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1、靈芝具有多種營(yíng)養(yǎng)成分并具有多種生理活性和藥理作用[1],因此以靈芝孢子粉為原料開發(fā)系列功能性食品、保健品與日俱增[2],但至今為止靈芝孢子粉尚未有法定的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn),且對(duì)靈芝質(zhì)量的研究多集中于靈芝多糖[3,4,5,6]和靈芝酸(三萜類)[7,8,9,10],而腺苷作為其主要的活性物質(zhì)之一,對(duì)其研究較少[11,12]。本研究建立了靈芝孢子粉腺苷含量的測(cè)定方法,并對(duì)靈芝多糖的檢測(cè)方法做了改進(jìn),以核苷類物質(zhì)為參比物建立了靈芝孢子粉的高效液相色譜指
2、紋圖譜,指紋圖譜可以體現(xiàn)靈芝孢子粉以核苷類為指標(biāo)的整體特征,考察了批次之間的穩(wěn)定性,為靈芝孢子粉提供了深層次評(píng)價(jià)質(zhì)量的鑒別依據(jù)。
一.靈芝孢子粉活性物質(zhì)含量測(cè)定的研究
目的:建立靈芝孢子粉中腺苷、靈芝多糖含量測(cè)定的分析方法,以此為靈芝孢子粉質(zhì)量控制指標(biāo)之一。
方法:采用10%甲醇溶劑超聲提取50min,以0.01mol/L乙酸鈉溶液∶甲醇=85∶15(V/V)為流動(dòng)相,UltimateTM AQ
3、-C18(4.6×250mm,5μm)色譜柱,260nm檢測(cè)波長(zhǎng),HPLC-PDA法測(cè)定腺苷的含量;采用紫外分光光度法,用硫酸-蒽酮顯色法在625nm波長(zhǎng)下測(cè)定吸光度值從而測(cè)定靈芝多糖的含量。
結(jié)果:靈芝孢子粉中腺苷含量平均值為258.42μg/g,加標(biāo)回收率在98.04%~99.64%之間;靈芝多糖含量平均值為1.75%,加標(biāo)回收率在82.83%~90.00%之間,可以滿足腺苷、靈芝多糖含量測(cè)定的分析要求。
4、 結(jié)論:本研究建立的方法適用于靈芝孢子粉中腺苷及靈芝多糖含量的測(cè)定,方法選擇性強(qiáng),操作簡(jiǎn)單快速。
二.靈芝孢子粉高效液相色譜指紋圖譜研究
目的:以腺苷、尿苷等核苷類物質(zhì)為參比物,建立靈芝孢子粉的高效液相色譜指紋圖譜。
方法:采用10%甲醇溶劑超聲提取30min,以0.01mol/L乙酸鈉溶液-甲醇為流動(dòng)相梯度洗脫,UltimateTM(4.6×250mm,5μm)色譜柱,260nm檢測(cè)波長(zhǎng),HP
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