功能矯形后退大鼠下頜后髁突軟骨改建的分子機制.pdf

1、臨床已廣泛開展青少年Ⅲ類錯(牙合)的矯治，在生長發(fā)育高峰期通過施加使下頜骨后退的矯形力是治療早期Ⅲ類骨性或功能性錯(牙合)的常用方法。通過矯形力刺激髁突軟骨的改建，以達到骨形態(tài)和位置的調(diào)整。但目前功能矯形后髁突軟骨的改建，并進而改變下頜骨生長的分子調(diào)控機制尚不明確。 本研究首先觀察功能性矯治器引導大鼠下頜骨后退后，大鼠顳下頜關節(jié)結構及下頜骨的形態(tài)變化和組織學變化。然后采用免疫組化和圖像分析技術檢測TGF-β1、TGF-βR1、I

2、GF-1在下頜髁突軟骨中的表達和分布，以及功能矯形后退下頜后，在下頜髁突中表達的變化，以期闡明功能矯形引導下頜后退，髁突軟骨改建的分子機制，為功能矯形下頜后退的機制研究提供實驗依據(jù)。 研究方法1.實驗動物模型制備雄性SD大鼠40只，隨機分為實驗組和對照組。實驗組全天配戴自制模擬臨床的功能矯治器，對照組不戴矯治器，分別在實驗后3d、1w、2w、3w各處死5只，取雙側髁突，固定、脫鈣、包埋，經(jīng)髁突中央作矢狀切片，常規(guī)HE染色。

3、 2.免疫組織化學染色采用SABC法，按常規(guī)方法操作。一抗為兔抗TGF-β1、兔抗TGF-βR1、兔抗IGF-1多克隆抗體，DAB顯色。 3.圖像分析采用德國LeicaRX250型圖像分析系統(tǒng)，對髁突軟骨各層的免疫組化陽性染色進行定量分析。測量視野中TGF-β1、TGF-βR1、IGF-1陽性染色的相對面積(即陽性細胞面積/鏡下細胞及間質(zhì)總面積×100﹪)和陽性染色積分灰度值。 4.統(tǒng)計學分析采用Epicalc2000

4、1.02統(tǒng)計學軟件包，用t檢驗對實驗組和對照組間的各項指標進行比較分析。 研究結果1.形態(tài)學觀察根據(jù)磨牙關系可見實驗組大鼠下頜后退1-2mm。鏡下見關節(jié)后間隙變窄，前間隙增寬，髁突軟骨厚度增加，以生發(fā)層和過渡層厚度增加明顯，成熟層稍增厚，移行層變薄。細胞數(shù)增多，細胞體積增大，核肥大深染，細胞間質(zhì)減少。 2.免疫組化染色實驗組、對照組大鼠髁突各層軟骨細胞均有TGF-β1、TGF-βR1和IGF-1的陽性表達，陽性染色定位于

5、胞漿和胞核。在髁突各層細胞中，成熟層TGF-β1和TGF-βR1強陽性，生發(fā)層和過渡層IGF-1強陽性。實驗組髁突軟骨細胞各層TGF-β1、TGF-βR1和IGF-1的陽性表達程度均明顯高于對照組。 3.圖像分析結果實驗組大鼠髁突軟骨細胞各層TGF-β1、TGF-βR1和IGF-1陽性染色的相對面積和積分灰度值均高于對照組，除個別數(shù)據(jù)外，其差異均有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。 結論1.建立了運用功能矯治器使大鼠下頜后退的