維生素E和元素Zn對手機輻射暴露損傷的妊娠期大鼠和子代的干預作用及其機理研究.pdf

1、[目的]
　　 近年來，隨著無線電通訊事業(yè)的迅猛發(fā)展，手機的使用率不斷升高，手機電磁輻射問題正日益引起政府和社會各界的廣泛關注，成為重大的公共衛(wèi)生問題。手機通訊時會發(fā)射一定波長的電磁波，部分被人體吸收，從而引起一定的機體損傷，尤其孕期的個體及其胎兒處于特殊的時期，對外界有害因素的刺激往往較為敏感，引起母體及胎兒某些生理方面的改變和異常;而適量的維生素E和元素Zn對維持機體正常的生理功能和生長發(fā)育具有重要的作用。本研究以孕鼠為模型

2、，通過測量干預組、非干預組孕鼠和新生鼠腦組織中丙二醛(MalondialdehydeMDA)、超氧化物歧化酶(SuperoxideDismutaseSOD)、過氧化物酶(PeroxidasePOD)、乙酰膽堿酯酶(AcetylcholineesteraseAChE)、四種氨基酸類神經遞質[天冬氨酸(AspartateAsp)、谷氨酸(GlutamateGlu)、甘氨酸(GlycineGly)、γ-氨基丁酸(γ-aminobutyrica

3、cidGABA)]、血清中補體C3、補體C4、元素Zn、Fe、Cu的含量，探討維生素E和元素Zn對手機輻射暴露損傷的妊娠期機體和子代的干預作用及其機理。
　　 [方法]
　　 1.建立動物模型
　　 清潔級Wistar大鼠妊娠第0d孕鼠60只，體重270g～310g，購自山東大學實驗動物中心。按體重均衡的原則將受孕大鼠隨機分為陰性對照組、陽性對照組、VitE低劑量組、VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+

4、Zn聯(lián)合干預組，每組10只，單籠飼養(yǎng)。自妊娠第1d起每天上午陰性對照組和陽性對照組孕鼠用不含VitE的花生油1ml/kg灌胃，VitE低、中、高劑量組分別用5mg/ml、15mg/ml、30mg/ml的VitE花生油溶液按1ml/kg的劑量灌胃(灌胃之前不空腹)，聯(lián)合干預組用15mg/ml的VitE花生油溶液和10mg/ml的硫酸鋅水溶液按1ml/kg的劑量分別灌胃，各組孕鼠灌胃直至自然分娩;灌胃后，將孕鼠自妊娠第1d開始輻射，每次輻射

5、60min，每天輻射3次，直至孕鼠自然分娩，陰性對照組處理同其他各組，只是不將移動電話接通。
　　 2.觀察維生素E和元素Zn的干預效果
　　 每日觀察和記錄各組妊娠期大鼠的精神狀態(tài)、進食多少、排泄、皮毛、活動等情況，每日灌胃前稱量記錄孕鼠體重。孕鼠正常分娩后，詳細記錄每只孕鼠分娩的新生鼠個數(shù)，觀察24h內新生鼠生存狀態(tài)，檢查每只新生鼠早期生長發(fā)育狀況，包括其尾長、身長以及體重等指標。
　　 孕鼠分娩后各實驗組隨

6、機選取5只孕鼠斷頭處死取血，并迅速剝離全腦后制成濃度為10％的組織勻漿，每個實驗組各隨機選取25只24h新生鼠斷頭處死取血，并迅速剝離全腦組織，制成10％組織勻漿，用試劑盒測定各組孕鼠和新生鼠腦組織中MDA、SOD、POD、AChE的含量;將血液離心后得到血清，測定血清中補體C3、C4的含量;在每組新生鼠中各隨機選取25只，連同剩余大鼠斷頭處死取血，并迅速剝離全腦組織，經適當處理后測定天冬氨酸、谷氨酸、甘氨酸、γ-氨基丁酸含量;將血液離

7、心后得到血清，用原子吸收分光光度法測定血清中微量元素(Zn、Fe、Cu)的含量。
　　 [結果]
　　 1.孕鼠和新生鼠生長發(fā)育情況
　　 肉眼觀察孕鼠精神狀態(tài)良好，進食正常、性情溫柔順從;新生鼠無畸形，皮膚嫩滑粉紅，精神狀況良好;各組孕鼠在不同孕期的體重比較均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，各組新生鼠個數(shù)、新生鼠平均體重、腦重、身長、尾長之間的差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。
　　 2.維生素E和元素

