功能矯形前伸大鼠下頜后髁突軟骨的改建及VEGF表達變化的研究.pdf

1、顳下頜關節(jié)功能的變化與髁突軟骨局部受力密切相關，而髁突軟骨受力的變化又可以引起局部軟骨發(fā)生改建；本研究以大鼠為實驗對象，建立了前伸大鼠下頜動物模型，采用組織學染色、免疫組織化學等方法，觀察大鼠髁突軟骨在下頜前伸不同時間點內(nèi)的組織形態(tài)改變，以及血管內(nèi)皮細胞生長因子（VEGF）及其受體（Flt-1、Flk-1）在此過程中的表達情況，以期就顳下頜關節(jié)髁突軟骨對下頜位置改變進行的適應性改建活動進行系統(tǒng)研究。 選用5 周齡SD 雄性大鼠5

2、0 只，根據(jù)實驗周期（3、7、14、21 和30 天）分為5 組，每組內(nèi)隨機分為實驗組和對照組。 實驗方法：實驗組：利用粘結材料（磷酸鋅水門?。⑿泵鎸О逭彻逃诖笫笊锨醒?，通過固位鉤將鏈狀橡皮圈經(jīng)鼻上頜復合體與防護頸圈連接，使得斜面導板獲得穩(wěn)定的固位，防護頸圈能夠有效地防止大鼠前爪對裝置的破壞及對面部組織的傷害，每天持續(xù)佩戴24h；對照組：不做任何實驗操作。所有動物都以軟食飼養(yǎng)，自由飲水，同環(huán)境下飼養(yǎng)至實驗結束。實驗后3、7、1

3、4、21和30天分別取材，常規(guī)固定，脫鈣，脫水，包埋。石蠟切片進行常規(guī)HE染色，測量髁突軟骨的厚度；免疫組化方法檢測VEGF及其受體Flt-1、Flk-1的表達。 實驗結果：對照組：對照組雙側髁突軟骨厚度無差異，后份最厚，前份最薄，隨著觀測時間的延長，髁突軟骨呈現(xiàn)增齡性變化，表現(xiàn)為軟骨厚度變薄，其中軟骨中部和后部變化更為顯著，纖維層和增殖層變化不明顯，而肥大層隨時間減少變薄顯著；VEGF 在軟骨成熟層和肥大層均有表達，表現(xiàn)為胞漿

4、和胞膜著色，肥大層表達更為強烈，隨著觀測時間點的延長其表達下降；Flt-1和Flk-1 主要分布于軟骨成熟層和肥大層，表現(xiàn)為胞漿和胞膜著色，表達隨時間點的延長而減弱；軟骨后部VEGF 及其受體表達要強于中部和前部。實驗組：中部和后部軟骨厚度較同時間點的對照組明顯增加（P<0.05），后部更為明顯，前部軟骨厚度變化不顯著（P＞0.05），軟骨中部和后部纖維層厚度變化不顯著，增殖層細胞層數(shù)增多，成熟層厚度增加細胞層數(shù)增多，肥大層厚度增加細胞

5、體積變大，胞外基質(zhì)增多；實驗組VEGF 表達強于各自對照組（P<0.05），實驗后14、21、30 天組較為明顯，其中后部軟骨14 天時表達的增強幅度最大；Flt-1、Flk-1 表達較相應對照組增強（P<0.05），F(xiàn)lt-1 在21 天和30 天組較為明顯（P<0.05），F(xiàn)lk-1在14 天，21 天和30 天組增強明顯（P<0.05），其中Flk-1 在21天時后部軟骨表達的增強幅度最大。 結論： （1）前伸大鼠