抗腫瘤壞死因子單克隆抗體infliximab治療強(qiáng)直性脊柱炎的臨床及實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、第一部分負(fù)荷劑量腫瘤壞死因子單克隆抗體infliximab治療強(qiáng)直性脊柱炎的臨床研究目的：(1)評(píng)價(jià)負(fù)荷劑量的腫瘤壞死因子(TNF)單克隆抗體infliximab短期治療強(qiáng)直性脊柱炎(AS)的臨床療效與安全性；(2)探討預(yù)測(cè)infliximab短期治療達(dá)到臨床療效的因素；(3)了解負(fù)荷劑量infliximab短期治療后AS患者病情的變化和預(yù)測(cè)復(fù)發(fā)因素分析。 方法：本研究首先進(jìn)行一項(xiàng)開放性Ⅲ期臨床試驗(yàn)，納入研究的AS患者均符合19

2、84年修訂的紐約標(biāo)準(zhǔn)，并處于疾病活動(dòng)期?；颊叻謩e在試驗(yàn)的第0、2、6周接受靜脈輸注infliximab5mg/kg共3次(負(fù)荷劑量)，并隨訪至10周，對(duì)其療效和安全性進(jìn)行評(píng)估。 臨床試驗(yàn)完成后，采用Logistic單因素和多因素分析對(duì)療效影響因素進(jìn)行探索性分析。 臨床試驗(yàn)結(jié)束后所有患者都給予傳統(tǒng)治療，并對(duì)在10周時(shí)達(dá)到ASAS20的患者進(jìn)行隨訪，隨訪截止至復(fù)發(fā)或治療結(jié)束8個(gè)月，復(fù)發(fā)定義為患者的BASDAI分值達(dá)到3.5分

3、。采用Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型進(jìn)行復(fù)發(fā)因素分析，用乘積限法估計(jì)不同時(shí)間的復(fù)發(fā)率并繪制復(fù)發(fā)率的Kap1an-Meier曲線。 結(jié)果：1.療效評(píng)估結(jié)果：在第10周，84.31％的患者達(dá)到主要療效指標(biāo)ASAS20，達(dá)到次要療效指標(biāo)ASAS40和BASDAI50的患者比例分別為74.6％和69.8％。在第10周，BASDAI、BASFI、BASMI、ESR/CRP等的改善也均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均＜0.05)。 2.安全性結(jié)果：21例

4、(33.33％)患者發(fā)生43例次與治療相關(guān)的副作用，最常見的是上呼吸道感染和皮膚及其附屬器官的損害，其次是肝功能異常。多數(shù)與藥物相關(guān)的不良反應(yīng)癥狀輕微，無(wú)需停藥可自行緩解或經(jīng)常規(guī)治療后可恢復(fù)。3例(4.76％)女性患者(占女性患者的23.08％)發(fā)生遲發(fā)過(guò)敏反應(yīng)性皮炎(2例伴有嚴(yán)重脫發(fā))，經(jīng)過(guò)相應(yīng)治療，2例痊愈，另外1例在隨訪1年后基本痊愈。 3.預(yù)測(cè)療效因素分析結(jié)果：以10周時(shí)達(dá)到ASAS40和BASDAI50為療效標(biāo)準(zhǔn)，Lo

5、gistic單因素和多因素分析顯示：人口學(xué)參數(shù)和基線時(shí)疾病活動(dòng)性指標(biāo)共15個(gè)參數(shù)均未顯示能預(yù)測(cè)患者出現(xiàn)好的療效。 4.遠(yuǎn)期隨訪結(jié)果：對(duì)10周時(shí)達(dá)到ASAS20療效指標(biāo)的患者進(jìn)行隨訪，87％的患者在8個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)，25％、50％和75％的患者分別在2、3、6個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)。Cox比例風(fēng)險(xiǎn)模型的多因素分析發(fā)現(xiàn)基線時(shí)平均BASDAI積分值是AS患者復(fù)發(fā)的預(yù)測(cè)因素，BASDAI≥5.7者較＜5.7的相對(duì)危險(xiǎn)度為3.808，按照BASDAI中位

