結腸癌和直腸癌臨床特點及癌變相關分子機制的異同分析.pdf

1、研究背景：
　　 結直腸癌作為消化系統(tǒng)常見腫瘤之一，近來在我國的發(fā)病率呈逐年上升的趨勢。隨著我國流行病學調查的逐漸開展，目前認為結腸癌和直腸癌在發(fā)病模式和病因學方面存在著明顯差異。在我國直腸癌較結腸癌多見，但90年代與80年代相比所占比例有所下降，這一變化表明生活習慣和飲食結構的西方化與結腸癌的發(fā)病有密切關系，但相對于直腸癌的關系較小。同時結腸癌和直腸癌由于癌變部位的不同，臨床表現(xiàn)存在明顯差異，其相應的實驗室檢查、治療手段等方面

2、也存在的異同，流行病學資料表明結腸癌和直腸癌在發(fā)生和發(fā)展中肯定存在著差異。目前結直腸癌的癌變機制較為明確，其中經(jīng)典的為“正常粘膜一腺瘤一腺癌”的染色體不穩(wěn)定途徑，其中包括一系列按時間順序的癌基因激活和抑癌基因失活，以及Wnt途徑的激活；另一與結腸癌發(fā)生密切相關的是微衛(wèi)星不穩(wěn)定途徑?，F(xiàn)在的大部分研究將結腸癌和直腸癌混雜在一起，結腸癌和直腸癌的發(fā)生過程是否也遵循這兩條途徑，還是各有側重，癌變的分子機制有無差異至今為止尚不清楚。近來有報道認為

3、在結腸癌癌變過程中APC，K-ras，p53等基因突變較多見，并且微衛(wèi)星不穩(wěn)定途徑占有一定比例，這些初步的研究說明結腸癌和直腸癌中基因的表達是有所不同的，兩者之間可能存在差異，但均有待進一步系統(tǒng)研究予以闡明。臨床特點并的異同，在此基礎上通過對結腸癌和直腸癌中APC，β-catenin，p53、wnt-1、MSH-2和MLH-1等蛋白的變化和K-ras基因突變的檢測，初步探討兩者癌變途徑和重要癌變基因的異同；同時采用基因芯片技術初步檢測了

4、結腸癌和直腸癌基因表達的差異，較為系統(tǒng)地探討了結腸癌和直腸癌的癌變機制的異同，研究結果為制定符合中國人群的預防和篩查方案，降低腫瘤發(fā)病率及針對性的個性化治療奠定了理論基礎。
　　 研究目的：
　　 本研究首先通過總結近10年北京協(xié)和醫(yī)院結腸癌和直腸癌住院病例1906例，回顧性分析其發(fā)病模式的變遷和臨床表現(xiàn)、實驗室檢查、確診方法、病理分期等臨床特點的異同；同時分別選取結腸癌和直腸癌手術組織標本，通過高通量的基因表達譜芯片和

5、免疫組化、基因測序等方法，探討結腸癌和直腸癌癌變過程基因表達的差異，并針對結直腸癌癌變的染色體不穩(wěn)定途徑和微衛(wèi)星不穩(wěn)定途徑中的重要蛋白表達和基因突變的異同進行檢測，初步探討我國結腸癌和直腸癌的發(fā)病模式、臨床特點和癌變過程中分子機制的異同，為針對不同腫瘤類型進行早期診斷和預防、為大規(guī)模流行病學調查以及開展腫瘤篩查提供理論依據(jù)。
　　 研究方法：
　　 回顧性分析總結北京協(xié)和醫(yī)院1999-2008年期間1906例住院的結腸癌

6、和直腸癌患者病歷資料，探討了近年來結腸癌和直腸癌發(fā)病模式的變遷，并初步分析其在臨床表現(xiàn)、實驗室檢查、確診方法、病變分期等的異同；同時選取了結腸癌和直腸癌手術石蠟組織標本各30例，通過免疫組化的方法，檢測結直腸癌癌變過程中重要蛋白APC、Wnt1、β-catenin、p53、MLH1、PMS2、MSH2、MSH6的表達，切割和PCR測序的方法研究k-ras突變；在此基礎上，采用基因表達譜芯片技術分別檢測結腸癌和直腸癌各8例組織標本，探討兩

7、者癌變相關基因表達的差異。
　　 研究結果：
　　 臨床資料分析表明，1999年～2008年期間結直腸癌收治比較80年代均明顯增加(1.39％vs0.97%p＜0.05)，但結腸癌和直腸癌分別增加幅度無明顯差異；40以下年輕患者近10年呈下降趨勢，而70歲以上的患者有所增加，其中以直腸癌的變化更有統(tǒng)計學差異(p＜0.05)；直腸癌出現(xiàn)便血和大便習慣改變的幾率高于結腸癌，分別為76.9%vs31.7%和71.9%vs33.

8、9%(p＜0.01)；結腸癌大便常規(guī)檢查異常明顯低于直腸癌(36.5%vs76.6%p＜0.01)，血紅蛋白下降在結腸癌中更為多見(40.9%vs29.2%p＜0.01)，CEA檢查異常在結腸癌中更為常見(57.9%vs31.1%p＜0.01)；直腸指診發(fā)現(xiàn)直腸癌的陽性率高達87.9%，結腸鏡檢查直腸癌合并息肉的人數(shù)少于結腸癌(35.7%vs19.7%p＜0.01)，病理分期均以中晚期為主。免疫組織化學檢測表明，結腸癌和直腸癌組APC蛋

9、白表達缺失的比例分別為40.0%和46.7%，Wnt1蛋白陽性表達的比例分別為50.0%和66.7%，雖直腸癌表達偏高，但無統(tǒng)計學差異，β-catenin陽性表達均在90%以上，p53陽性表達在直腸癌為86.7%，高于結腸癌的76.7%，但無統(tǒng)計學差異；MLH1、PMS2、MSH2、MSH6在結腸癌和直腸癌組織中的檢測發(fā)現(xiàn)，結腸癌中有8例出現(xiàn)表達缺失，占26.7%，而直腸癌僅為4例，占13.3%(p＜0.01);4種蛋白缺失情況表明，無

10、一例表現(xiàn)為單個蛋白的表達缺失，MLH1和PMS2蛋白同時缺失多見于結腸癌中(87.5%)，MSH2和MSH6蛋白同時缺失多見于直腸癌(100%)。K-ras基因突變在結腸癌和直腸癌中為53.3%和36.6%(p＜0.05)。表達譜基因芯片檢測數(shù)據(jù)表明結腸癌和直腸癌癌變過程中存在10余種基因表達的差異。
　　 結論：
　　 近來結腸癌和直腸癌的發(fā)病率呈明顯升高趨勢，發(fā)病年齡趨于老年化；結腸癌的臨床表現(xiàn)比較隱匿，貧血和CEA

11、異常主要見于結腸癌中，直腸癌較少合并結腸息肉，直腸指診是診斷直腸癌簡便易行的方法之一；癌變機制方面，Wnt信號途徑的激活在結腸癌和直腸癌癌變過程均起著重要作用，在直腸癌中Wnt途徑的激活與Wnt1信號蛋白高表達和APC基因突變關系更為密切；變異型p53蛋白表達在兩種腫瘤發(fā)生過程中均有著重要作用，結腸癌中K-ras基因突變明顯高于直腸癌；錯配修復基因突變導致的蛋白表達缺失在結腸癌中更為多見，主要以MLH1和PMS2突變?yōu)橹鳎蹦c癌主要為M