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1、目的:應(yīng)用激光共聚焦顯微鏡觀察Ⅱ型糖尿病患者球結(jié)膜及球結(jié)膜微血管的改變,探討球結(jié)膜微血管改變與糖尿病視網(wǎng)膜病變的相關(guān)性,為糖尿病視網(wǎng)膜病變的診斷及研究提供新的方法。
方法:選擇與我院就診的患者30例(55眼),排除糖尿病外的全身疾病如高血壓等,排除眼部外傷感染及佩戴角膜接觸鏡史。Ⅱ型糖尿病患者19例(35眼),男性8例,女性11例,平均年齡58±8.69歲(46~70歲)。病程最短1年,最長(zhǎng)20年,平均5年。健康對(duì)照組患者
2、11例(20眼),男性9例,女性2例,平均年齡58±8.61歲(42~71歲)。裂隙燈顯微鏡常規(guī)檢查照相。
例數(shù)的計(jì)算為雙眼中只要有1只眼符合統(tǒng)計(jì)標(biāo)準(zhǔn)即列入例數(shù)統(tǒng)計(jì),部分患者單眼進(jìn)行檢查統(tǒng)計(jì),因此部分?jǐn)?shù)據(jù)中總例數(shù)有所變化。
糖尿病組根據(jù)糖化血紅蛋白水平分為血糖控制良好組3例5眼(糖化血紅蛋白:<6.226);一般組6例11眼(6.2~8.096),不良組10例19眼(>8.0%)。
根據(jù)糖尿病病
3、程分為<5年組10例19眼;5-10年組3例6眼;>10年組6例10眼。
無(wú)糖尿病視網(wǎng)膜病變組6例8眼,根據(jù)糖尿病視網(wǎng)膜病變分期,分為非增殖期9例10眼;增值前期8例9眼;增殖期7例8眼。
裂隙燈下觀察球結(jié)膜及球結(jié)膜微血管形態(tài)。激光共聚焦顯微鏡觀察各眼球結(jié)膜上皮淺表層細(xì)胞、中間層細(xì)胞、基底層細(xì)胞及杯狀細(xì)胞形態(tài),并對(duì)上皮細(xì)胞各層,杯狀細(xì)胞密度進(jìn)行計(jì)數(shù)。球結(jié)膜微血流以線流、線粒、粒流、粒緩流、粒擺流及停止作為流速
4、半定量記錄,以粒流和粒流以下速度為異常。觀察球結(jié)膜微血管形態(tài)。分析Ⅱ型糖尿病組與對(duì)照組球結(jié)膜各層上皮細(xì)胞及杯狀細(xì)胞密度之間差異;分析Ⅱ型糖尿病組與對(duì)照組球結(jié)膜微血流改變之間的差異;分析Ⅱ型糖尿病球結(jié)膜微血流改變與微血管改變之間的關(guān)系;分析Ⅱ型糖尿病球結(jié)膜細(xì)胞淺表層細(xì)胞、杯狀細(xì)胞密度改變與球結(jié)膜微血流、微血管改變之間的關(guān)系;分析血糖控制情況與球結(jié)膜微血流改變之間的關(guān)系;分析球結(jié)膜微血流、微血管改變與糖尿病視網(wǎng)膜病變之間的關(guān)系。
5、 結(jié)果:裂隙燈下觀察糖尿病球結(jié)膜微血管多見(jiàn)血管瘤囊樣擴(kuò)張,血管寬窄不一及血柱不均等現(xiàn)象。
在激光共聚焦顯微鏡下觀察,結(jié)膜上皮細(xì)胞可被分成淺表層細(xì)胞、中間層細(xì)胞及基底層細(xì)胞。淺表層細(xì)胞體積較大,排列松散,細(xì)胞核低反光。中間層細(xì)胞多呈卵圓形,邊界不清,體積較小,排列緊密,細(xì)胞核呈點(diǎn)狀高反光?;讓蛹?xì)胞呈多邊形,排列規(guī)整,邊界清晰,偶見(jiàn)高反光細(xì)胞核。
結(jié)膜淺表細(xì)胞層:糖尿病組平均細(xì)胞密度為1522±193個(gè)/mm
6、2,對(duì)照組為1897±160個(gè)/mm,P=0.000<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,糖尿病組結(jié)膜淺表細(xì)胞層數(shù)量減少。
中間細(xì)胞層:糖尿病組平均細(xì)胞密度為3097±284個(gè)/mm2,對(duì)照組為2957±199個(gè)/mm2,P=0.057>0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
基底層細(xì)胞:糖尿病組平均細(xì)胞密度為4423±214個(gè)/mm2,對(duì)照組為4415±220個(gè)/mm2,P=0.900>0.05,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
7、 結(jié)膜杯狀細(xì)胞胞體較大,呈圓形或類(lèi)圓形,反光較強(qiáng),胞體內(nèi)可見(jiàn)透亮顆粒,成團(tuán)或散在分布于球結(jié)膜淺表層至基底層之間。糖尿病組細(xì)胞的平均密度為372±51個(gè)/mm2,對(duì)照組424±24個(gè)/mm2,P=0.000<0.05,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。糖尿病組球結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度下降,并且與糖尿病病程負(fù)相關(guān)。
糖尿病球結(jié)膜微血流流速改變:以線流、線粒、粒流、粒緩流、粒擺流及停止作為流速半定量記錄,以粒流和粒流以下速度為異常糖尿病組異常16
8、例29眼(82.85%),;對(duì)照組異常2例4眼(20.00%)。P=0.000<0.05差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。糖尿病組球結(jié)膜微血管多見(jiàn)粒流、粒緩流、粒擺流以及停止為主的異常血流。
糖尿病組球結(jié)膜上皮淺層細(xì)胞密度與球結(jié)膜微血流改變之間的關(guān)系:糖尿病組球結(jié)膜微血流正常3例6眼,球結(jié)膜上皮淺層細(xì)胞密度1579±249個(gè)/mm2;球結(jié)膜微血流異常16例29眼,球結(jié)膜上皮淺層細(xì)胞密度1511±182個(gè)/mm2。P=0.441>0.05,
