黎蒴與廣寧紅花油茶種質(zhì)資源遺傳多樣性研究.pdf

1、黎蒴(Castanopsis fissa)與廣寧紅花油茶(Camellia semiserrata)是廣東最有地方特色的鄉(xiāng)土樹種。黎蒴具有天然下種更新和萌芽更新力強(qiáng)的特點(diǎn)，是營(yíng)造水源涵養(yǎng)林、能源林、水土保持林和改造次生林的優(yōu)良樹種，而廣寧紅花油茶是中國(guó)南方重要的木本食用油料樹種。開展黎蒴與廣寧紅花油茶種質(zhì)資源遺傳多樣性研究有利于了解其遺傳背景和地理分布規(guī)律，為其優(yōu)質(zhì)種源收集、保護(hù)及良種選育奠定基礎(chǔ)。本文以黎蒴和廣寧紅花油茶為研究對(duì)象，開

2、發(fā)其SRAP分子標(biāo)記，找到其DNA的分子多態(tài)性，進(jìn)行遺傳多樣性分析，旨在為黎蒴、廣寧紅花油茶的良種選育提供依據(jù)，主要結(jié)果如下：
　　1.建立并優(yōu)化了黎蒴、廣寧紅花油茶SRAP反應(yīng)體系。利用正交設(shè)計(jì)得到穩(wěn)定、可靠且重復(fù)性強(qiáng)的SRAP-PCR反應(yīng)體系(25μL)：10x PCR Buffer(Mg2+free)2.5μL、模板DNA量40ng、Mg2+2.0mmol·L-1、dNTPS0.175 mmol·L-1、引物0.5μmol·

3、L-1、Taq酶0.2 U。
　　2.黎蒴遺傳多樣性。13對(duì)引物組合總共擴(kuò)增出236條帶，多態(tài)性條帶為195條，多態(tài)性頻率為82.63％。種源Nei's基因多樣度(h)、Shannon多樣性指數(shù)(I)、多態(tài)位點(diǎn)百分比(PPL)變化范圍分別為0.0992-0.3066、0.1488-0.4555及28.81%-85.59%，平均值分別為0.1956、0.2923及55.24%，表明黎蒴遺傳多樣性處于中等水平，廣東平遠(yuǎn)種源遺傳多樣性豐

4、富，各個(gè)指標(biāo)均為最高值，而廣東蕉嶺和廣東揭西遺傳多樣性水平最低。聚類分析表明，當(dāng)閾值為0.88時(shí)，可將黎蒴28個(gè)種源分為6大類，Ⅰ類為廣東英德、廣西高田、廣東興寧、廣東陽(yáng)東和廣東新興，Ⅱ類為廣東懷集、廣東翁源、廣東龍川、廣東五華、福建南平和福建永安，Ⅲ類為廣東武江、廣東陽(yáng)春、福建福州、廣東大埔和廣東平遠(yuǎn)，Ⅳ類為廣東仁化、廣東揭西、廣東潮安、廣東蕉嶺、福建南靖和廣西小鏡，Ⅴ類為廣東增城、廣西鎮(zhèn)龍和福建順昌，Ⅵ類為廣東揭東、廣東鼎湖和廣東封

5、開。廣東揭東與廣東鼎湖遺傳距離為0.0134，遺傳距離最小，說(shuō)明二者的親緣關(guān)系最近。AMOVA分子變異方差分析顯示，在黎蒴總的遺傳變異中，種源內(nèi)占60%，而種源間占40%。
　　3.廣寧紅花油茶遺傳多樣性。13對(duì)引物組合總共擴(kuò)增出206條帶，多態(tài)性條帶為187條，多態(tài)性頻率為90.78%。種源Nei's基因多樣度(h)、Shannon多樣性指數(shù)(I)、多態(tài)位點(diǎn)百分比(PPL)變化范圍分別0.2179-0.3563、0.3217-0

6、.5248及58.25%-92.72%，平均值分別為0.3078、0.4563及83.62%，表明廣寧紅花油茶具有豐富的遺傳多樣性，廣東增城的廣寧紅花油茶遺傳多樣性最高，廣東清遠(yuǎn)的遺傳多樣性相對(duì)較低。聚類分析表明，當(dāng)閾值為0.93時(shí)，可將廣寧紅花油茶4個(gè)種源分為2大類，廣東清遠(yuǎn)單獨(dú)成為一類，第二類包括廣東廣寧縣、廣東增城、廣東云浮。廣東云浮與廣東增城遺傳距離為0.0193，遺傳距離最小，說(shuō)明二者的親緣關(guān)系最近。AMOVA分子變異方差分析