不孕患者子宮內(nèi)膜息肉組織中CTGF、Integrin-β1、PR蛋白的表達(dá).pdf

1、背景:子宮內(nèi)膜息肉是常見的子宮內(nèi)膜病變,其在不孕婦女中檢出率高,宮腔鏡下息肉切除能夠改善不孕婦女的生殖功能,并提高輔助生殖技術(shù)的成功率。但目前子宮內(nèi)膜息肉對生殖功能的影響機(jī)制尚不清楚。
　　 子宮內(nèi)膜息肉由良性單克隆性增生的間葉組織形成,在組織形態(tài)上由具有至少灶性纖維化和厚壁血管的間質(zhì)與腺體組成。
　　 結(jié)締組織生長因子(connective tissue growth factor,CTGF)、整合素(Integrin

2、)、雌激素受體(Estrogen receptor,ER)、孕激素受體(Progesteronereceptor,PR)均是在子宮內(nèi)膜的周期性變化或受孕中發(fā)揮重要作用的因子。
　　 CTGF存在于正常育齡期子宮,并隨著子宮內(nèi)膜的周期性變化而變化;參與子宮的生長、遷移、粘附、胚胎早期發(fā)育等。整合素是一類細(xì)胞黏附分子,普遍存在于細(xì)胞表面,目前整合素已作為衡量子宮內(nèi)膜容受性的一個(gè)公認(rèn)指標(biāo)。正常育齡期子宮內(nèi)膜ER、PR水平隨著機(jī)體雌、孕

3、激素水平的周期性變化而變化;雌孕激素的作用與其激素受體的含量是密切相關(guān)的。靶細(xì)胞缺乏受體或受體異常,該激素即無法發(fā)揮生理效應(yīng)而導(dǎo)致一些疾病的發(fā)生。
　　 有研究表明,CTGF是在組織纖維化疾病中均有高表達(dá)的一類因子,與增生性、纖維化疾病有著密切的聯(lián)系。整合素是CTGF的輔助受體之一,和CTGF有共同受體位點(diǎn),CTGF能呈劑量依賴性地促進(jìn)其整合素的表達(dá)升高,使局部微環(huán)境中的黏附信號大大增強(qiáng),并進(jìn)一步促進(jìn)成纖維細(xì)胞的活化和增生,分泌

4、產(chǎn)生CTGF,從而增強(qiáng)CTGF參與基質(zhì)損傷修復(fù)的作用效果。
　　 目前,不孕患者子宮內(nèi)膜息肉組織中CTGF、Integrin-β1、ER、PR蛋白表達(dá)的研究尚未見報(bào)道。
　　 目的:本研究旨在通過觀察宮腔鏡下于增殖期取材的不孕患者子宮內(nèi)膜息肉組織中CTGF、Integrin-β1、ER和PR的表達(dá)情況,探討不孕患者子宮內(nèi)膜息肉的內(nèi)膜容受性變化及可能機(jī)制。
　　 方法:
　　 1研究對象
　　 收集

5、河北醫(yī)科大學(xué)第二醫(yī)院病理科2008年12月至2010年1月期間因不孕行宮腔鏡檢查、并內(nèi)膜診刮病理切片共171例,復(fù)查切片、顯微鏡下篩選出子宮內(nèi)膜息肉病例。所有病例診斷明確,臨床資料完整。共篩檢出46例息肉作為研究組,年齡20～40歲,在月經(jīng)干凈后1周內(nèi)行宮腔鏡檢查,直視下取材。選取病例均除外3個(gè)月內(nèi)曾服用過任何甾體類激素。對照組選取因輸卵管性不孕行診刮患者的正常增殖期子宮內(nèi)膜21例,年齡20～40歲,除外其他任何子宮病變者。
　　

6、 2免疫組織化學(xué)方法
　　 采用免疫組織化學(xué)SP兩步法,觀察ER、PR、CTGF、Integrin-β1的表達(dá)情況。具體操作按照免疫組織化學(xué)試劑盒進(jìn)行。蘇木素復(fù)染,乙醇梯度脫水,二甲苯透明,中性樹膠封片,光鏡觀察。
　　 3統(tǒng)計(jì)分析
　　 所有數(shù)據(jù)采用SPSS17.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì),Wilcoxon秩和檢驗(yàn)、Spearman相關(guān)分析。
　　 結(jié)果:
　　 1 ER.PR在子宮內(nèi)膜息肉中的表達(dá)情況<

