內(nèi)皮素和一氧化氮在膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎半月板中的表達(dá)和意義.pdf

1、目的：半月板在膝關(guān)節(jié)中起著吸收震蕩、傳遞負(fù)荷、潤(rùn)滑關(guān)節(jié)等重要作用，膝關(guān)節(jié)骨關(guān)節(jié)炎發(fā)生率逐年增加，其發(fā)病機(jī)理還不是很清楚。本論文通過對(duì)半月板組織中的內(nèi)皮素(endothelin，ET)和一氧化氮(nitricoxide，NO)的免疫組化研究，觀察軟骨細(xì)胞產(chǎn)生內(nèi)皮素和一氧化氮情況，探討膝關(guān)節(jié)退變過程中半月板軟骨細(xì)胞發(fā)病機(jī)理和病理學(xué)改變。 方法：選取天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院、天津醫(yī)院、天津?qū)氎驷t(yī)院膝關(guān)節(jié)退行性骨關(guān)節(jié)炎、膝關(guān)節(jié)損傷、和毀損傷后

2、截肢患者的半月板組織，共計(jì)30例。半月板取材分：關(guān)節(jié)鏡手術(shù)、全膝關(guān)節(jié)置換手術(shù)及截肢后膝關(guān)節(jié)的半月板。分組標(biāo)準(zhǔn)：(1)正常組：年齡在30歲以下，無高血壓、糖尿病、肺心病等疾病，并征得家屬和患者本人同意。取下的半月板完整、無撕裂，表面光滑，顏色清亮，5例；(2)膝關(guān)節(jié)損傷組：年齡在30歲以下，膝關(guān)節(jié)有外傷史，關(guān)節(jié)疼痛，活動(dòng)受限，病史在3～6個(gè)月，X線表現(xiàn)關(guān)節(jié)間隙良好，無骨贅形成，15例；(3)骨性關(guān)節(jié)炎組：年齡60歲以上，關(guān)節(jié)疼痛病史在2年

3、以上，行走困難，X線表現(xiàn)膝關(guān)節(jié)間隙狹窄，有骨贅形成，術(shù)中見半月板顏色發(fā)黃，不同程度向外脫位，10例。半月板組織手術(shù)切下后盡快放入中性福爾馬林液中固定48小時(shí)，取出后用自來水沖洗干凈，放入80％酒精中于4℃保存?zhèn)溆?。正常組和骨性關(guān)節(jié)炎組取下的半月板分邊緣組織和半月板中心組織兩部分，損傷組手術(shù)取下的半月板都是邊緣組織。石蠟包埋后行HE染色和免疫組織化學(xué)染色觀察，結(jié)果在電子顯微鏡視野下進(jìn)行陽(yáng)性軟骨細(xì)胞計(jì)數(shù)，算出陽(yáng)性細(xì)胞占視野內(nèi)細(xì)胞總數(shù)的百分?jǐn)?shù)

4、，用F檢驗(yàn)和t檢驗(yàn)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)方法檢驗(yàn)。 結(jié)果：1.HE染色發(fā)現(xiàn)正常組軟骨細(xì)胞排列整齊，胞體飽滿，膠原組織豐富；損傷組中軟骨細(xì)胞減少，排列較亂，膠原減少；骨關(guān)節(jié)炎組的軟骨細(xì)胞胞體變小、凋亡、壞死、鈣化、有血管浸入，膠原組織稀疏。2.各組的免疫組織化學(xué)染色切片在電子顯微鏡下觀察5個(gè)高倍視野，計(jì)數(shù)軟骨細(xì)胞的陽(yáng)性細(xì)胞百分?jǐn)?shù)。三個(gè)組的邊緣組織ET和NO含量經(jīng)方差分析F檢驗(yàn)，三組之間有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05)，組間比較經(jīng)SNK-q檢驗(yàn)，骨關(guān)

5、節(jié)炎組ET和NO含量明顯高于正常組和損傷組(P＜0.01)，而正常組和損傷組沒有顯著性差異(P＞0.05)。骨關(guān)節(jié)炎組和正常組的中心區(qū)和邊緣區(qū)ET和NO經(jīng)t檢驗(yàn)，結(jié)果骨關(guān)節(jié)炎組中心區(qū)ET和NO含量明顯高于邊緣區(qū)(P＜0.05)。正常組的中心區(qū)與邊緣區(qū)比較沒有顯著差異(P＞0.05)。骨關(guān)節(jié)炎組中心區(qū)與正常組中心區(qū)比較采用t檢驗(yàn)，結(jié)果骨關(guān)節(jié)炎組的中心區(qū)的ET和NO的含量明顯高于正常組的中心區(qū)(P＜0.01)。 結(jié)論：1骨性關(guān)節(jié)炎的

6、半月板組織的軟骨細(xì)胞數(shù)量減少，局部有血管侵入，鈣化、大面積壞死，膠原組織稀少，由于長(zhǎng)期受到應(yīng)力破壞，表面欠光滑、顏色暗淡，有時(shí)伴有向外側(cè)突出。2NO在骨性關(guān)節(jié)炎半月板組織中有高表達(dá)，NO在軟骨細(xì)胞的核、胞漿及胞膜中均有表達(dá)，而且在半月板的基質(zhì)中也有表達(dá)。明顯高于正常組。3ET在膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎的半月板中明顯表達(dá)，考慮ET嚴(yán)重影響了半月板組織的血運(yùn)、促進(jìn)了軟骨細(xì)胞凋亡。4本實(shí)驗(yàn)為將來封閉NO和ET的表達(dá)來治療膝關(guān)節(jié)骨性關(guān)節(jié)炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。