浙貝止咳顆粒對致病微生物的作用及其機制研究.pdf

1、目的：浙貝止咳顆粒是在治療急性氣管-支氣管炎民間驗方長期經(jīng)驗使用的基礎(chǔ)上研制而成的中成藥。大量臨床實踐表明，中醫(yī)藥在抗菌、抗病毒方面具有獨特的優(yōu)勢和廣闊的發(fā)展前景。浙貝止咳顆粒中一些中藥成份的抗菌、抗病毒作用在許多文獻資料中都有報道。本課題擬在進行浙貝止咳顆粒抗菌、抗病毒作用及其部分可能的作用機制研究基礎(chǔ)上進一步對其鎮(zhèn)咳、祛痰等相關(guān)藥效學作用進行研究，進而探討浙貝止咳顆粒作為中藥制劑對于治療急性氣管-支氣管炎及其相關(guān)機制的作用，從而為預

2、防以及治療急性氣管-支氣管炎提供一種可行的途徑。
　　 方法：本文主要進行了浙貝止咳顆粒體內(nèi)外抗菌、抗病毒作用和鎮(zhèn)咳、祛痰等相關(guān)藥效學研究。通過測量浙貝止咳顆粒的抑菌圈直徑、最低抑菌濃度(MIC)和最低殺菌濃度(MBC)觀察其體外抗菌作用；以浙貝止咳顆粒對細菌感染的小鼠死亡保護作用實驗觀察其體內(nèi)抗菌作用；以甲型H1N1流感病毒致MDCK細胞和雞胚成纖維細胞(CEF)病變?yōu)橛^察指標，采用噻唑藍(MTT)比色法檢測浙貝止咳顆粒體外抗

3、病毒作用；體內(nèi)抗病毒試驗應用小鼠滴鼻感染甲型H1N1流感病毒造模，灌胃給藥，通過觀察其對流感病毒感染小鼠的死亡保護作用、肺指數(shù)的影響，從整體水平上考察浙貝止咳顆粒抗病毒的作用效果，通過對病毒性肺炎標本進行病理形態(tài)學觀察，初步探討其作用機制；采用昆明種小鼠氨水引咳實驗觀察其鎮(zhèn)咳作用，采用昆明種小鼠酚紅排泌實驗和SD大鼠毛細管排痰實驗觀察其祛痰作用，從藥效方面觀察浙貝止咳顆粒的治療作用。
　　 結(jié)果：
　　 1、體外抗菌實驗

4、：浙貝止咳顆粒對金黃色葡萄球菌的抑菌圈直徑為14mm，MIC為10.55mg/mL，MBC為21.1mg/mL；對肺炎鏈球菌的抑菌圈直徑為16mm，MIC為42.19mg/mL，MBC為84.38mg/mL；對甲型溶血性鏈球菌的抑菌圈直徑為18mm，MIC為42.19mg/mL，MBC為84.38mg/mL；對乙型溶血性鏈球菌的抑菌圈直徑為20mm，MIC為21.1mg/mL，MBC為84.38mg/mL。(注：藥物濃度以生藥計)

5、>　　 2、體內(nèi)抗菌實驗：染菌后浙貝止咳顆粒高、中劑量組小鼠死亡率分別為30％和40％，與生理鹽水組(死亡率為100％)相比，差異顯著(P<0.01)，與陽性對照藥相比，無顯著性差異(P>0.05)。
　　 3、體外抗病毒實驗：浙貝止咳顆粒對MDCK細胞的半數(shù)有毒濃度(TC50)為110.81mg/mL，對抑制流感病毒致MDCK細胞病變的半數(shù)有效濃度(IC50)為1.41mg/mL，治療指數(shù)(TI)為78.6；浙貝止咳顆粒對抑

6、制流感病毒致雞胚成纖維細胞細胞病變的最低抑制濃度為8.5mg/mL。
　　 4、體內(nèi)抗病毒實驗：浙貝止咳顆粒高、中劑量組對感染甲型H1N1流感病毒的小鼠死亡保護率分別為71.4％、64.3％，與病毒對照組比較，差異顯著(P<0.05，P<0.01)，與陽性對照利巴韋林組比較，無顯著性差異(P>0.05)；浙貝止咳顆粒高、中劑量組小鼠的肺指數(shù)明顯降低，與模型組相比差異顯著(P<0.05，P<0.01)；浙貝止咳顆粒對小鼠病毒性肺炎

7、有抑制作用并具有正的量效關(guān)系，即在一定情況下，劑量越大，越能有效地抑制流感病毒所致的小鼠肺炎，肺組織病理形態(tài)學觀察可見，浙貝止咳顆粒各組與模型組比較，小鼠肺臟組織結(jié)構(gòu)較完整，肺泡間隔基本接近正常，炎性細胞浸潤減少。
　　 5、相關(guān)藥效學實驗：與模型對照組相比，浙貝止咳顆粒高、中劑量治療組可以明顯減少小鼠的咳嗽次數(shù)，延長氨水所致小鼠咳嗽潛伏期(P<0.01)；增加小鼠離體氣管酚紅排泌量及大鼠毛細管排痰量(P<0.05或P<0.01

8、)。
　　 結(jié)論：
　　 1、浙貝止咳顆粒體外對金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、甲型溶血性鏈球菌、乙型溶血性鏈球菌有抑制作用，并且對細菌引起小鼠死亡有一定的保護作用，說明該藥具有一定的抗菌作用。
　　 2、浙貝止咳顆粒能有效地抑制甲型H1N1流感病毒在MDCK細胞和雞胚成纖維細胞內(nèi)的復制，并且能改善流感病毒引起的小鼠肺炎癥狀，延長感染流感病毒小鼠的生存率，降低死亡率，因此在抗病毒方面，該藥可能是一種有應用價值的有效藥