基于Au-MoO3-CS納米復合膜修飾的HCV NS5A電化學免疫傳感器的研究.pdf

1、目的：
　　HCV的感染人群廣，區(qū)域大，發(fā)病后不能引起人們的足夠重視而容易導致長期的肝疾病的趨勢，但是HCV感染的早發(fā)現(xiàn)早隔離早治療對于疾病蔓延趨勢的遏制和病情的控制至關重要。HCV非結構5A蛋白監(jiān)測在丙型肝炎病毒感染的診斷、病情發(fā)展以及預后判斷有很重要的作用。電化學免疫傳感器由于其具有價格低廉、操作簡單、耗時短、靈敏度高、檢測線低、易于商品化和集成化非常合適作為大量標本的篩查。本研究的目的在于，利用納米材料的優(yōu)良性能，制備電化學

2、免疫傳感器用于HCV NS5A蛋白的高靈敏而準確檢測。
　　方法：
　　1.制備Au/MoO3-殼聚糖(CS)復合納米材料。將MoO3納米粒子超聲分散于CS溶液制得混合溶液，加入HAuCl4溶液，HAuCl4在CS的還原作用下原位合成AuNPs在MoO3納米粒子表面上得到Au-MoO3/CS復合納米材料。用SEM對制備好的納米復合材料進行表征。將此納米復合材料修飾滴涂于GCE表面后，利用金巰基的結合，把單克隆抗體(MAb)修

3、飾在納米復合材料上。
　　2.在檸檬酸三鈉的還原作用下，將HAuCl4還原生成的AuNPs生長于介孔硅MCM-41的表面，將多克隆抗體(PAb)和HRP依靠金-巰鍵的結合作用修飾于介孔硅的表面，利用夾心法對HCV NS5A蛋白進行檢測。對于傳感器修飾過程和電化學性能用CV和EIS進行表征，并對此免疫傳感器的性能進行了考察。
　　結果：
　　制備的納米復合材料中，AuNPs生長在MoO3納米顆粒的表面，MoO3納米顆粒均

4、勻分散于CS溶液中。所制得的納米復合材料具有良好的導電性、成膜性和生物相容性，用此膜作為MAb/Ag/PAb的固定基質所制得的電化學免疫傳感器，對HCV NS5A蛋白顯示了良好的檢測效果，線性范圍為1 ng·mL-1到50μg·mL-1，除此之外，此生物傳感器還具有良好的重復性和穩(wěn)定性，重復性能優(yōu)異，RSD為4.5％。
　　結論：
　　所制成的HCV NS5A免疫傳感器具有良好的穩(wěn)定性，特異性，選擇性和低的檢測限等優(yōu)異性能，