低氧預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷保護(hù)機(jī)制的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、背景和目的：腦血管病是嚴(yán)重危害人類生命健康、致死率及致殘率高的主要疾病,其中缺血性腦血管病約占70％左右。近年來(lái),隨著缺血性腦血管病發(fā)病機(jī)制研究的日益深入,其治療方面已有了長(zhǎng)足的進(jìn)步,但是仍有很多機(jī)制尚不清楚,并缺乏有效的治療及預(yù)防手段。對(duì)發(fā)病機(jī)制的研究及如何啟動(dòng)內(nèi)源性保護(hù)機(jī)制以及尋找有效的防治手段仍然是該領(lǐng)域研究的重點(diǎn)。研究發(fā)現(xiàn),預(yù)先給予短暫的、亞致死量的缺氧(低氧預(yù)處理,Hypoxia preconditioning)可減輕其后發(fā)生

2、的嚴(yán)重缺血所造成的組織損傷,即缺血耐受現(xiàn)象。缺血耐受研究的主要途徑是選擇不同種屬動(dòng)物通過(guò)不同手段建立腦缺血耐受模型。由于大鼠腦血管與人腦相似,均由頸動(dòng)脈在腦底吻合成動(dòng)脈環(huán),再通過(guò)其分支共同完成腦供血。因此,國(guó)內(nèi)外很多學(xué)者采用不同方法制備了大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞(middle cerebral artery occlusion.MCAO)模型,而頸內(nèi)動(dòng)脈線栓法制備的腦梗塞動(dòng)物模型,由于其局部條件可以控制,可模擬臨床腦中風(fēng)病人的各種癥狀,成為研

3、究腦缺血損傷的病理機(jī)制和藥理學(xué)實(shí)驗(yàn)極為有價(jià)值的工具。本實(shí)驗(yàn)參照Z(yǔ)ea Longa腔內(nèi)線拴法,結(jié)合臨床實(shí)際,在以往線栓法基礎(chǔ)上加以改進(jìn),制備了MCAO模型。同時(shí)在MCAO模型前48h進(jìn)行不同時(shí)間的缺氧預(yù)處理,采用神經(jīng)病學(xué)評(píng)分、TTC染色測(cè)定梗死范圍、HE染色觀察病理變化,腦水腫程度和腦梗塞體積的測(cè)定,缺氧誘導(dǎo)因子-1α表達(dá)檢測(cè)等對(duì)低氧預(yù)處理對(duì)大鼠局灶性腦缺血損傷保護(hù)機(jī)制,進(jìn)行探討。
　　方法：1、動(dòng)物分組:選擇成年SD大鼠130只,

4、分為假手術(shù)組10只,缺血再灌注組60只,低氧預(yù)處理+缺血再灌注組60只。2、低氧預(yù)處理+缺血再灌注組動(dòng)物按照Vannucci.R.C等的方法進(jìn)行低氧預(yù)處理動(dòng)物模型制作。3、缺血再灌注組和低氧預(yù)處理+缺血再灌注組動(dòng)物參照Z(yǔ)ea longa的方法制作MCAO動(dòng)物模型。假手術(shù)組只進(jìn)行手術(shù)操作不進(jìn)行缺血和再灌注。4、對(duì)各組動(dòng)物在相應(yīng)的時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行神經(jīng)功能評(píng)分、腦梗塞體積測(cè)定、腦組織含水量測(cè)定、HIF-1α免疫組織化學(xué)檢測(cè)及圖象分析和病理學(xué)組織觀察

5、。
　　結(jié)果：1、低氧預(yù)處理組與缺血再灌注組比較,神經(jīng)功能障礙減輕。缺血側(cè)低氧預(yù)處理組腦組織含水量較缺血再灌注組明顯降低。在24h和48h兩個(gè)時(shí)間點(diǎn),缺血側(cè)低氧預(yù)處理組腦梗死體積較缺血再灌注組明顯減少。2、HIF-1α蛋白表達(dá)檢測(cè)表明,缺氧預(yù)處理組在缺血再灌注后2h即高于同期缺血再灌注組,48h仍維持在較高水平,在同一時(shí)間點(diǎn)與缺血再灌注組比較均有顯著性差異。
　　結(jié)論：1、缺氧預(yù)處理可以誘導(dǎo)腦對(duì)短暫性局灶性缺血產(chǎn)生耐受性,改