生地降糖顆粒的工藝學研究.pdf

1、本文研究實驗目的：采用正交設計法優(yōu)選生地降糖顆粒的合煎與分煎的提取工藝，以地黃中的梓醇、牛膝中的齊墩果酸和出膏率作為參考指標；結合藥效學評價以確立制備工藝；研究生地降糖顆粒的毒性、降血糖作用及其機制。 實驗方法一、生地降糖顆粒提取工藝的篩選。 1、篩選合煎工藝：以梓醇的含量和出膏率為指標，分別考察其與料液比、提取時間、提取次數的關系，優(yōu)選合煎正交工藝。 2、篩選分煎工藝：地黃和牛膝分別進行正交工藝優(yōu)選，分別得出地

2、黃和牛膝的正交優(yōu)選工藝，考察二者與溶媒、提取時間、提取次數、料液比、粒度的關系。 3、工藝-藥效學評價試驗：分為合煎、合煎醇沉(35％、55％、75％)、分煎、沉淀物和對照等組，觀察各組的降血糖作用，確定合理的生地降糖顆粒提取工藝。 實驗方法二、生地降糖顆粒的急性毒性試驗。 生地降糖顆粒樣品小鼠急性毒性試驗，在無法觀測到半數致死量(LD50)的情況下，改測其最大耐受量(MTD)。 實驗方法三、復制糖尿病模

3、型的劑量篩選采用四氧嘧啶(Alloxan，ALX)5個劑量組(40、50、60、70、80mg/kg)造模，進行組間t檢驗，優(yōu)選合適的四氧嘧啶造模劑量。 實驗方法四、生地降糖顆粒對DM小鼠的藥效學研究首先按照最大耐受量的1/10倍量作為預試驗的中劑量組，再分別擴大、縮小3倍作為大劑量組和小劑量組，進行ALX誘導的DM小鼠降血糖作用預試驗。篩選出合適的給藥劑量后，進行藥效學實驗。取昆明種小鼠150只，雌雄各半，從中隨機留取10只作

4、為正常對照組，雌雄各半。剩余昆明種小鼠尾靜脈給予0.6％ALX(60mg·kg-1)造模后，篩選血糖值≥11.0mmol/L為造模成功的DM小鼠，隨機分為模型組、生地降糖顆粒大、中、小劑量組，中藥陽性藥對照組、西藥陽性對照組。模型組ig10mL/kg蒸餾水，各給藥組均ig10mL/kg藥液。分別在第7d、14d、21d給藥后4h眼眶后靜脈叢采血，第21d摘取胰腺。檢測血糖、總膽固醇、甘油三酯后進行組間t檢驗。 實驗結果一、生地降

5、糖顆粒的提取工藝生地和牛膝飲片以處方比例(生地：牛膝=2∶1)混合加10倍量水提取2h，提取3次后合并濾液濃縮至相對密度為1.15左右，加無水乙醇至濃度為75％，充分攪拌靜置4～6h，取上清液減壓濃縮至最大比重，減壓干燥得到干膏。 實驗結果二、生地降糖顆粒的小鼠MTD30k/kg(相當于原生藥100g/kg)。 實驗結果三、復制DM模型ALX尾靜脈注射后3d，各組動物出現(xiàn)多飲、多食、多尿、身體消瘦等體征。血糖t-檢驗結果

6、顯示60mg/kg組造模即能得到成功的DM小鼠模型。 實驗結果四、生地降糖顆粒的DM小鼠的藥效學研究。 1、對血糖的影響：各造模組與正常組小鼠比較血糖值均顯著升高(P＜0.01)，說明模型穩(wěn)定可靠。給藥后第7d生地降糖顆粒大、中劑量組和格列本脲組與模型組比較血糖明顯下降(P＜0.05)。第14d生地降糖顆粒大、中、小劑量組和糖脈康顆粒組及格列本脲組血糖值均降低，與模型組比較，具有明顯統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，其中大、中

7、劑量組和格列本脲組有顯著的降血糖作用(P＜0.01)。給藥后第21d生地降糖顆粒大、中、小劑量組和格列本脲組血糖值均降低，與模型組比較具有顯著的統(tǒng)計學意義(P＜0.01)。 2、對體質量的影響：生地降糖顆粒大、中、小劑量組和糖脈康顆粒組對動物體質量的影響與模型組比較有明顯差異(P＜0.05)。 3、對血脂的影響：造模后21d甘油三酯已有明顯升高(P＜0.01)，但總膽固醇升高不明顯，生地降糖顆粒大劑量組能明顯降低甘油三酯