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1、目的:通過(guò)給健康雌性Wistar大鼠腹腔注射三碘甲腺原氨酸(T<,3>),建立甲亢性心臟損害的動(dòng)物模型,同時(shí)用消癭強(qiáng)肌湯灌胃治療,運(yùn)用電鏡和光鏡技術(shù)觀察大鼠心肌細(xì)胞的形態(tài)學(xué)及超微結(jié)構(gòu)的變化;同時(shí)檢測(cè)T3以及消癭強(qiáng)肌湯對(duì)大鼠心肌的抗氧化能力的影響。進(jìn)一步探討消癭強(qiáng)肌湯治療甲亢心臟病的機(jī)理。 方法:將30只健康雌性Wistar大鼠隨機(jī)分為3組:腹腔注射甲狀腺激素40天組、甲狀腺激素40天+消癭強(qiáng)肌湯40天組、正常對(duì)照組,每組10只。
2、實(shí)驗(yàn)動(dòng)物腹腔注射甲狀腺激素鈉鹽(L-Thyroxine Sodium salt,產(chǎn)地:Sigma USA),濃度為250μg/1ml,1ml/100g體重,每同一次;正常對(duì)照組每天腹腔注射生理鹽水,1ml/100g。注射液體均經(jīng)過(guò)滅菌處理。常規(guī)每周記錄各組動(dòng)物體重,心率的變化情況;測(cè)量心臟指數(shù)和心室肥厚指數(shù);放射免疫法測(cè)定血清T3,T4水平;同時(shí)酶細(xì)胞化學(xué)方法,檢測(cè)消癭強(qiáng)肌湯對(duì)大鼠心肌的抗氧化能力的影響。動(dòng)物經(jīng)4%多聚甲醛及2%戊二醛灌
3、流固定后,取心室肌組織,部分標(biāo)本制成石蠟切片,經(jīng)HE染色,光鏡下觀察各組心肌細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化,并利用圖象分析技術(shù)進(jìn)行定量分析;其余標(biāo)本切成0.1×0.1×0.5cm的小塊制作電鏡標(biāo)本,超薄切片,經(jīng)醋酸鈾,檸檬酸鉛染色后,JEM-1200EX電鏡觀察。 結(jié)果:1、注射甲狀腺激素組體重逐漸下降,平均每周下降6g,到第六周大約下降18%,活動(dòng)逐漸減少,肌力下降。中藥治療組動(dòng)物體重雖下降,但幅度明顯低于模型組。自第三周開(kāi)始,與對(duì)照組相比,
4、模型組和中藥治療組心率均顯著增快(P<0.01);自第五周開(kāi)始,與模型組相比,中藥治療組心率顯著減慢(P<0.01)。2、中藥治療組T3,T4雖明顯高于正常對(duì)照組,但與模型組比較有非常顯著性差異(P<0.01)。3、模型組心臟指數(shù)HW/BW、LVW/BW、LVWT和VST均明顯升高,與空白對(duì)照組比較,有非常顯著性差異(P<0.01);中藥治療組能有效對(duì)抗大鼠心肌肥厚的形成,與模型組比較HW/BW、LVW/BW、VST有非常顯著性差異(P
5、<0.01),LVWT有顯著性差異(P<0.05)。4、模型組與空白對(duì)照組比較,SOD、GPX活性明顯下降,有顯著性差異(P<0.01),MDA含量則升高,與空白對(duì)照比比較有明顯差異(P<0.05)。中藥治療組則能明顯升高SOD、GPX活性(P<0.01),降低MDA括性(P<0.05)。5、光鏡觀察顯示:模型組心肌細(xì)胞明顯增粗,排列不規(guī)則,心肌細(xì)胞內(nèi)空泡變性,部分心肌細(xì)胞斷裂、壞死,細(xì)胞間結(jié)締組織增生,成纖維細(xì)胞以及毛細(xì)血管均增多,可
6、見(jiàn)炎細(xì)胞浸潤(rùn),肌束排列不規(guī)則。中藥治療組心肌纖維同對(duì)照組無(wú)明顯差別,細(xì)胞形態(tài)正常,排列規(guī)則,肌束排列規(guī)則。細(xì)胞之間結(jié)締組織未見(jiàn)明顯增生。6、超微結(jié)構(gòu)觀察:模型組可見(jiàn)心肌細(xì)胞中線粒體明顯增多,腫脹并出現(xiàn)空泡或增長(zhǎng),肌漿網(wǎng)擴(kuò)張明顯,擴(kuò)張的肌漿網(wǎng)多融合成大空泡,肌原纖維走行紊亂,肌絲溶解,肌節(jié)縮短,甚至可見(jiàn)肌原纖維局灶性溶解,Z線消失。中藥治療組超微結(jié)構(gòu)有明顯改善,主要表現(xiàn)在細(xì)胞形念較正常,線粒體形態(tài)接近正常,肌絲排列規(guī)則,空泡消失。
7、 結(jié)論:1、模型組體重明顯下降,心率明顯加快,甲亢癥狀明顯,血清中T3、T4均明顯升高,光、電鏡下心肌組織的明顯異常,顯示甲亢并心臟損害模型建立的成功。2、心肌肥厚盡管是由于多種直接和間接原因造成,甲亢的高甲狀腺激素狀態(tài)是造成甲亢性心臟病心肌肥厚的根本原因,消癭強(qiáng)肌湯則能有效的防止心肌肥厚的發(fā)生,其能有效降低甲亢大鼠血清T3、T4,可能是防止心肌肥厚的機(jī)制之一。3、長(zhǎng)期大量甲狀腺激素引起心肌組織結(jié)構(gòu)形態(tài)學(xué)的改變,光鏡和電鏡均可觀察到心肌
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