8、Zn對手機輻射暴露孕鼠和新生鼠腦組織中MDA、SOD、POD和AChE的干預作用
　　 陽性對照組與陰性對照組比較，孕鼠腦組織丙二醛(MDA)含量差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，表明手機輻射未能引起孕鼠腦組織MDA含量的增高;VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，孕鼠腦組織丙二醛(MDA)含量顯著性降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性對照組與陰性對照組比較，新生鼠腦組織MDA含量升高，差異有統(tǒng)計學意

9、義(P＜0.05);VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，新生鼠腦組織丙二醛(MDA)含量顯著性降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE+Zn聯(lián)合組與VitE中劑量組比較，新生鼠腦組織中MDA含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。說明高劑量VitE能抑制由于手機輻射引起的新生鼠腦組織中MDA的升高，以及降低孕鼠腦組織中MDA含量，而且VitE與鋅聯(lián)合應用能增強這種抑制作用，特別對新生鼠效果更為明顯。

10、r>　　 陽性對照組與陰性對照組比較，孕鼠腦組織超氧化物歧化酶(SOD)活力差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05);VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，孕鼠腦組織超氧化物歧化酶(SOD)活力顯著性較高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性對照組與陰性對照組比較，新生鼠腦組織SOD活力降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE低劑量組、VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，新生

11、鼠腦組織中SOD活力升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE+Zn聯(lián)合組與VitE中劑量組比較，孕鼠、新生鼠腦組織中SOD活力升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，說明VitE與Zn協(xié)同對SOD活力的恢復作用高于單一VitE的作用。
　　 陽性對照組與陰性對照組比較，孕鼠腦組織過氧化物酶(POD)活力降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，VitE低劑量組、VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與與

12、陽性對照組比較，孕鼠腦組織過氧化物酶(POD)活力升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性性對照組與陰性對照組比較，新生鼠腦組織過氧化物酶(POD)活力降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，VitE低劑量組、VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與與陽性對照組比較，新生鼠腦組織過氧化物酶(POD)活力升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。說明低、中、高劑量VitE均能抑制由于手機輻射引起的孕鼠、新生鼠腦組織

13、中過氧化物酶(POD)活力的降低，而VitE與鋅聯(lián)合應用不能增強這種抑制作用。
　　 各組孕鼠腦組織中AChE活力比較，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)，表明手機輻射未能引起孕鼠腦組織AChE活力的改變。陽性對照組與陰性對照組比較，新生鼠腦組織中AChE活力升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，新生鼠腦組織AChE活力降低，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.

14、05);VitE中劑量組與VitE+Zn聯(lián)合組比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，說明中、高劑量VitE均能抑制由于手機輻射引起的新生鼠腦組織中AChE活力的升高，而與鋅聯(lián)合應用不能增強這種抑制作用。3.大鼠腦組織中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)四種氨基酸類神經遞質測定的方法學研究
　　 在給定的條件下，大鼠腦組織中四種氨基酸類在10min內分離完全且分離良好，保留時間分別為

15、Asp(3.65min)、Glu(4.34min)、Gly(8.22min)、GABA(9.67min);四種氨基酸類類神經遞質在0.1～1μg/ml范圍內，線性關系良好(r＞0.9950)。Asp:Y=1.9122E7X-3.4354E5(r=0.9966)，檢出限為5.8750×10-10μg/ml，加標回收率為105.6％、100.4％和97.35％，日內精密度RSD日內為3.0％、3.0％和3.9％，日間精密度RSD日間為5.3

16、％、6.4％和5.1％;Glu:Y=1.9122E7X-3.4353E5(r=0.9951)，檢出限為2.8274×10-10μg/ml，加標回收率為95.36％、97.53％和95.19％，日內精密度RSD日內為1.0％、2.8％和2.9％，日間精密度RSD日間為2.5％、7.0％和5.1％;Gly:Y=2.7782E7X+2.8747E5(r=0.9977)，檢出限為9.4497×10-10μg/ml，加標回收率為95.36％、97

17、.53％和95.19％，日內精密度RSD日內為4.3％、0.9％和1.5％，日間精密度RSD日間為6.7％、5.4％和5.7％;GABA:Y=1.9366X+4.4847E5(r=0.9962)，檢出限為2.2896×10-10μg/ml，加標回收率為104.7％、107.4％和103.9％，日內精密度RSD日內為3.9％、2.8％和3.8％，日間精密度RSD日間為5.4％、4.3％和6.6％。
　　 4.維生素E和元素Zn對手

18、機輻射暴露孕鼠和新生鼠腦組織中天冬氨酸(Asp)、谷氨酸(Glu)、甘氨酸(Gly)、γ-氨基丁酸(GABA)四種氨基酸類神經遞質含量的干預作用
　　 孕鼠腦組織中Asp、Gly、GABA含量各組之間比較均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，表明手機輻射未能引起孕鼠腦組織中3種神經遞質含量增高。陽性對照組與陰性對照組比較，孕鼠腦組織Glu含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合

