(20)，烏蘇酸(21)，β-谷甾醇(22)。其中化合物18為新的天然產(chǎn)物，未見數(shù)據(jù)報道，化合

5、物7，15為從龍膽科內(nèi)首次分離得到，化合物5，6，8，20為從花錨屬內(nèi)首次分離得到，化合物9，16，17，19，21，22為從該種植物內(nèi)中首次分離得到。 對化合物1，2，9，11進行了體內(nèi)抗CCl4所致小鼠急性肝損傷作用的實驗研究。結(jié)果顯示化合物9，11的活性明顯強于化合物1，2，而化合物9的活性又優(yōu)于化合物11。初步的構(gòu)效關(guān)系顯示，結(jié)構(gòu)中糖苷基團的存在與甲氧基的缺失可能增強花錨中()酮類成分抗肝損傷作用。通過對花錨提取物及分離

6、所得的單體化合物體外抗乙、丙肝肝炎病毒研究發(fā)現(xiàn)，大部分樣品結(jié)果呈陰性或僅有個別化合物有微弱的抑制作用?？梢娀ㄥ^并不能對抗HBV與HCV病毒的復(fù)制生長，而是對肝炎病毒或其他肝臟疾病引起的肝細胞損傷起到緩解與修復(fù)作用。 通過小鼠顱蓋骨與骨髓細胞的共同培養(yǎng)系統(tǒng)對大量天然藥物進行了體外抑破骨細胞作用篩選，發(fā)現(xiàn)花錨的氯仿與正丁醇層萃取物作用較強，抑制率達75％以上。以去卵巢大鼠為實驗對象，對花錨氯仿與正丁醇層萃取物進行了體內(nèi)抗骨質(zhì)疏松癥研

7、究，結(jié)果顯示這兩部分萃取物可有效地對抗去卵巢大鼠子宮系數(shù)的降低，升高大鼠血清中雌二醇的含量，并能降低大鼠血清中ALP水平，改善大鼠的骨生物力學(xué)指標(biāo)，增加骨密度，對預(yù)防去卵巢大鼠骨質(zhì)疏松的發(fā)生起到一定的作用。在此基礎(chǔ)上，對這兩部分萃取物中分離得到的17個化合物進行了體外抑破骨細胞實驗篩選，結(jié)果顯示大部分()酮類與黃酮類化合物均表現(xiàn)出較好的活性，其中，化合物1-4，7，12抑破骨細胞樣細胞生成作用較其余化合物顯著。構(gòu)效關(guān)系表明，()酮結(jié)構(gòu)中

8、1位羥基的存在可能是其抑制破骨細胞生成的重要因素之一，而3位羥基卻削弱了其活性作用。上述6個化合物中除化合物7外，其余5個化合物還能有效抑制破骨細胞骨吸收，降低成熟破骨細胞的存活率，提示這些化合物可以從不同方面起到抑制骨吸收的作用。同時，對成骨細胞的作用研究發(fā)現(xiàn)，這6個化合物均能在不同程度上提高成骨細胞的ALP活性，可促進成骨細胞增殖，化合物1，4，7還可明顯增加成骨細胞礦化結(jié)節(jié)數(shù)量，表現(xiàn)出促進成骨細胞形成的作用，結(jié)果表明這些化合物對促