蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子對(duì)大鼠視神經(jīng)夾傷后的神經(jīng)保護(hù)研究.pdf

1、目的：通過對(duì)大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞生長(zhǎng)相關(guān)蛋白-43(growth　associated protein-43，GAP-43)、神經(jīng)微絲(neurofilaments，NFs)、微管相關(guān)蛋白-1B(microtubule associated protein-1B，MAPlB)、Tau蛋白(tauprotein)、髓鞘堿性蛋白(myelin basic protein，MBP)的研究，觀察蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子(venom nerve grow

2、th factor，vNGF)在大鼠視神經(jīng)夾傷后對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞(retinal ganglion cells，RGCs)的保護(hù)作用。 方法：將48只SD大鼠隨機(jī)分為：實(shí)驗(yàn)治療組(蛇毒組)和實(shí)驗(yàn)對(duì)照組(鹽水組)，制作視神經(jīng)夾傷模型。實(shí)驗(yàn)治療組向左眼玻璃體腔內(nèi)注入蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子IOOBU/O．025ml；實(shí)驗(yàn)對(duì)照組向左眼玻璃體腔內(nèi)注入O．025ml平衡鹽液(balance salt solution，BSS)。右眼未做任何處理

3、，作為正常對(duì)照組。于傷后4天、7天、14天取材，應(yīng)用病理圖像分析儀計(jì)數(shù)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞；并進(jìn)行GAP-43、NFs、MAP1B、Tau蛋白、MBP的免疫組化染色分析。 結(jié)果：(1)光鏡下，傷后4天至14天，兩組的RGCs數(shù)目均比正常對(duì)照組下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；蛇毒組RGCs數(shù)目明顯高于鹽水組，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)；(2)免疫組化結(jié)果：①GAP-43：蛇毒組4天時(shí)GAP-43表達(dá)明顯，7天增強(qiáng)，14天

4、時(shí)稍減弱；鹽水組4天和7天時(shí)也有GAP-43表達(dá)，但較蛇毒組弱，到14天時(shí)表達(dá)減弱。不同時(shí)間點(diǎn)蛇毒組RGCs陽(yáng)性率均高于鹽水組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。②NFs：蛇毒組4天、7天、14天NFs表達(dá)持續(xù)增高；鹽水組的表達(dá)也與時(shí)間成正比關(guān)系，但較蛇毒組弱；不同時(shí)間點(diǎn)蛇毒組NFs免疫組化染色的平均灰度值均低于鹽水組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。③MAP1B：蛇毒組MAP1B表達(dá)持續(xù)增高，14天表達(dá)最強(qiáng)；鹽水組從4天開始有表

5、達(dá)，并逐漸升高，但較蛇毒組弱，在觀察的時(shí)間點(diǎn)內(nèi)， 7天表達(dá)最強(qiáng)，14天已經(jīng)減弱；不同時(shí)間點(diǎn)蛇毒組RGCs陽(yáng)性率均高于鹽水組，差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。④Tau：兩組tau表達(dá)均隨時(shí)間增高，14天表達(dá)最強(qiáng)；蛇毒組強(qiáng)于鹽水組； 4天時(shí)蛇毒組與鹽水組RGCs陽(yáng)性率的差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)，7天和14天的差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)，蛇毒組RGCs陽(yáng)性率均高于鹽水組。⑤MBP：損傷后兩組均有MBP陽(yáng)性表達(dá)，鹽水組表現(xiàn)為