五味子正丁醇萃取物對去卵巢小鼠迷宮學習和海馬CA1區(qū)突觸形態(tài)的影響.pdf

1、雌激素水平高低與學習記憶相關，婦女絕經(jīng)后會出現(xiàn)學習記憶下降。流行病學調(diào)查顯示，絕經(jīng)期婦女阿爾茨海默癥（Alzheimer’s disease，AD）的患病率高于男性。雌激素替代療法（Estrogen replacement therapy，ERT）可以改善絕經(jīng)婦女的認知功能和減低AD癥的發(fā)生，然而其卻帶來一些副作用，如可增加子宮內(nèi)膜癌、乳腺癌的發(fā)病率，這是目前制約ERT 在臨床上應用的一個主要原因。因此，從天然產(chǎn)物中尋找一類具有雌激素樣

2、作用的替代物受到越來越多的關注。研究發(fā)現(xiàn)，五味子具有改善學習記憶的作用。本室的前期工作指出五味子具有改善去卵巢動物學習記憶的功效，其有效成分主要集中于五味子正丁醇萃取物中，但其改善學習記憶的相關機制仍不十分清楚。
　　 目的：
　　 本實驗使用去卵巢小鼠建立學習記憶障礙模型，探討五味子正丁醇萃取物對學習障礙的改善作用及其相關機制，為臨床治療絕經(jīng)后婦女的認知障礙提供理論依據(jù)。
　　 方法：
　　 62只健康

3、雌性小鼠隨機分為5組：①假手術組（Sham），n=14；②去卵巢組（OVX），n=14；③去卵巢+苯甲酸雌二醇（EB）組，n=10；④去卵巢+1g生藥/ml五味子正丁醇萃取物（LW）組，n=12；⑤去卵巢+1.5 g生藥/ml五味子正丁醇萃取物（HW）組，n=12。術后六周根據(jù)分組情況灌胃相應藥物，EB組小鼠每次每只皮下注射20μg苯甲酸雌二醇，隔天進行；LW組給予1g生藥/ml五味子正丁醇萃取物，劑量為0.4mL·d-1（相當于原生藥

4、劑量0.4 g·d-1），HW組給予1.5g生藥/ml五味子正丁醇萃取物，劑量為0.4mL·d-1（相當于原生藥劑量0.6g·d-1），各對照組則灌胃等容積的蒸餾水，分上下午進行。給藥20d后，進行Y迷宮行為訓練，持續(xù)8d，行為訓練期間繼續(xù)給藥。記錄每天的正確反應率、全組達標率及達學會標準所需的訓練次數(shù)。
　　 在不同時間階段及不同分組中分別隨機選取小鼠進行海馬CA1區(qū)突觸形態(tài)觀察：①術后三天從Sham組隨機取兩只小鼠進行電鏡觀

5、察；②術后六周從Sham組和OVX組隨機各取2只小鼠進行電鏡觀察；③給藥結束后從OVX組和HW組中隨機各取兩只小鼠進行電鏡觀察。觀察指標包括突觸面密度（Sv）、突觸數(shù)密度（Nv）、突觸活性區(qū)平均面積、PSD厚度、突觸曲面率和穿孔突觸百分率。
　　 實驗結果如下：
　　 1、Y型迷宮學習結果：OVX組小鼠的正確反應率和全組達標率均明顯低于Sham組（P<0.01，<0.05），全組達標率為60％，低于Sham組的100％；

6、OVX組達標小鼠所需訓練次數(shù)為63.33±19.66，與Sham組的53.33±19.89比較，沒有顯著性差異（P>0.05）。與OVX組比較：EB組和HW組的正確反應率和達標率均顯著提高（P<0.01，<0.05），全組達標率分別為90％和100％；EB組和HW組達標小鼠所需的訓練次數(shù)分別為70±10.95和60±18.86，與OVX組比較均無顯著差異（P>0.05）。與OVX組相比較：LW組的正確反應率顯著提高（P<0.01，<0.

7、05），但全組達標率和達標小鼠所需訓練次數(shù)分別為80％和60±21.38，與對照組比較，沒有顯著性差異（P>0.05）。
　　 2、海馬CA1區(qū)突觸形態(tài)的結果：①六周后，Sham組小鼠海馬CA1區(qū)的Sv和Nv較六周前的顯著增大（P<0.01），而突觸活性區(qū)平均面積、PSD厚度、突觸曲面率和穿孔突觸百分率則沒有顯著性變化（P>0.05）。②與Sham組比較，OVX六周后小鼠海馬CA1區(qū)的Sv、Nv和PSD厚度顯著降低（P<0.01

8、），突觸活性區(qū)平均面積顯著升高（P<0.01）；此外，突觸曲面率和穿孔
　　 突觸百分率有所下降，但沒有顯著性差異（P>0.05）。而OVX十周后小鼠海馬CA1區(qū)的Sv、Nv、PSD厚度、突觸活性區(qū)平均面積、突觸曲面率和穿孔突觸百分率較去卵巢六周小鼠均沒有顯著性差異（P>0.05）。③高劑量的五味子正丁醇萃取物明顯提高去卵巢小鼠海馬CA1區(qū)的Sv、Nv和PSD厚度，降低突觸活性區(qū)平均面積，呈極顯著性差異或顯著性差異（P<0.01

9、，P<0.05）；此外，突觸曲面率和穿孔突觸百分率也有所上升，但無顯著性差異（P>0.05）。
　　 結論：
　　 1、去卵巢導致小鼠學習能力減低，而不同劑量的五味子正丁醇萃取物能顯著提高去卵巢小鼠的學習能力，以0.6g原生藥·d-1的劑量效果為好。
　　 2、小鼠去卵巢后其海馬CA1區(qū)的突觸面密度、突觸數(shù)密度和PSD厚度均顯著減少，突觸平均面積顯著提高，這種變化在去卵巢六周時已達穩(wěn)定。
　　 3、五味子