鑲邊海星化學成分與生物活性研究.pdf

1、本文首次對我國南海三亞海域的鑲邊海星(Craspidaster sp.)中的皂苷類成分進行系統(tǒng)的研究。以稻瘟霉生物活性及靶向Notch信號通路生物活性篩選模型,進行活性追蹤,用65％EtOH對粉碎的海星進行回流提取,減壓濃縮后均勻分散于水中,用石油醚和正丁醇進行萃取,濃縮正丁醇得海星總皂苷。海星總皂苷粗提物通過正相硅膠、反相硅膠及葡聚糖凝膠LH-20柱層析進行分離純化。用薄層(TLC)層析法檢測把相同的洗脫液收集在一起,得到所需要的有效

2、部位。最后通過半制備高效液相色譜對薄層層析板顯示的同一斑點的部分進行純化獲得單體化合物。海星用65%EtOH提取,可將絕大部分極性較大的化學成分提取出來,然后用石油醚脫脂,再用正丁醇萃取皂苷類物質(zhì),剩余的水相部分主要是蛋白質(zhì)、糖等物質(zhì)。通過稻瘟霉生物活性篩選知海星乙醇粗提物、海星總皂苷均具有抗有絲分裂活性,而石油醚粗提物沒有顯著的活性。然后通過靶向Notch信號通路生物活性篩選模型發(fā)現(xiàn),正丁醇萃取部分對Notch信號通路有很好的抑制作用

3、,進一步將正丁醇部分用正向硅膠柱層析進行初步純化后,發(fā)現(xiàn)其Notch信號通路的抑制作用明顯增強。這進一步說明具有Notch信號通路的抑制作用的物質(zhì)可能主要存在于正丁醇萃取部分中。同時也提示了可能海星皂苷通過抑制Notch信號通路來起到抗腫瘤。因海星皂苷類無紫外吸收或紫外吸收比較弱,為避免丟失部分皂苷類成分,我們選擇RID示差折光檢測器,色譜柱為Zorbax300 SB-C18柱(9.4mm i. d.×250 mm)的半制備型高效液相色

4、譜儀。通過用半制備型RP-HPLC對海星中皂苷類成份的分離純化條件進行了探索,在綜合考慮高效色譜峰的保留時間、峰型、純度以及得率等因素,找到分離制備化合物最優(yōu)的色譜條件。通過最佳制備條件純化得到海星皂苷單體化合物10個。均為無色結(jié)晶性粉末,用薄層色譜(TLC)檢測,氯仿/甲醇/水(6.5:3.5:1)展開,用15%硫酸-乙醇浸潤,加熱顯褐色斑點。應(yīng)用現(xiàn)代波譜技術(shù)(1H,13C-NMR,DEPT,1H,1H-COSY, HMQC,HMBC

5、,TOCSY, NOESY,ESI-MS,HR-ESI-MS等)和化學手段等鑒定出其中4個海星皂苷類化合物結(jié)構(gòu),其中3個為新的化合物1個為首次從鑲邊海星中得到的化合物。3個新化合物的結(jié)構(gòu)分別為:(20R)-7-O-(6-O-methyl--β-D-galactofuranosyl)-16-O-(3-O-methyl-β-D-galactopyranosyl)-5α-cholest-8(14)-22(23)-dine-3α,6β,7β,1

6、6α-tetrol,命名為anthenoside K1(1)。(20R)-7-O-(6-O-methyl-β-D-galactofuranosyl)-16-O-(3-O-methyl-β-D-galactopyranosyl)-5α-cholest-8(14)-en-3α,6β,7β,16α-tetrol,命名為anthenoside K2(2)。(20R)-7-O-(6-O-methyl--β-D-galactofuranosyl)-

7、16-O-(3-O-methyl-β-D-galactopyranosyl)-5α-cholest-8(14)-24(28)-diene-3α,6β,7β,16α-tetrol,命名為anthenoside K3(3)。1個首次從鑲邊海星中得到的化合物為novaeguinoside A。
　　本課題首次用靶向Notch信號通路生物活性篩選模型及半制備反相高效液相色譜對我國南海三亞海域的鑲邊海星中的海星皂苷的分離純化進行系統(tǒng)研究、報