
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1、采用二甲基聯(lián)苯胺(DAB)染色的組織化學(xué)和CeCl<,3>染色的細(xì)胞化學(xué)方法,研究水分脅迫和外源ABA處理可誘導(dǎo)玉米(Zea mays L.)細(xì)胞在質(zhì)外體產(chǎn)生H<,2>O<,2>的機(jī)理。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示,利用NADPt{氧化酶、過(guò)氧化物酶(POD)及多胺氧化酶(PAO)的抑制劑預(yù)處理都可以降低水分脅迫和外源ABA誘導(dǎo)的質(zhì)外體H<,2>O<,2>的產(chǎn)生,表明這三種酶是誘導(dǎo)質(zhì)外體產(chǎn)生H<,2>O<,2>的來(lái)源。相比較而言,用NADPH氧化酶抑制
2、劑預(yù)處理后,抑制H<,2>O<,2>產(chǎn)生的效果最為明顯,而POD及PAO的抑制劑預(yù)處理后效果則較弱,表明NADPH氧化酶是水分脅迫和外源ABA誘導(dǎo)下質(zhì)外體H<,2>O<,2>產(chǎn)生的主要來(lái)源。進(jìn)一步研究了水分脅迫和外源ABA處理下質(zhì)膜NADPH氧化酶、細(xì)胞壁POD和質(zhì)外體PAO的活性,發(fā)現(xiàn)處理后它們的活性均有增加。以上結(jié)果表明,水分脅迫和外源ABA通過(guò)誘導(dǎo)質(zhì)膜NADPH氧化酶、細(xì)胞壁POD及質(zhì)外體PAO活性的升高,進(jìn)而在質(zhì)外體產(chǎn)生H<,2
3、>O<,2>,其中質(zhì)膜NADPH氧化酶可能起主要作用。 用PEG6000模擬水分脅迫的研究結(jié)果表明,水分脅迫能夠誘導(dǎo)玉米葉片內(nèi)源ABA的積累。通過(guò)運(yùn)用ABA合成抑制劑鎢酸鹽(Tu)預(yù)處理以及組織化學(xué)和電鏡觀察結(jié)果表明,ABA參與了水分脅迫誘導(dǎo)玉米葉片H<,2>O<,2>的產(chǎn)生;而酶活性分析顯示,內(nèi)源ABA的積累也能夠誘導(dǎo)質(zhì)膜NADPH氧化酶、細(xì)胞壁POD和質(zhì)外體PAO的活性。這些數(shù)據(jù)暗示,水分脅迫誘導(dǎo)玉米細(xì)胞質(zhì)外體H<,2>O<
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