19、組與陽性對照組相比，孕鼠腦組織中Glu含量升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，說明VitE對手機輻射引起的Glu降低有拮抗作用，但VitE+Zn聯(lián)合組與VitE中劑量組未有顯著性差異，協(xié)同作用不明顯。
　　 新生鼠腦組織中Asp、Gly、GABA含量各組之間比較均無統(tǒng)計學差異(P＞0.05)，表明手機輻射未能引起新生鼠腦組織中3種神經遞質含量的改變;陽性對照組新生鼠腦組織中Glu與陰性對照組比較，含量降低，差異有統(tǒng)計學意義

20、(P＜0.05);VitE低劑量組、VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，新生鼠腦組織中Glu含量升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。本實驗結果與上述孕鼠結果較一致，不同的是低劑量VitE的拮抗作用同樣也有顯著性。
　　 5.維生素E和元素Zn對手機輻射暴露孕鼠和新生鼠血清補體C3、C4含量的干預作用
　　 陽性對照組與陰性對照組相比，孕鼠血清C3含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜

21、0.05);VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，孕鼠血清C3含量升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。陽性對照組與陰性對照組相比，孕鼠血清C4含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，孕鼠血清C4含量升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE+Zn聯(lián)合組與VitE中劑量組比較，孕鼠血清C4含量升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)

22、。說明手機輻射可引起孕鼠血清中C3、C4顯著降低，補充中、高劑量VitE后可以使C3、C4含量顯著恢復，并且VitE與鋅有協(xié)同作用。
　　 陽性對照組與陰性對照組相比，新生鼠血清C3含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，新生鼠血清C3含量升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE+Zn聯(lián)合組與VitE中劑量組比較，新生鼠血清C3含量升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜

23、0.05)，實驗結果與孕鼠血清中補體的實驗結果基本一致。
　　 6.維生素E和元素Zn對手機輻射暴露孕鼠和新生鼠血清Zn、Fe、Cu含量的干預作用
　　 陽性對照組與陰性對照組相比，孕鼠與新生鼠血清中7n含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組比較，孕鼠、新生鼠血清中Zn含量升高，差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);VitE+Zn與VitE中劑量組聯(lián)合組比較，孕鼠、新

24、生鼠血清中Zn含量升高，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。說明手機輻射可引起孕鼠及新生鼠血清中Zn含量顯著降低，補充中、高劑量VitE后可以使Zn含量顯著恢復，并且VitE與Zn有協(xié)同作用，新生鼠與孕鼠結果較一致，不同的是低劑量VitE對新生鼠Zn含量降低拮抗作用同樣也有顯著性。
　　 各組孕鼠血清中Fe含量相比，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。陽性對照組與陰性對照組相比，新生鼠血清中Fe含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.

25、05)，補充VitE及鋅后未見明顯改善。
　　 各組孕鼠血清中Cu含量相比，差異均無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。陽性對照組與陰性對照組相比，新生鼠血清中Cu含量降低，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，VitE低劑量組、VitE中劑量組、VitE高劑量組、VitE+Zn聯(lián)合組與陽性對照組新生鼠血清Cu含量比較，差異無統(tǒng)計學意義(P＞0.05)。說明VitE與鋅不能拮抗由于手機輻射引起的新生鼠血清中鐵含量的降低。
　　 [結

26、論]
　　 1.維生素E和元素Zn對手機輻射暴露孕鼠體重、精神狀況和新生鼠一般生長發(fā)育指標未見明顯影響。
　　 2.一定劑量維生素E對手機輻射暴露的孕鼠及新生鼠有一定的抗氧化保護作用，元素Zn與維生素E聯(lián)合作用在受手機輻射暴露孕鼠SOD、新生鼠MDA、SOD變化方面具有顯著的干預作用。
　　 3.手機電磁輻射未造成孕鼠腦組織AChE活力的明顯改變，但造成新生鼠腦組織AChE活力的明顯上升，中、高劑量維生素E對新生

27、鼠腦組織AChE活力上升有一定拮抗作用;維生素E在一定劑量范圍內對手機輻射暴露孕鼠及新生鼠腦組織谷氨酸類神經遞質的降低也具有干預作用。
　　 4.一定劑量維生素E對手機輻射暴露孕鼠血清補體C3、C4及新生鼠血清C3的降低具有明顯的干預作用，其中元素維生素E與Zn聯(lián)合在保護受手機輻射大鼠補體C4和新生鼠補體C3變化，提高免疫力方面具有顯著效應。
　　 5.維生素E與元素Zn對手機電磁輻射造成新生鼠血清Cu、Fe含量的降低不