促生長(zhǎng)激素神經(jīng)肽對(duì)大鼠坐骨神經(jīng)夾傷的治療作用.pdf

1、目的:神經(jīng)病理性疼痛(neuropathicpain，NP)是由于軀體感覺(jué)系統(tǒng)的損傷或疾病所引起的疼痛。NP作為慢性疼痛的一種，由于發(fā)病率高，嚴(yán)重影響患者生活質(zhì)量，目前已受到越來(lái)越多的關(guān)注和重視。然而，NP的發(fā)病機(jī)制復(fù)雜，其治療效果受到限制。促生長(zhǎng)激素神經(jīng)肽(galanin，Gal)與多種生物功能有關(guān)，如疼痛、發(fā)育和營(yíng)養(yǎng)等。Gal可通過(guò)作用于Gal1型受體（galaninreceptor1，GalR1）和Gal2型受體（galaninr

2、eceptor2，GalR2）而發(fā)揮生物學(xué)效應(yīng)。大量研究表明在神經(jīng)損傷狀態(tài)下，背根神經(jīng)節(jié)（dorsalrootganglion，DRG）和脊髓灰質(zhì)后角(spinaldorsalhorn，SDH)內(nèi)的Gal表達(dá)量上調(diào)，發(fā)揮抗疼痛、神經(jīng)營(yíng)養(yǎng)和促進(jìn)神經(jīng)再生等作用。本實(shí)驗(yàn)利用大鼠坐骨神經(jīng)夾傷模型來(lái)研究外源性Gal對(duì)坐骨神經(jīng)夾傷大鼠DRG和SDH神經(jīng)元內(nèi)Gal及其受體表達(dá)的調(diào)節(jié)，在行為學(xué)、坐骨神經(jīng)功能學(xué)和形態(tài)學(xué)等方面的變化探討外源性Gal對(duì)神經(jīng)損

3、傷的保護(hù)作用及機(jī)制。通過(guò)本實(shí)驗(yàn)為NP的實(shí)驗(yàn)研究、神經(jīng)損傷的臨床治療提供一定理論基礎(chǔ)和實(shí)驗(yàn)依據(jù)。方法:將63只鞘內(nèi)置管成功的大鼠隨機(jī)分成3組，每組21只:(1)夾傷組，即大鼠坐骨神經(jīng)夾傷后每天鞘內(nèi)注射10μ(l)人工腦脊液(artificialcerebrospinalfluid,ACSF);(2)夾傷+Gal絹，即大鼠坐骨神經(jīng)夾傷后每天鞘內(nèi)注射3μgGal;(3)對(duì)照組，即大鼠假手術(shù)后每天鞘內(nèi)注射10μlACSF。術(shù)后每天進(jìn)行行為學(xué)檢測(cè)

4、，并分別在術(shù)后8d、16d和24d，進(jìn)行神經(jīng)傳導(dǎo)速度(nerveconductionvelocity,NCV)測(cè)定，之后處死取材，再分別檢測(cè)各組Gal及其受體蛋白及mRNA表達(dá)水平，利用甲苯胺藍(lán)染色和透射電鏡觀察坐骨神經(jīng)形態(tài)變化情況。結(jié)果:(1)通過(guò)行為學(xué)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)，坐骨神經(jīng)夾傷可引起大鼠觸覺(jué)異常性疼痛和熱痛閾值降低，而鞘內(nèi)注射外源性Gal可顯著升高該閾值，并且可以使其提前恢復(fù)至正常水平。(2)Westernblot和Real-timeR

5、T-PCR結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，夾傷組大鼠DRG和SDH內(nèi)Gal均明顯升高;與夾傷組相比，夾傷+Gal組大鼠DRG內(nèi)Gal表達(dá)明顯下降，而SDH內(nèi)Gal表達(dá)未見(jiàn)明顯變化。夾傷組大鼠DRG內(nèi)GalR1表達(dá)明顯低于對(duì)照組，而SDH內(nèi)GalR1明顯上調(diào);鞘內(nèi)注射Gal使坐骨神經(jīng)夾傷大鼠DRG和SDH內(nèi)GalR1繼續(xù)降低。與對(duì)照組相比，夾傷組大鼠DRG和SDH內(nèi)GalR2均明顯升高;鞘內(nèi)注射Gal后，其表達(dá)未見(jiàn)明顯變化。(3)利用肌電圖檢測(cè)、

6、甲苯胺蘭染色和透射電鏡觀察受損部位坐骨神經(jīng)傳導(dǎo)速度和形態(tài)結(jié)構(gòu)變化發(fā)現(xiàn)，外源性Gal可顯著改善受損坐骨神經(jīng)的修復(fù)和再生。結(jié)論:鞘內(nèi)注射外源性Gal減輕大鼠坐骨神經(jīng)夾傷引起的觸覺(jué)異常性疼痛和熱痛覺(jué)過(guò)敏，并且促進(jìn)損傷坐骨神經(jīng)的修復(fù)，因此外源性Gal可以減輕神經(jīng)損傷引起的NP并且具有明確的神經(jīng)保護(hù)作用。在正常狀態(tài)、坐骨神經(jīng)夾傷和坐骨神經(jīng)夾傷鞘內(nèi)注射Gal等不同狀態(tài)下，Gal及其受體mRNA和蛋白的表達(dá)有較強(qiáng)的可塑性，表明Gal及其受體參與了大鼠