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文檔簡介
1、目的:
據(jù)報道全球全球每年有超過一百萬的結(jié)直腸癌新發(fā)病例,嚴重影響人類健康。人類MICAL2(Molecule Interacting with CasL2)基因是人類MICAL家族基因的重要組成部分,相對于其家族成員MICAL1,MICAL2基因的研究較少。而在腫瘤研究領(lǐng)域,僅在前列腺癌研究中發(fā)現(xiàn)MICAL2基因的前列腺癌變異體與前列腺癌進展相關(guān)。所以我們在結(jié)直腸癌中對MICAL2基因進行研究,以明確MICAL2基因在結(jié)直腸
2、癌進展中的作用,并期望可以為結(jié)直腸癌的診療提供新的分子標志和作用靶點。
方法:
(1)免疫組織化學檢測具有完整生存資料的結(jié)直腸癌組織芯片,分析癌與癌旁組織中MICAL2的表達差異,生存分析研究MICAL2與結(jié)直腸癌病人預后的關(guān)系。
(2)在結(jié)直腸癌細胞HCT116和SW480細胞株中采用shRNA構(gòu)建穩(wěn)定敲低的MICAL2細胞株,并采用MTT和克隆形成實驗檢測MICAL2基因?qū)毎L與克隆形成的影響。
3、r> (3)在穩(wěn)定敲低MICAL2基因的HCT116細胞株中,使用double thymidine進行G1/S期阻滯,釋放后流式細胞儀檢測進入S期細胞的快慢。
結(jié)果:
?。?)結(jié)直腸癌癌組織中的MICAL2蛋白水平明顯高于癌旁組織,MICAL2蛋白高表達提示病人預后較差。
(2)在HCT116和SW480細胞中敲低MICAL2基因后,細胞生長和克隆形成能力受到抑制。
?。?)敲低MICAL2基因后,
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