9、兩組之間差距無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。糖尿病球結(jié)膜淺層上皮細(xì)胞密度改變與球結(jié)膜微血流改變無(wú)相關(guān)性。
糖尿病組球結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度與球結(jié)膜微血流改變之間的關(guān)系:糖尿病組球結(jié)膜微血流正常4例7眼,球結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度327±42個(gè)/mm2;球結(jié)膜微血流異常16例28眼,球結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度332±52個(gè)/mm2。P=0.846>0.05,兩組之間差距無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。糖尿病球結(jié)膜杯狀細(xì)胞密度改變與球結(jié)膜微血流改變無(wú)相關(guān)性。
糖尿病球結(jié)
10、膜微血管形態(tài)改變:按血管管腔分為均勻及寬窄不一,后者為異常。糖尿病組中異常15例23眼(65.71%),對(duì)照組異常2例2眼(10.00%)。P=0.000<0.05兩者之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,糖尿病組較對(duì)照組血管管腔多見(jiàn)寬窄不一。同時(shí)糖尿病組中微血管多見(jiàn)血管管腔閉塞。
微血流與微血管改變之間的關(guān)系:糖尿病組微血管正常微血流異常5例6眼(41.67%);微血管異常微血流異常15例23眼(100.00%)。P=0.001<0.0
11、5,兩組間具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。糖尿病組中球結(jié)膜微血管正常時(shí)已有部分忠眼微血流出現(xiàn)異常改變。球結(jié)膜微血管異常組較微血管正常組多見(jiàn)異常微血流,且糖尿病球結(jié)膜微血管異常時(shí)其微血流異常率為100%。
血糖控制良好組(糖化血紅蛋白<6.2%)微血流異常l例l眼(20.00%),;一般組(6.2~8.%)微血流異常6例Ⅱ眼(100.00%);不良組(>8.0%)微血流異常9例17眼(89.47%)。血糖控制良好組與一般組比較,根據(jù)fish
12、er精確概率P=0.003<0.05,兩組之間差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;血糖控制一般組與不良組比較根據(jù)fisher精確概率P=0.520>0.05,兩組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。血糖控制一般組及不良組多以粒流及粒流以下異常微血流為主。
糖尿病組中無(wú)糖尿病視網(wǎng)膜病變組異常微血流5例5眼(62.5%);有糖尿病視網(wǎng)膜病變組異常微血流15例24眼(88.89%),P=0.082>0.05,兩組之間無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。無(wú)糖尿病視網(wǎng)膜病變時(shí)已有球結(jié)膜
13、微血流改變,球結(jié)膜微血流改變?cè)缬谔悄虿∫暰W(wǎng)膜病變。
糖尿病球結(jié)膜微血管改變與糖尿病視網(wǎng)膜病變之間的關(guān)系:糖尿病組無(wú)糖尿病視網(wǎng)膜病變球結(jié)膜微血管異常0眼(0.00%);有糖尿病視網(wǎng)膜病變球結(jié)膜微血管異常15例23眼(85.18%)。根據(jù)fisher精確檢驗(yàn)P=0.00<0.05,兩組之間差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,當(dāng)出現(xiàn)糖尿病視網(wǎng)膜病變球結(jié)膜微血管多為異常。
糖尿病視網(wǎng)膜病變不同分期:非增殖期,增值前期和增殖期與球結(jié)膜
14、微血流改變之間的關(guān)系:非增殖期粒流及以下異常球結(jié)膜微血流8例9眼(90.00%);增殖前期異常7例7眼(77.77%);增殖期異常6例8眼(100.00%)。P=0.343>0.05。各組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,因此球結(jié)膜微血流異常在糖尿病視網(wǎng)膜病變各分期間無(wú)明顯差異。
糖尿病視網(wǎng)膜病變不同分期與球結(jié)膜微血管改變之間的關(guān)系:非增殖期微血管異常8例8眼(80.00%);增殖前期微血管異常7例7眼(77.77%);增殖期微血管異
15、常6例8眼(100.00%)。P=0.369>0.05。各組之間差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。因此球結(jié)膜微血管異常在糖尿病視網(wǎng)膜病變各分期間無(wú)明顯差異。
結(jié)論:糖尿病患者球結(jié)膜淺表層上皮細(xì)胞及杯狀細(xì)胞密度降低,其改變與球結(jié)膜微循環(huán)異常無(wú)相關(guān)性。糖尿病患者球結(jié)膜微血流及微血管多見(jiàn)異常改變,其改變?cè)缬谔悄虿∫暰W(wǎng)膜病變。當(dāng)球結(jié)膜微血管出現(xiàn)異常改變,多伴有糖尿病視網(wǎng)膜病變發(fā)生?;铙w激光共聚焦顯微鏡是研究Ⅱ型糖尿病球結(jié)膜改變的有效工具,了解糖尿
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