白術(shù)根腐病生防菌的篩選及控病研究.pdf

1、由鐮刀菌（Fusarium）引起的白術(shù)根腐病在貴州各大中藥材基地發(fā)生普遍，是制約生產(chǎn)、造成經(jīng)濟(jì)損失的一大病害。目前，白術(shù)根腐病防治主要依靠化學(xué)農(nóng)藥，化學(xué)防治易導(dǎo)致環(huán)境污染和農(nóng)藥殘留等問(wèn)題。生物防治以有益微生物抑制病原菌的生長(zhǎng)與傳播，從而環(huán)保高效地防治植物病害，是病害防治研究的熱門方向，具有廣闊前景。本文研究白術(shù)根腐病的生物防治，篩選對(duì)其致病菌有抑制作用的真菌、細(xì)菌和放線菌，研究其抑制效果、生物學(xué)特性、產(chǎn)抗生素的液體發(fā)酵條件以及田間試驗(yàn)研

2、究，為白術(shù)根腐病的生物防治提供一定理論依據(jù)。主要取得以下研究成果：
　　1、生防菌分離、篩選、鑒定。
　　采用土壤稀釋法和平板對(duì)峙法，從土壤中分離、鑒定真菌7株，細(xì)菌12株，放線菌5株。經(jīng)菌株形態(tài)、生理生化及分子鑒定，7株真菌均為木霉屬（Trichoderma spp.）真菌，包括棘孢木霉（T. asperellum）、擬康寧木霉（T. koningiopsis）、長(zhǎng)柄木霉（T. longibrachiatum）和綠色木霉（

3、T. viride）；12株細(xì)菌均屬于芽孢桿菌屬（Bacillus），包括解淀粉芽孢桿菌（B. amyloliquefaciens）、枯草芽孢桿菌（B. subtilis）、甲基營(yíng)養(yǎng)型芽孢桿菌（B. methylotrophicus）；5株放線菌均為鏈霉菌屬（ Streptomyces），包括吸水鏈霉菌（ S. hygroscopicus）、不吸水鏈霉菌（ S. ahygroscopicus）和魯?shù)劓溍咕⊿. rutgersensis

4、）。
　　2、生防菌生物學(xué)特性及培養(yǎng)條件。
　　7株生防木霉菌株適宜的培養(yǎng)基是PDA和燕麥培養(yǎng)基，pH4~6有利于菌絲生長(zhǎng)，培養(yǎng)最佳溫度為27.5~30℃，光照對(duì)菌絲生長(zhǎng)影響差異不顯著，7個(gè)菌株均能很好的利用葡萄糖、乳糖和麥芽糖、蛋白胨和氯化銨。木霉M216-1菌株產(chǎn)抗生素的液體培養(yǎng)基及發(fā)酵條件：乳糖20 g，蛋白胨2g，氯化鈉0.5 g，硫酸亞鐵0.01 g，硫酸鎂0.5 g，碳酸鈣1g，磷酸氫二鉀0.5 g，蒸餾水100

5、0 mL。pH6、裝液量為40mL（250mL三角瓶裝量）、接種量為3％，28℃160rpm發(fā)酵72h。
　　12株生防芽孢桿菌在30℃~45℃時(shí)均能生長(zhǎng)良好，不耐酸性，pH在5以下均不能生長(zhǎng)，多數(shù)菌株能在含鹽量超過(guò)10%的培養(yǎng)基上生長(zhǎng)，且均為好氧菌。芽孢桿菌B-7產(chǎn)抗生素液體培養(yǎng)基及培養(yǎng)條件：蔗糖20 g，酵母膏2g，氯化鈉0.5 g，硫酸亞鐵0.01 g，硫酸鎂0.5 g，碳酸鈣1g，磷酸氫二鉀0.5 g，蒸餾水1000 mL

6、。pH7、裝液量為40mL（250mL三角瓶裝量）、接種量為2%，30℃180rpm發(fā)酵48h。
　　5株生防鏈霉菌在30℃長(zhǎng)勢(shì)良好，菌株耐鹽性均不超過(guò)15%，可利用多種C源和N源。F-11菌株適合的培養(yǎng)基及發(fā)酵條件為：可溶性淀粉20 g，酵母膏2g，氯化鈉0.5 g，硫酸亞鐵0.01 g，硫酸鎂0.5 g，碳酸鈣1g，磷酸氫二鉀0.5 g，蒸餾水1000 mL。pH為7、裝液量為40mL（250mL三角瓶裝量）、接種量為5%，3