茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂對(duì)湖羊甲烷生成的影響及其作用機(jī)制.pdf

1、甲烷是瘤胃微生物發(fā)酵過(guò)程中產(chǎn)生的正常代謝產(chǎn)物，其排放不僅加劇了溫室效應(yīng)，而且降低了飼料利用率，因此反芻動(dòng)物甲烷調(diào)控備受關(guān)注。本試驗(yàn)研究低劑量的茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂單獨(dú)或聯(lián)合添加對(duì)生長(zhǎng)初期湖羊甲烷生成和飼料消化率的影響，并利用生長(zhǎng)末期的瘺管湖羊從瘤胃發(fā)酵、瘤胃微生物菌群變化和瘤胃代謝物角度探討茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂單獨(dú)或聯(lián)合添加影響反芻動(dòng)物甲烷生成的可能機(jī)制。
　　試驗(yàn)一茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂對(duì)生長(zhǎng)初期湖羊瘤胃甲烷生成及消化功能的

2、影響
　　選擇健康的3月齡體況相近的湖羊30只，隨機(jī)分為四組:對(duì)照組(C)、茶皂素組(T)、茶皂素和硝酸鈣組(TN)、茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂組(TNS)（對(duì)照組為6只，三個(gè)處理組各8只）。茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂的添加量分別為0.5g/L、5mM和5mM。對(duì)照組和茶皂素組額外添加尿素以保證各處理組間曰糧氮一致?？刂瞥毖蚓虾脱虿莶墒沉?。整個(gè)試驗(yàn)期6周，其中預(yù)試期2周。正試期第三周時(shí)，連續(xù)一周記錄采食量、收集全部糞便，用于干物質(zhì)消化率

3、的測(cè)定。試驗(yàn)期最后兩天用呼吸代謝籠測(cè)定甲烷。正式試驗(yàn)開(kāi)始前和試驗(yàn)結(jié)束后連續(xù)兩天稱湖羊體重。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，與對(duì)照組相比，添加T、TN和TNS對(duì)湖羊的干物質(zhì)采食量(P＞0.05)、相對(duì)增重（P＞0.05）、干物質(zhì)消化率（P＞0.05）、粗蛋白降解率（P＞0.05）、中性洗滌纖維消化率(P＞0.05)和酸性洗滌纖維消化率(P＞0.05)均沒(méi)有影響;顯著降低生長(zhǎng)初期湖羊甲烷的生成量(P＜0.01)，每千克干物質(zhì)采食量所產(chǎn)生的甲烷量分別降低了46.5

4、％、53.5％、48.4％。
　　試驗(yàn)二茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂對(duì)生長(zhǎng)末期湖羊瘤胃甲烷生成的影響及其作用機(jī)制
　　一荼皂素、硝酸鈣和硫酸鎂對(duì)生長(zhǎng)末期湖羊瘤胃甲烷生成及消化功能的影響
　　選用6頭12月齡體況相近的瘺管湖羊，開(kāi)展重復(fù)取樣試驗(yàn)，研究茶皂素單獨(dú)添加、茶皂素與硝酸鈣或茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂聯(lián)合添加對(duì)生長(zhǎng)末期瘤胃甲烷生成和干物質(zhì)消化率的影響。試驗(yàn)以基礎(chǔ)曰糧為對(duì)照組(C)，設(shè)T、TN、TNS三個(gè)處理組，分別在基礎(chǔ)日糧

5、的基礎(chǔ)上添加0.5g/L茶皂素三周(T)后添加5mM硝酸鈣三周(TN)，再補(bǔ)以5mM硫酸鎂三周(TNS)。每周都用呼吸代謝籠進(jìn)行甲烷的測(cè)定。每個(gè)處理組第三周時(shí)連續(xù)一個(gè)星期記錄采食量、收集全部糞便，用于干物質(zhì)消化率的測(cè)定。每個(gè)處理開(kāi)始和結(jié)束時(shí)取晨飼前湖羊瘤胃液用于瘤胃發(fā)酵及微生物評(píng)定。試驗(yàn)結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，添加T、TN和TNS對(duì)湖羊干物質(zhì)采食量（P＞0.05）、相對(duì)增重（P＞0.05）、干物質(zhì)消化率(P＞0.05)、中性洗滌纖維消化

6、率（P＞0.05）和酸性洗滌纖維消化率（P＞0.05）均沒(méi)有影響，但抑制粗蛋白的降解（P＜0.01）。各組內(nèi)的處理時(shí)間對(duì)甲烷生成沒(méi)有影響，與對(duì)照組相比，每周測(cè)定的甲烷生成量，T組分別降低了5.5％、2.8％、5.0％，TN組分別降低了12.7％、16.0％、12.7％，TNS組降低了6.6％、11.0％、6.6％，添加TN抑制湖羊甲烷生成的效果最佳。
　　二茶皂素、硝酸鈣和硫酸鎂對(duì)生長(zhǎng)末期瘤胃發(fā)酵、瘤胃微生物數(shù)量和瘤胃代謝途徑的影

7、響
　　飼養(yǎng)試驗(yàn)中采取的瘤胃液樣品用于瘤胃發(fā)酵和瘤胃微生物數(shù)量的分析。結(jié)果顯示，與對(duì)照組相比，添加T不影響瘤胃pH，TN顯著升高瘤胃pH，TNS顯著降低瘤胃pH，但各組瘤胃pH均處于正常范圍內(nèi);T組和TN組的NH3-N濃度分別降低了25.3％和23.8％，TNS組的NH3-N濃度沒(méi)有顯著影響，但均達(dá)到滿足瘤胃微生物蛋白合成所需的濃度(＞8.5mg/dL);添加T和TN不影響瘤胃的總揮發(fā)性脂肪酸(TVFA)，而TNS組的TVFA降低

8、了13.3％;添加T、TN或TNS不影響瘤胃乙酸的濃度（P＞0.05）;T組和TN組的丙酸濃度沒(méi)有明顯變化，TNS組的丙酸濃度顯著下降(P＜0.01);添加T和TNS均顯著抑制丁酸的濃度（P＜0.01），TN對(duì)丁酸沒(méi)有影響。
　　采用實(shí)時(shí)定量熒光PCR測(cè)定瘤胃內(nèi)總菌、原蟲(chóng)、甲烷菌、真菌和纖維分解細(xì)菌的數(shù)量。結(jié)果顯示，T組和TN組的總菌數(shù)量沒(méi)有變化，TNS組的總菌的數(shù)量顯著減少(P＜0.01)。T、TN或TNS對(duì)纖維分解細(xì)菌有抑制作

9、用，T和TN顯著抑制產(chǎn)琥珀酸絲狀桿菌（F.succinogens）的數(shù)量，TNS顯著抑制溶纖維丁酸弧菌（B.fibrisolvens）的數(shù)量。T、TN或TNS對(duì)瘤胃原蟲(chóng)和甲烷菌均無(wú)影響。T組的真菌數(shù)量有小幅度增加，而TN組和TNS組的真菌數(shù)量顯著增加(P＜0.05)。
　　添加T、TN和TNS影響瘤胃代謝物的表達(dá)量，影響亞油酸代謝、亞麻酸代謝和氨基酸生物合成。
　　綜上所述，添加T、TN和TNS對(duì)湖羊干物質(zhì)采食量、相對(duì)增重、