中藥血清藥物化學(xué)的應(yīng)用研究（Ⅳ）——六味地黃丸補(bǔ)腎、治療骨質(zhì)疏松藥效物質(zhì)基礎(chǔ)及體內(nèi)動(dòng)態(tài)研究.pdf

1、目的：本實(shí)驗(yàn)屬于六味地黃丸血清藥物化學(xué)研究系列，在以往研究的基礎(chǔ)上，最終要闡明六味地黃丸的主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)、作用機(jī)理及體內(nèi)變化規(guī)律。 方法：以六味地黃丸血清色譜指紋圖為指導(dǎo)，采用傳統(tǒng)與現(xiàn)代制備色譜技術(shù)相結(jié)合的方法，分析、分離并鑒定六味地黃丸的血中移行成分；以氫化可的松大鼠腎陰虛動(dòng)物模型評(píng)價(jià)六味地黃丸的血中移行成分的補(bǔ)腎作用；采用Wistar乳鼠顱蓋骨成骨細(xì)胞原代培養(yǎng)的方法，觀察六味地黃丸的血中移行成分促成骨細(xì)胞的增殖作用；最后采

2、用中藥藥動(dòng)學(xué)的方法，研究六味地黃丸主要藥效物質(zhì)基礎(chǔ)的體內(nèi)動(dòng)態(tài)過(guò)程。 結(jié)果：1在以往研究已經(jīng)確定了六味地黃丸11個(gè)血中移行成分及其生藥來(lái)源的基礎(chǔ)上，本實(shí)驗(yàn)精確分離并鑒定了這11個(gè)血中移行成分，1號(hào)成分是5-羥甲基-2-糠酸；2號(hào)成分是莫諾苷；3號(hào)成分是2-羥基苯乙酮-4-葡萄糖醛酸苷；4號(hào)成分是獐牙菜苷；5號(hào)成分是馬錢子苷；6號(hào)成分是4-甲氧基-5-磺酸基苯乙酮-2-葡萄糖醛酸苷；7號(hào)成分是芍藥苷；8成分號(hào)是2，4-二羥基-苯乙酮

3、；9號(hào)成分是丹皮酚的代謝產(chǎn)物，性質(zhì)不穩(wěn)定，正在分離中；10號(hào)成分是山茱萸所含成分，血中轉(zhuǎn)移量小，不是六味地黃丸的主要血中移行成分，正在分離中；11號(hào)成分是丹皮酚。 2六味地黃丸的主要血中移行成分5-羥甲基-2-糠酸、混合部位(主要由莫諾苷、獐牙菜苷和馬錢子苷組成)以及丹皮酚可以使氫化可的松大鼠腎陰虛模型動(dòng)物的體重、心率、胸腺和脾臟重量指數(shù)、血清SOD和GSH-PX活力、血漿粘度、血清FT4、血清T、血清E2/T值、血清ALP等1

4、1項(xiàng)指標(biāo)回調(diào)，表現(xiàn)出明顯的補(bǔ)腎作用，初步確定5-羥甲基-2-糠酸、莫諾苷、獐牙菜苷、馬錢子苷和丹皮酚是六味地黃丸的補(bǔ)腎作用物質(zhì)基礎(chǔ)。 3六味地黃丸的主要血中移行成分的混合部位(主要由莫諾苷、獐牙菜苷和馬錢子苷組成)明顯表現(xiàn)出對(duì)體外培養(yǎng)大鼠成骨細(xì)胞的促增殖作用，其中5×10-5g·mL-1劑量組作用最強(qiáng)，初步確定莫諾苷、獐牙菜苷、馬錢子苷是六味地黃丸治療骨質(zhì)疏松的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)。 4闡明了六味地黃丸灌胃給藥后大鼠體內(nèi)5-羥甲