共同性斜視弱側(cè)眼肌的組織形態(tài)及超微結(jié)構(gòu)研究.pdf

1、共同性斜視已成為日益嚴(yán)重的健康問(wèn)題,其發(fā)病機(jī)制的研究、治療時(shí)機(jī)和治療方案的探討一直是眼科學(xué)的重要課題.共同性斜視的病因目前尚不明確,多數(shù)文獻(xiàn)支持神經(jīng)支配因素理論,即"傳出原理",認(rèn)為眼位信息是由中樞神經(jīng)系統(tǒng)提供,經(jīng)傳出神經(jīng)傳至眼外肌;近年來(lái)有學(xué)者提出傳入原理,即眼位信息經(jīng)眼外肌本體感受器三叉神經(jīng)眼支傳至中樞神經(jīng)系統(tǒng),再由傳出神經(jīng)傳至眼外肌.目前的研究均表明斜視眼弱側(cè)眼肌確實(shí)發(fā)生了病理學(xué)改變,由于眼肌運(yùn)動(dòng)不僅取決于眼肌內(nèi)部的細(xì)微結(jié)構(gòu)正常及

2、神經(jīng)支配的共同完成,同時(shí)維持眼平衡及保持眼球正常位置也依靠正常眼肌纖維本身的肌張力和緊張度,病人肌纖維呈萎縮性改變,不能接受中樞的神經(jīng)沖動(dòng)刺激使眼肌的興奮松弛,調(diào)整受到破壞,不能維持眼球的正常位置及建立雙眼視覺(jué).這種肌纖維超微結(jié)構(gòu)的改變與斜視時(shí)間長(zhǎng)、矯治時(shí)間有較大的關(guān)系. 研究目的：通過(guò)對(duì)不同年齡組共同性斜視患者弱側(cè)眼外肌的光鏡和電鏡觀察,并測(cè)定光鏡下各年齡組肌纖維面積/膠原纖維面積的變化,探討共同性斜視的發(fā)病機(jī)理及手術(shù)時(shí)機(jī)的選

3、擇. 研究對(duì)象與方法 1. 研究對(duì)象 1.1斜視組本組共同性斜視患者50例,來(lái)自浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院眼科中心和附屬兒童醫(yī)院眼科,其中男性28例,女性22例;共同性內(nèi)斜24例,共同性外斜26例;年齡2-64歲;病程1-45年;斜視度30<'△>-90<'△>.所有斜視病例第一斜視角等于第二斜視角、無(wú)復(fù)視、無(wú)眼球運(yùn)動(dòng)障礙.排除麻痹性斜視及其他眼病、心肝腎等重大臟器疾病.按年齡分為三組:6歲及以下;6～12歲:12歲

4、以上. 1.2對(duì)照組本組12例因外傷而摘除眼球的非斜視患者,來(lái)自浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院附屬二院眼科中心和附屬兒童醫(yī)院眼科,其中男性7例,女性5例;年齡3-56歲.排除斜視及心肝腎等重大臟器疾病. 所有研究對(duì)象均隨機(jī)抽取.所有檢查均取得患者和家長(zhǎng)的知情同意. 2. 研究方法 采用前瞻性設(shè)計(jì),分組對(duì)比研究. 2.1眼科檢查:所有入選對(duì)象均行常規(guī)眼部檢查,包括視力、眼前段裂隙燈檢查、眼底、眼壓等檢查;屈光狀態(tài)檢

5、查;斜視專科檢查,包括眼球運(yùn)動(dòng),三棱鏡加遮蓋檢查眼位、同視機(jī)進(jìn)行各診斷眼位的斜視角測(cè)定及雙眼單視功能檢查. 2.2實(shí)驗(yàn)室檢查: 2.2.1標(biāo)本的采集和制作所有斜視組均采集弱側(cè)眼肌即內(nèi)直肌或外直肌.對(duì)照組采集內(nèi)直肌和外直肌. 2.2.1.1光鏡的標(biāo)本制作:將切下的眼外肌置10﹪福爾馬林溶液中固定,取材,用乙醇逐級(jí)脫水,用二甲苯透明,用石蠟浸蠟,包埋成蠟塊,每塊做橫切和縱切兩個(gè)切面,切片厚5 μ m,分別行HE染色和

