BAG-1基因表達與EGFR表達的相關性分析及對乳腺癌靶向治療的影響.pdf

1、目的：
　　乳腺癌是一類在分子水平上具有高度異質性的惡性腫瘤，在靶向治療中尚存在一定的耐藥性，目前凋亡障礙及其機制成為研究的一個熱點。本文研究抗凋亡基因BAG-1(Bc1-2 associated athanogene-1)在乳腺癌細胞中的表達，分析其與表皮生長因子受體(epidermal growth factor receptor，EGFR)的相關性，探討B(tài)AG-1表達對乳腺癌靶向治療敏感性及耐受性的影響。
　　方法：<

2、br>　　培養(yǎng)EGFR(+)、(-)的乳腺癌細胞株T47D、MDA-MB-231、MCF-7及SKBR3細胞，通過RT-PCR及real-time PCR技術檢測不同細胞株中BAG-1 mRNA的表達，并通過Western blot方法檢測其蛋白水平的表達。對EGFR(+)BAG-1高表達的乳腺癌細胞株，應用SiRNA技術降低BAG-1的表達，并分別應用real-timePCR和Western blot方法檢測BAG-1與EGFR在mR

3、NA和蛋白水平的表達變化。應用MTT方法檢測BAG-1降表達的乳腺癌細胞對EGFR抑制劑吉非替尼的藥物反應性。
　　結果：
　　1.在EGFR(+)的乳腺癌細胞株T47D細胞和MDA-MB-231細胞中BAG-1基因表達高于EGFR(-)的乳腺癌細胞株MCF-7細胞和SKBR3細胞(P<0.05)，其中T47D細胞BAG-1基因表達水平最高。
　　2.篩選有效的SiRNA序列BAG-1 SiRNA1轉染T47D細胞，在

4、BAG-1 SiRNA50nM轉染48h后，轉染組BAG-1 mRNA降至對照組的36.9％(P<0.05)，而轉染組的EGFR基因表達較對照組升高約1.56倍(P<0.05)。
　　3.應用不同濃度梯度的吉非替尼處理BAG-1降表達前后的乳腺癌細胞，隨著吉非替尼濃度的升高，細胞的抑制率亦逐漸升高，BAG-1降表達組的細胞抑制率明顯高于對照組(P<0.05)。
　　結論：
　　1.在乳腺癌細胞中，BAG-1與EGFR之