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文檔簡介
1、目的:神經(jīng)病理性疼痛(neuropathicpain,NP)是由于軀體感覺系統(tǒng)的損傷或疾病所引起的疼痛。NP作為慢性疼痛的一種,由于發(fā)病率高,嚴重影響患者生活質(zhì)量,目前已受到越來越多的關注和重視。然而,NP的發(fā)病機制復雜,其治療效果受到限制。促生長激素神經(jīng)肽(galanin,Gal)與多種生物功能有關,如疼痛、發(fā)育和營養(yǎng)等。Gal可通過作用于Gal1型受體(galaninreceptor1,GalR1)和Gal2型受體(galaninr
2、eceptor2,GalR2)而發(fā)揮生物學效應。大量研究表明在神經(jīng)損傷狀態(tài)下,背根神經(jīng)節(jié)(dorsalrootganglion,DRG)和脊髓灰質(zhì)后角(spinaldorsalhorn,SDH)內(nèi)的Gal表達量上調(diào),發(fā)揮抗疼痛、神經(jīng)營養(yǎng)和促進神經(jīng)再生等作用。本實驗利用大鼠坐骨神經(jīng)夾傷模型來研究外源性Gal對坐骨神經(jīng)夾傷大鼠DRG和SDH神經(jīng)元內(nèi)Gal及其受體表達的調(diào)節(jié),在行為學、坐骨神經(jīng)功能學和形態(tài)學等方面的變化探討外源性Gal對神經(jīng)損
3、傷的保護作用及機制。通過本實驗為NP的實驗研究、神經(jīng)損傷的臨床治療提供一定理論基礎和實驗依據(jù)。方法:將63只鞘內(nèi)置管成功的大鼠隨機分成3組,每組21只:(1)夾傷組,即大鼠坐骨神經(jīng)夾傷后每天鞘內(nèi)注射10μ(l)人工腦脊液(artificialcerebrospinalfluid,ACSF);(2)夾傷+Gal絹,即大鼠坐骨神經(jīng)夾傷后每天鞘內(nèi)注射3μgGal;(3)對照組,即大鼠假手術后每天鞘內(nèi)注射10μlACSF。術后每天進行行為學檢測
4、,并分別在術后8d、16d和24d,進行神經(jīng)傳導速度(nerveconductionvelocity,NCV)測定,之后處死取材,再分別檢測各組Gal及其受體蛋白及mRNA表達水平,利用甲苯胺藍染色和透射電鏡觀察坐骨神經(jīng)形態(tài)變化情況。結果:(1)通過行為學檢測發(fā)現(xiàn),坐骨神經(jīng)夾傷可引起大鼠觸覺異常性疼痛和熱痛閾值降低,而鞘內(nèi)注射外源性Gal可顯著升高該閾值,并且可以使其提前恢復至正常水平。(2)Westernblot和Real-timeR
5、T-PCR結果顯示,與對照組相比,夾傷組大鼠DRG和SDH內(nèi)Gal均明顯升高;與夾傷組相比,夾傷+Gal組大鼠DRG內(nèi)Gal表達明顯下降,而SDH內(nèi)Gal表達未見明顯變化。夾傷組大鼠DRG內(nèi)GalR1表達明顯低于對照組,而SDH內(nèi)GalR1明顯上調(diào);鞘內(nèi)注射Gal使坐骨神經(jīng)夾傷大鼠DRG和SDH內(nèi)GalR1繼續(xù)降低。與對照組相比,夾傷組大鼠DRG和SDH內(nèi)GalR2均明顯升高;鞘內(nèi)注射Gal后,其表達未見明顯變化。(3)利用肌電圖檢測、
6、甲苯胺蘭染色和透射電鏡觀察受損部位坐骨神經(jīng)傳導速度和形態(tài)結構變化發(fā)現(xiàn),外源性Gal可顯著改善受損坐骨神經(jīng)的修復和再生。結論:鞘內(nèi)注射外源性Gal減輕大鼠坐骨神經(jīng)夾傷引起的觸覺異常性疼痛和熱痛覺過敏,并且促進損傷坐骨神經(jīng)的修復,因此外源性Gal可以減輕神經(jīng)損傷引起的NP并且具有明確的神經(jīng)保護作用。在正常狀態(tài)、坐骨神經(jīng)夾傷和坐骨神經(jīng)夾傷鞘內(nèi)注射Gal等不同狀態(tài)下,Gal及其受體mRNA和蛋白的表達有較強的可塑性,表明Gal及其受體參與了大鼠
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