7、br>　　 ER、PR陽性表達(dá)定位于細(xì)胞核。正常增殖期子宮內(nèi)膜ER、PR腺上皮細(xì)胞和間質(zhì)細(xì)胞胞核均呈陽性表達(dá)。
　　 子宮內(nèi)膜息肉組織內(nèi)ER、PR在腺上皮細(xì)胞均呈陽性表達(dá),無陰性表達(dá);但間質(zhì)中ER、PR均較正常增殖內(nèi)膜表達(dá)降低,ER的陽性表達(dá)率為97.83％(45/46),其中,1例(+++),23例(++),13例(+),1例(-)。PR的陽性表達(dá)率為93.48％(43/46),其中,1例(+++),20例(++),20例(

8、+),3例(-)。
　　 子宮內(nèi)膜息肉與正常增殖內(nèi)膜相比ER在腺體中的表達(dá)無顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05);PR的表達(dá)也無顯著性統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＞0.05)。間質(zhì)中ER、PR均有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P＜0.05),息肉中ER、PR的表達(dá)顯著低于正常對照組(P＜0.05)。
　　 2 CTGF在子宮內(nèi)膜息肉中的表達(dá)情況
　　 CTGF陽性信號呈棕黃色,定位于細(xì)胞漿。表達(dá)局限于在內(nèi)膜間質(zhì),為多灶性表達(dá)。
　　 正常增殖

9、期子宮內(nèi)膜間質(zhì)中陽性率為61.9％(13/21),其中8例陰性表達(dá),13例陽性表達(dá)(+)。息肉組中陽性率為91.3％(42/46),其中4例(-)、19例(+)、19例(++)、4例(+++)。正常對照組CTGF的陽性表達(dá)率低于子宮內(nèi)膜息肉組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 3 Integdn-β1在子宮內(nèi)膜息肉中的表達(dá)情況
　　 Integrin-β1蛋白陽性表達(dá)主要定位于細(xì)胞胞漿,部分為胞膜著色,為淺黃色至

10、棕黃色顆粒,胞核基本不著色。
　　 正常增殖期子宮內(nèi)膜中8例為(-),12例為(+),1例為(++),陽性表達(dá)率為61.9％(13/21)。子宮內(nèi)膜息肉中無陰性表達(dá),19例(+),22例(++),5例(+++),陽性表達(dá)率為100％(46/46)。正常對照組Integrin-β1的陽性表達(dá)率低于子宮內(nèi)膜息肉組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。
　　 4子宮內(nèi)膜息肉中ER、PR、CTGF、Integrin-β1蛋白表達(dá)情

11、況的相關(guān)性
　　 經(jīng)相關(guān)統(tǒng)計(jì)發(fā)現(xiàn),在子宮內(nèi)膜息肉中,ER與PR間質(zhì)中的表達(dá)呈正相關(guān);CTGF與Integrin-β1的呈正相關(guān)關(guān)系。ER、PR分別與CTGF、Integrin-β1均無相關(guān)關(guān)系。
　　 結(jié)論:
　　 1子宮內(nèi)膜息肉間質(zhì)中ER、PR均較正常增殖內(nèi)膜表達(dá)降低;且兩者之間表達(dá)呈正相關(guān);提示息肉內(nèi)上述受體表達(dá)陰性細(xì)胞均對周期性變化激素相對不敏感;
　　 2不孕患者子宮內(nèi)膜息肉中Integrin-β

12、1表達(dá)增高,提示不孕可能與其時(shí)相提前表達(dá)紊亂有關(guān);
　　 3 CTGF在子宮內(nèi)膜息肉中較正常宮內(nèi)膜均呈現(xiàn)高表達(dá),且CTGF與Integrin-β1之間存在正相關(guān)關(guān)系,提示Integrin-β1、CTGF在促進(jìn)子宮內(nèi)膜息肉間質(zhì)纖維化的過程中發(fā)揮一定的作用;
　　 4 CTGF、Integrin-β1在子宮內(nèi)膜息肉內(nèi)的異常表達(dá)與ER、PR無相關(guān)性,目前未提示息肉內(nèi)Integrin-β1、CTGF的高表達(dá)與ER、PR表達(dá)降低有