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1、目的:探討L—肌肽對H2O2誘導(dǎo)PC12細胞(大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞)凋亡的保護作用的機制。 方法:我們在H2O2誘導(dǎo)PC12細胞凋亡模型的基礎(chǔ)上,加入肌肽作用于細胞,采用MTT比色法檢測肌肽對PC12細胞的增殖抑制作用;通過倒置相差顯微鏡觀察細胞形態(tài)的變化;RT—PCR法檢測凋亡相關(guān)基因Caspase—3和NF—κ BP65 mRNA的表達變化;免疫組化SABC法檢測凋亡相關(guān)蛋白Caspase—3和NF—κ BP65的表達,
2、流式細胞儀(FCM)檢測細胞凋亡。 結(jié)果:不同濃度的肌肽對H2O2損傷的PC12細胞的存活率有顯著的提高作用,20mmol/L濃度時達最大值(P<0.05)。20mmol/L的肌肽作用于PC12細胞可降低其Caspasc—3和NF—κ BP65的mRNA表達,降低Caspase—3和NF—κ BP65蛋白的表達,流式細胞儀檢測顯示肌肽可抑制細胞的早期和晚期凋亡率。 結(jié)論: 1.肌肽可以降低由H2O2導(dǎo)致的PC12
3、細胞的體外生長和增殖的抑制率,即肌肽能夠保護PC12細胞免受氧化應(yīng)激的損傷。 2.肌肽可以降低由H2O2誘導(dǎo)的PC12細胞Caspase—3和NF—κ BP65基因的mRNA和蛋白的表達,在轉(zhuǎn)錄和翻譯水平均得到證實。說明肌肽可以抑制由H2O2誘導(dǎo)的PC12細胞的凋亡。 3.肌肽可以抑制由H2O2誘導(dǎo)的PC12細胞的早期凋亡和晚期凋亡,其機制可能是通過抑制NF-K BP65基因的表達,從而抑制Caspase-3的表達,以達
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