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文檔簡介
1、本文分兩個實驗進行探討
實驗一:不同強度跑臺運動對大鼠膝關節(jié)軟骨形態(tài)學的影響
目的:觀察低、中、高強度的跑臺運動對大鼠膝關節(jié)軟骨組織形態(tài)學的影響。
方法:24只雄性SD成年大鼠隨機分為4組:安靜組(n=6)、低強度運動組(n=6)、中強度運動組(n=6)和高強度運動組(n=6)。安靜組大鼠不做任何干預,籠中飼養(yǎng),自由活動;運動組大鼠行不同強度的跑臺運動。8周后,處死大鼠,獲取膝關節(jié),固定、脫鈣,正中矢狀面切
2、取膝關節(jié)軟骨股骨內(nèi)側(cè)髁遠端關節(jié)面,石蠟包埋、切片,將其分為接觸區(qū)、移形區(qū)及非接觸區(qū),分別行HE、番紅O-固綠染色,通過大體觀察、改良的Mankin’s評分(Modified Mankin’s score,MMS)、糖胺多糖(glycosaminoglycans,GAG)濃度測定、軟骨細胞計數(shù)和軟骨層厚度測量等指標評估軟骨形態(tài)學改變。
結(jié)果:與安靜組相比,低強度和中強度運動組大鼠膝關節(jié)可見少量透明的關節(jié)液,軟骨表面半透明狀,光滑
3、而有光澤;組織學染色可見關節(jié)軟骨表面光滑,基質(zhì)染色均勻,GAG含量顯著增加,軟骨細胞排列規(guī)整,軟骨層次清晰,潮線清晰可見,軟骨層增厚,MMS評分均顯著降低;而高強度運動組大鼠關節(jié)液增多,軟骨表面失去正常光澤較暗淡,軟骨變薄,可透見下方的軟骨下骨;組織學染色可見軟骨表面粗糙,甚至出現(xiàn)缺損,基質(zhì)染色不均勻,GAG含量顯著降低,軟骨細胞簇集,潮線消失,軟骨層變薄,MMS評分顯著增高;呈現(xiàn)出骨性關節(jié)炎樣改變。
結(jié)論:關節(jié)軟骨的形態(tài)學改
4、變?nèi)Q其所承受的負荷環(huán)境。在低強度和中強度的這個“安全窗口”間的負荷有利于維持關節(jié)軟骨基質(zhì)的內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài);高強度的運動負荷導致大鼠關節(jié)軟骨出現(xiàn)退變樣改變。
實驗二:不同強度跑臺運動對大鼠關節(jié)軟骨潤滑素代謝的影響
目的:觀察不同強度跑臺運動對大鼠關節(jié)軟骨細胞合成和分泌潤滑素的影響。
方法:如第一部分所述,各組大鼠經(jīng)跑臺訓練后處死,迅速刮取一側(cè)關節(jié)面軟骨至凍凝管,液氮快速冷凍,備行RT-PCR檢測;另一側(cè)關節(jié)軟骨
5、固定脫鈣后,石蠟包埋、切片。通過免疫組化檢測軟骨接觸區(qū)、移形區(qū)及非接觸區(qū)中潤滑素的表達;實時定量熒光反轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈式反應檢測軟骨潤滑素mRNA基因的表達。
結(jié)果:免疫組織化學結(jié)果表明,較安靜組相比,低強度運動組以及中強度運動組的接觸區(qū)、移形區(qū)及非接觸區(qū)潤滑素表達顯著增加;相反高強度運動組中潤滑素的表達較安靜組相比略低,但較低強度和中強度運動組相比顯著減少。同時低強度運動組和中強度組的潤滑素mRNA基因表達量較高強度運動組和安靜
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