蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子對(duì)混合培養(yǎng)鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用.pdf

1、目的：通過(guò)對(duì)視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的存活和軸突再生情況的觀察，研究蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子對(duì)離體混合培養(yǎng)的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的保護(hù)作用。 方法：采用新生SD大鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞體外原代混合培養(yǎng)技術(shù)，加入不同濃度的蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子，MTT比色法檢測(cè)細(xì)胞的活力，選擇一個(gè)最佳濃度進(jìn)行培養(yǎng)，行抗Thy-1.1免疫細(xì)胞化學(xué)染色，觀察視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞在體外的存活時(shí)間，比較實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞個(gè)數(shù)、胞體直徑和軸突長(zhǎng)度。 結(jié)果：視網(wǎng)膜神經(jīng)細(xì)

2、胞的活性隨著vNGF濃度的增大而逐漸增大，濃度為80ng/ml時(shí)細(xì)胞活性最大，然后隨著濃度再增大細(xì)胞活性降低，蛇毒神經(jīng)生長(zhǎng)因子作用于RGCs的最佳濃度是80ng/ml，用該濃度作用于細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞存活13-14天，對(duì)照組細(xì)胞存活7-8天，(p<0.01)。抗Thy-1.1免疫細(xì)胞化學(xué)染色，細(xì)胞胞體及軸突都呈棕黃色的為陽(yáng)性，即為視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組分別為224.23±3.83個(gè)和182.47±2.79個(gè)。實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞軸