STPAG9在子宮內(nèi)膜癌中的表達(dá)及意義.pdf

1、背景：
　　 子宮內(nèi)膜癌是女性生殖系統(tǒng)三大惡性腫瘤之一，近年來其發(fā)病率和病死率在世界范圍內(nèi)均有上升趨勢(shì)，在一些歐美國(guó)家其發(fā)病率甚至已居女性生殖道腫瘤的首位。由于目前子宮內(nèi)膜癌的病因和發(fā)病機(jī)制尚未完全明了，早期診斷和預(yù)后檢測(cè)也不夠完善，因此研究子宮內(nèi)膜癌的血清生物學(xué)標(biāo)志物以及探尋以分子生物學(xué)為靶點(diǎn)的治療途徑成為熱點(diǎn)。這些研究將有助于對(duì)子宮內(nèi)膜癌的早期臨床診斷、指導(dǎo)治療和評(píng)價(jià)預(yù)后。并且，為進(jìn)一步探討子宮內(nèi)膜癌的發(fā)病機(jī)制提供依據(jù)。

2、r>　　 目的：
　　 檢測(cè)SPAG9在正常子宮內(nèi)膜、增生性子宮內(nèi)膜、子宮內(nèi)膜癌和癌旁組織中的表達(dá)，比較其表達(dá)的差異。檢測(cè)SPAG9在人血清內(nèi)的濃度，評(píng)價(jià)它作為血清標(biāo)志物的潛在價(jià)值。探討SPAG9與子宮內(nèi)膜癌的可能關(guān)系及意義。
　　 方法：
　　 1.研究對(duì)象：
　　 收集手術(shù)子宮內(nèi)膜組織標(biāo)本，包括子宮內(nèi)膜癌組織47例(其中包括癌旁組織12例)；非典型增生子宮內(nèi)膜組織10例；單純性增生子宮內(nèi)膜組織12例

3、；正常子宮內(nèi)膜組織20例。同時(shí)收取子宮內(nèi)膜癌患者的血清標(biāo)本50份(其中47例與組織標(biāo)本相對(duì)應(yīng))。另外，收集10例健康女性，20例良性腫瘤患者(子宮肌瘤8例，卵巢囊腫7例，子宮內(nèi)膜息肉5例)的血清作為對(duì)照。
　　 2.實(shí)驗(yàn)方法：
　　 (1)應(yīng)用免疫組織化學(xué)(IHC)方法檢測(cè)正常子宮內(nèi)膜組織、增生性子宮內(nèi)膜組織、子宮內(nèi)膜癌組織和癌旁組織中SPAG9的蛋白表達(dá)，明確其在組織中的表達(dá)定位，統(tǒng)計(jì)其陽(yáng)性表達(dá)率。
　　 (2

4、)應(yīng)用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)檢測(cè)正常子宮內(nèi)膜組織、增生性子宮內(nèi)膜組織、子宮內(nèi)膜癌組織和癌旁組織中SPAG9 mRNA的表達(dá)，并半定量分析。
　　 (3)應(yīng)用Western blot檢測(cè)正常子宮內(nèi)膜組織、增生性子宮內(nèi)膜組織、子宮內(nèi)膜癌組織和癌旁組織中SPAG9蛋白的表達(dá)，并半定量分析其表達(dá)差異。
　　 (4)應(yīng)用酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)測(cè)定70個(gè)血清標(biāo)本中SPAG9的濃度(包括10個(gè)健康女性，20個(gè)良性

5、腫瘤患者和50個(gè)子宮內(nèi)膜癌患者)。比較并分析其濃度差異。
　　 結(jié)果：
　　 1.免疫組織化學(xué)結(jié)果顯示SPAG9蛋白在子宮內(nèi)膜癌的陽(yáng)性表達(dá)率為72％，顯著高于非典型增生(30％)(x2=4.764，P=0.029<0.05)和單純性增生(25％)(x2=7.249，P=0.007<0.05)；在正常子宮內(nèi)膜和癌旁組織中無表達(dá)；SPAG9蛋白主要表達(dá)于組織腺體的胞漿中，間質(zhì)組織少量或無表達(dá)；在轉(zhuǎn)移的淋巴結(jié)中也有陽(yáng)性表達(dá)。<

6、br>　　 2.RT-PCR結(jié)果顯示SPAG9 mRNA在子宮內(nèi)膜癌中有高表達(dá)(0.833±0.667)，并且在早期子宮內(nèi)膜癌中即有表達(dá)，其平均表達(dá)水平顯著高于其他組織(P<0.05)；在正常子宮內(nèi)膜和癌旁組織中無表達(dá)；在非典型增生(0.089±0.026)和單純性增生(0.009±0.001)的子宮內(nèi)膜中表達(dá)水平較低，與癌組織相比均有顯著差異(P均<0.05)，而這兩者之間表達(dá)相比較無顯著差異(P>0.05)。
　　 3.W

7、estern blot所得結(jié)果與免疫組織化學(xué)和RT-PCR的結(jié)果是一致的，SPAG9蛋白在子宮內(nèi)膜癌中有高表達(dá)(0.656±0.697)，在子宮內(nèi)膜腺癌(0.797±0.762)中的表達(dá)要高于漿液性乳頭狀癌(0.219±0.183)(P<0.05)；正常子宮內(nèi)膜和癌旁組織中無表達(dá)；在非典型增生(0.232±0.201)和單純性增生(0.032±0.006)的子宮內(nèi)膜中表達(dá)水平較低，這兩者之間表達(dá)相比較無顯著差異(P>0.05)，而與癌組

8、織相比均有顯著差異(P均<0.05)。
　　 4.SPAG9血清濃度(ng/ml)(均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差)在正常健康女性中是5.4256±1.52587，在良性腫瘤患者為6.328±1.28181，而在子宮內(nèi)膜癌患者血清中，SPAG9的血清濃度達(dá)到19.0114±13.19338，顯著高于前兩者(P<0.01)。
　　 結(jié)論：
　　 1.SPAG9蛋白和mRNA在子宮內(nèi)膜癌組織中有高表達(dá)，其平均表達(dá)量顯著高于非典型增生內(nèi)