精液中血管內(nèi)皮生長因子及其受體與精子質(zhì)量的相關(guān)性.pdf

1、背景和目的：血管內(nèi)皮生長因子(Vascular endothelial growth factor, VEGF),又稱血管通透性因子,是一種多功能細胞因子,由多種正常細胞和腫瘤細胞分泌,被認為能夠強有力的刺激血管內(nèi)皮細胞生長和血管生成。VEGF是血管內(nèi)皮特異性有絲分裂原,也具有增加微血管通透性的功能。VEGF是一類通過二硫鍵相連的同源二聚體糖蛋白,其分子量34-45kD,序列高度保守,對熱和酸穩(wěn)定。根據(jù)其氨基酸殘基數(shù)量存在6種異構(gòu)體形式

2、,VEGF121和VEGF165等,且其具有相同的生物活性。已發(fā)現(xiàn)在各種正常組織中均有VEGF的高水平表達。VEGF介導了許多生理性和病理性的血管生成,在組織血管增生時,其表達增強。生理狀態(tài)下,VEGF可高水平地表達于胎盤、許多胚胎組織和一些有生理性血管增生的成人正常組織(如增生期子宮內(nèi)膜)。此外,在動物和成人的正常腎小球細胞、心肌細胞、前列腺上皮細胞、睪丸生精細胞、腎上腺皮質(zhì)和肺的某些上皮細胞,VEGF也有所表達。在其他一些病理條件下

3、,如類風濕關(guān)節(jié)炎、牛皮癬、傷口愈合和增殖中,VEGF也起著重要作用。VEGF的過量表達對機體可能是有害的(如腫瘤發(fā)生)。血管內(nèi)皮生長因子受體(Vascular endothelial growth factor receptor, VEGFR)主要包括VEGFR1(fms-like tyrosine kinase-1, flt-1)和VEGFR2(fetal liver kinase-1/kinase insert domain-con

4、taining receptor, flk-1/KDR),其中flk-1是人KDR(嬰兒肝激酶受體)在小鼠內(nèi)的同源形式。VEGER1和VEGFR2結(jié)構(gòu)相似,均為跨膜的酪氨酸激酶受體,同屬于酪氨酸激酶c-fms家族。VEGF可與Flt-1和KDR結(jié)合從而開啟鈣離子通道使細胞內(nèi)鈣離子增加,從而發(fā)揮生物學效應。在男女生殖系統(tǒng),VEGF通過受體介導的方式發(fā)揮其生物學作用,可能參與并調(diào)節(jié)生殖系統(tǒng)各器官的血管生成和血管通透性。Flt-1和KDR表達

5、于大鼠精子的頂體、尾部的頸段、中段和主段,表明精子本身也是VEGF的靶細胞之一生精上皮在產(chǎn)生精子的過程中發(fā)生一系列形態(tài)結(jié)構(gòu)、理化性質(zhì)和生物功能等變化。在這些復雜的變化過程中,VEGF及其受體起著重要的參與作用和調(diào)節(jié)作用。精液中VEGF水平與男性、女性生殖有一定關(guān)系。目前,國內(nèi)外很少有關(guān)于VEGF及其受體對精子質(zhì)量的相關(guān)性研究。為了探討VEGF及其受體在男性精液中與精子質(zhì)量的關(guān)系,本研究選擇不同精子質(zhì)量的標本,應用計算機輔助精子分析(Co

6、mputer-aided sperm analysis, CASA)檢測精子質(zhì)量;應用WHO推薦的化學法檢測精漿生化(酸性磷酸酶、精漿鋅、果糖、中性α-糖苷酶);應用酶標免疫方法檢測精漿VEGF水平;應用免疫組化檢測精子VEGFR的表達。通過統(tǒng)計學分析,探討精漿VEGF水平及精子VEGFR的表達與精子質(zhì)量的關(guān)系。
　　材料與方法：1.選擇無明顯生殖系統(tǒng)疾病的男性留取精液標本,測定其精液的量、酸堿度、液化性能等一般特征;應用CASA

7、系統(tǒng)檢測精子質(zhì)量;應用WHO推薦的檢測方法測定其精漿生化指標。2.選擇精漿生化指標正常的95例樣本,應用酶標免疫法檢測其精漿VEGF水平;應用免疫組化SABC法檢測精子VEGFR的表達。3.應用SPSS16.0統(tǒng)計軟件包對各項數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析。P＞0.05為統(tǒng)計學差異。
　　結(jié)果：1、VEGFR陽性信號分布于精子尾部和頭的基部,呈“丫”形。2.a級精子率≥25％和＜25％組,精漿VEGF平均含量分別為8.18±1.93ng/ml

8、和6.24±1.68ng/ml,二者比較有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。兩組VEGFR的平均陽性率分別為30.1±9.2％和31.1±8.9％,無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。3.a+b級精子率≥50％和＜50％組,精漿VEGF平均含量分別為8.64±2.09ng/ml和6.57±1.44ml,二者比較有明顯統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。兩組VEGFR平均陽性率分別為30.5±9.8％和31.0±7.5％,無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)

9、。4.a+b+c級精子率≥50％和＜50％組,精漿VEGF平均含量分別為7.62±1.68ng/ml和7.04±1.76ng/m1,二者比較無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。兩組VEGFR平均陽性率分別為31.4±9.1％和31.8±9.7％,二者無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。5.精子濃度≥20×106/ml和＜20×106/ml組,精子VEGFR的平均陽性率分別為29.1±7.8％和41.9±10.9％,兩組比較有明顯統(tǒng)計學差異(

10、P＜0.05)。兩組的精漿VEGF含量分別為7.42±1.78ng/ml和7.14±1.57ng/ml,二者無明顯統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。6.一次射精精子總數(shù)≥40×106和＜40×106組,精子VEGFR平均陽性率分別為30.8±7.9％和43.5±11.2％,二者比較有顯著統(tǒng)計學差異(P＜0.05)。兩組精漿VEGF濃度分別為7.47±1.73ng/ml和6.49±1.55ng/ml,無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)。7.經(jīng)Spea

11、rman檢驗,精漿VEGF含量與精子正常形態(tài)率間呈負相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.268。
　　結(jié)論：1.精子活力正常組精漿VEGF水平明顯高于精子活力低下組;兩組間VEGFR陽性率無明顯差異。結(jié)果提示,較高水平的精漿VEGF可能通過與精子VEGFR結(jié)合對精子活力具有正效應。2.精子數(shù)量正常組精子VEGFR陽性表達率明顯低于精子數(shù)量低下組;兩組間精漿VEGF水平無明顯差異。結(jié)果提示,可能通過精子VEGFR表達的代償性升高,更有效地利用VE