6、Masson染色后用光鏡觀察. 2.2.1.2電鏡的標(biāo)本制作:將切下的眼外肌立2.5﹪戊二醛固定,1周后,用磷酸鹽緩沖漂洗,經(jīng)1﹪餓酸固定2小時(shí),丙酮逐級(jí)脫水后,包埋液包埋,超薄切片檸檬酸鉛染色,用H(Philips Tacnai 10,荷蘭)透射電鏡觀察. 2.2.2測(cè)定方法Masson染色選用縱切片,用病理圖文分析系統(tǒng)測(cè)定肌纖維面積和膠原纖維面積比. 2.3統(tǒng)計(jì)學(xué)分析計(jì)算所有統(tǒng)計(jì)數(shù)據(jù)使用SPSS13.0軟件包

7、計(jì)算,數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差表示.單樣本的Kolmogorow-Smirnov檢驗(yàn)正態(tài)分布.比較斜視組和對(duì)照組的特征差異采用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn)和X2檢驗(yàn).比較三年齡組的特征差異采用Pearson檢驗(yàn)和單因素的方差分析.比較共同性內(nèi)斜和共同性外斜的差異采用獨(dú)立樣本的t檢驗(yàn).三組均數(shù)間兩兩比較采用LSD-t法.兩變量的相關(guān)分析應(yīng)用Spearman等級(jí)相關(guān)進(jìn)行分析. 研究成果： 1.光鏡結(jié)果HE染色示肌膜、細(xì)胞核呈藍(lán)色,肌纖維為粉紅

8、色,結(jié)締組織為淡紅色. Masson染色示胞核呈藍(lán)褐色,膠原纖維呈綠色,肌纖維、紅細(xì)胞和纖維素呈紅色.對(duì)照組表現(xiàn)為肌纖維排列整齊,肌纖維大小一致,肌細(xì)胞為圓形,肌漿呈粉紅色.斜視組弱側(cè)眼外肌均有不同程度的病理改變,主要表現(xiàn)為:肌纖維粗細(xì)不均,萎縮,排列疏松、紊亂,核內(nèi)移,肌漿變性呈顆粒狀或出現(xiàn)空泡,肌結(jié)締組織增多,有的僅見(jiàn)極少量肌纖維,甚至僅見(jiàn)成熟的膠原纖維,這種改變隨年齡的增長(zhǎng)而明顯不同. 2.共同性斜視弱側(cè)眼外肌電鏡結(jié)果肌纖

9、維減少,肌絲破壞,局灶性肌絲溶解,肌纖維玻璃樣變,肌纖維之間結(jié)締組織增生并形成寬窄不均的纖維條索將肌纖維分隔,間質(zhì)成分增多,神經(jīng)纖維減少,細(xì)胞內(nèi)結(jié)構(gòu)變性,可見(jiàn)大量線粒體增生、聚集. 3.比較斜視組和對(duì)照組的年齡、性別無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05).斜視組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.65783±0.057306,對(duì)照組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.186908±0.0595106,對(duì)照組明顯高于斜視組(P<0.01). 4

10、.比較三不同年齡組的性別、斜視性質(zhì)、斜視程度等無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(p>0.05). 5.Masson染色中肌纖維面積/膠原纖維面積在不同年齡組的情況用單樣本的Kolmogrow-Smimov檢驗(yàn)示各年齡組中的肌纖維面積/膠原纖維面積分布符合正態(tài)分布,≤6歲組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.242523±0.0628391,6-12歲組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.188544±0.0326772,>12歲組肌纖維面積/膠原纖維面積為0.

11、151233±0.0464508.利用LSD檢驗(yàn)三組之間兩兩比較,差異均有顯著性(P<0.05). 6.細(xì)胞面積/膠原纖維面積與不同年齡組的相關(guān)性分析對(duì)肌纖維面積/膠原纖維面積和不同年齡組進(jìn)行Spearman等級(jí)相關(guān)分析,結(jié)果顯示年齡程度與肌纖維面積/膠原纖維面積呈負(fù)相關(guān)(r=-0.601,p<0.01). 7.共同性內(nèi)斜與共同性外斜中肌纖維面積/膠原纖維面積比較用單樣本的Kolmogrow-Smirnov檢驗(yàn)示兩組中的

12、肌細(xì)胞面積/膠原纖維面積分布符合正態(tài)分布,肌纖維面積/膠原纖維面積在共同性內(nèi)斜視中為0.197233±0.0677980,共同性外斜視中為0.177377±0.0501567,采用Levene檢驗(yàn)顯示肌纖維面積/膠原纖維面積方差齊(F=2.372,P=0.130),故采用T檢驗(yàn),差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(t=1.184,P>0.05). 研究結(jié)論： 1. 通過(guò)光鏡和電鏡的觀察發(fā)現(xiàn)共同性斜視的弱側(cè)眼外肌發(fā)生了病理性改變.且在不同的