miR-10b、RHOC及相關(guān)基因在肝細胞癌中與轉(zhuǎn)移浸潤相關(guān)的病理學(xué)研究.pdf

1、目的:分析肝細胞癌中miR-10b、RHOC及相關(guān)基因的表達，探討這些基因參與肝細胞癌惡性生物學(xué)行為，及miR-10b可能參與調(diào)控RHOC轉(zhuǎn)移浸潤的機制。
　　 材料和方法:選取2000年1月至2005年12月在我院行手術(shù)切除的肝細胞癌病例，共375例，獲得隨訪信息185例。分析本組病例臨床病理特征及與預(yù)后的關(guān)系。留取2007～2008年間手術(shù)切除的新鮮肝細胞癌及癌旁肝組織標本19例，Western blot檢測RHOC蛋白的表

2、達，免疫組化檢測cyclin D1、P21WAF1的表達，分析其相關(guān)性及與臨床病理特征的關(guān)系；選取有隨訪資料的病例80例，免疫組化檢測cyclin D1、P21WAF1、p53、ki-67及GPC3在肝細胞癌中的表達，分析各基因表達與臨床病理特征的關(guān)系及各基因表達之間的相關(guān)性；Kaplan-Meier生存分析分析各基因表達的預(yù)后意義；COX風(fēng)險模型分析各臨床病理特征及基因表達的預(yù)后意義。提取新鮮肝細胞癌及癌旁肝組織中的RNA，實時定量P

3、CR法檢測miR-10b和RHOC mRNA基因的表達，分析二者相關(guān)性及與臨床病理特征的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.本組資料顯示肝細胞癌發(fā)病年齡19～72歲，平均50.57±10.46歲，發(fā)病高峰年齡40～60歲，男女比例為10.7：1；HBsAg(+)87.4％，anti—HCV抗體(+)4.3％；術(shù)后3年生存率為52％，5年生存率為38％；腫瘤數(shù)目(p=0.000)、腫瘤大小(p=0.025)、組織學(xué)結(jié)構(gòu)類型(p

4、=0.000)、核分級(p=0.000)、分化程度(p=0.001)及血管浸潤均(p=0.000)與預(yù)后明顯相關(guān)；其中組織學(xué)結(jié)構(gòu)類型中細梁狀型生存時間與致密梁狀型和腺樣型無明顯區(qū)別(p>0.05)而明顯高于粗梁狀型、實性型和硬化型(p≤0.009)，硬化型生存時間與實性型之間無明顯區(qū)(p>0.05)而明顯低于其余各型(p≤0.006)；核分級1級與2級生存時間無明顯區(qū)別(p>0.05)，核分級3級與4級生存時間無明顯區(qū)別(p>0.05)

5、，而核分級3級生存時間明顯低于2(p=0.000)：小細胞型、巨細胞型和梭形細胞型主要由實性型和粗梁狀型組織學(xué)結(jié)構(gòu)類型構(gòu)成，明顯不同于透明細胞型(主要由細梁狀型和粗梁狀型構(gòu)成)(p≤0.006)。
　　 2.Western blot顯示9/19例肝細胞癌中RHOC蛋白高表達，與血管浸潤明顯相關(guān)(p=0.020)。RHOC陽性表達與cyclin D1陽性表達明顯正相關(guān)(P=0.010)；cyclin D1陽性表達與高核分級明顯相關(guān)

6、(p=0.041)；p21WAF1及p53陽性表達均與分化程度(分別為p=0.032，p=0.031)和血管浸潤(p=0.036，p=0.011)正相關(guān)；ki67陽性表達與分化程度(p=0.004)、核分級(p=0.045)和血管浸潤(p=0.001)正相關(guān)；GPC3表達與腫瘤數(shù)目(p=0.038)和分化程度(p=0.013)正相關(guān)。生存分析顯示cyclin D1及ki67有明顯預(yù)后意義。ki67陽性表達與p53(p=0.000)及p2

7、1WAF1(p=0.047)陽性表達有明顯相關(guān)性，其他各基因之間表達無明顯關(guān)系。
　　 3.COX回歸模型分析顯示腫瘤大小(p=0.042)、腫瘤數(shù)目(p=0.004)及血管浸潤(p=.000)為獨立預(yù)后因素。
　　 4.與癌旁肝組織相比，miR-10b在肝細胞癌中的平均表達增高(p=0.049)，但miR-10b低表達組血管浸潤明顯高于高表達組(P=0.020)；與癌旁肝組織相比，RHOC mRNA在癌組織中的表達增高

8、(P=0.032)，同時RHOCmRNA高表達組血管浸潤明顯高于低表達組(P=0.041)。miR-10b和RHOc mRNA的表達未發(fā)現(xiàn)有明顯相關(guān)性。
　　 結(jié)論
　　 1.除腫瘤大小、腫瘤數(shù)量、分化程度、血管浸潤以外，肝細胞癌組織學(xué)結(jié)構(gòu)類型和核分級均有明顯預(yù)后意義。
　　 2.miR-10b、RHOC、cyclin D1、ki67及GPC3均參了與肝細胞癌的生物學(xué)進程；RHOC可能參與了細胞周期調(diào)控。cycl