6、數(shù)分組，應(yīng)用Logrank進(jìn)行比較，也具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(X2=6.6099，P=0.01)。 結(jié)論：1.本研究進(jìn)一步證實(shí)，infliximab治療AS療效明顯。 2.多數(shù)副作用與以前報(bào)道的相同，但3例女性患者發(fā)生遲發(fā)過(guò)敏反應(yīng)，對(duì)該副作用應(yīng)引起重視。 3.基線時(shí)的人口學(xué)參數(shù)、疾病活動(dòng)性的臨床和實(shí)驗(yàn)室指標(biāo)不能預(yù)測(cè)療效。 4.多數(shù)患者在停用infliximab8個(gè)月內(nèi)復(fù)發(fā)，基線時(shí)BASDAI積分值高的患者復(fù)發(fā)快。

7、 第二部分Infliximab治療對(duì)AS患者部分血清細(xì)胞因子和T細(xì)胞分泌細(xì)胞因子的影響目的：(1)通過(guò)比較抗腫瘤壞死因子(TNF)單克隆抗體infliximab治療強(qiáng)直性脊柱炎(AS)病人前后血清11種細(xì)胞因子譜變化，篩選出infliximab效應(yīng)相關(guān)的差異表達(dá)細(xì)胞因子，并進(jìn)一步探討這些細(xì)胞因子與AS的疾病活動(dòng)性和infliximab療效的關(guān)系及infliximab發(fā)揮作用的機(jī)制；(2)通過(guò)比較infliximab治療AS病人前

8、后外周血表達(dá)IL-4、TNF-α和IFN-γ的CD4+、CD8+T細(xì)胞比例的變化，探討該藥物對(duì)T細(xì)胞亞群的影響和發(fā)揮作用的可能的機(jī)制。方法： (1)首先使用蛋白芯片技術(shù)檢測(cè)AS患者infliximab治療前后血清11種細(xì)胞因子譜的變化，對(duì)差異表達(dá)的細(xì)胞因子，進(jìn)一步用ELISA(IL-6和TNF-α)和生物活性測(cè)定法(TNF-α)進(jìn)行檢測(cè)。(2)使用細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子染色和流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)infliximab治療前后AS患者外周血CD4

9、+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞分泌IL-4、TNF-α和IFN-γ的變化。 結(jié)果：1.蛋白芯片技術(shù)檢測(cè)10例AS患者infliximab治療前后11種血清細(xì)胞因子譜的變化，結(jié)果顯示：IL-6水平顯著下降，而TNF-α水平明顯上升。 2.ELISA檢測(cè)10例AS患者血清IL-6，結(jié)果顯示：治療前AS患者血清IL-6水平高于正常人(P＜0.01)；經(jīng)過(guò)infliximab治療第2周即明顯下降(P＜0.01)，并持續(xù)至10周；相關(guān)分

10、析顯示：基線時(shí)IL-6水平與夜間痛、ESR、CRP顯著相關(guān)(P＜0.01)。 3.進(jìn)一步采用ELISA(10例)和生物學(xué)功能測(cè)定法(20例)2種方法檢測(cè)AS患者血清TNF-α水平，結(jié)果顯示：經(jīng)過(guò)infliximab治療，具有免疫反應(yīng)性的血清TNF-α水平(ELISA檢測(cè))在第2周即明顯上調(diào)(P＜0.01)，并持續(xù)至第10周，而具有生物學(xué)活性的TNF-α水平?jīng)]有明顯變化，相關(guān)性分析顯示：基線時(shí)TNF-α活性水平與BASDAI、BA

11、SFI、關(guān)節(jié)腫脹指數(shù)顯著相關(guān)(P＜0.05)，但與反應(yīng)疾病活動(dòng)的客觀指標(biāo)ESR、CRP以及PLT沒(méi)有相關(guān)性?；€時(shí)的TNF-α活性水平與infliximab的療效也沒(méi)有相關(guān)性。 4.流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)inffliximab治療前后20例AS患者外周血表達(dá)IL-4、TNF-α和IFN-γ的CD4+T、CD8+T細(xì)胞比例的變化，結(jié)果顯示：表達(dá)TNF-α和IFN-γ的CD4+T細(xì)胞和CD8+T細(xì)胞數(shù)的比例在治療的第2周即降低，在第6周降低

12、到最低，并持續(xù)至第10周。而表達(dá)IL-4的CD4+T、CD8+T細(xì)胞比例在infliximab治療期間沒(méi)有變化。 結(jié)論：1.Infliximab可能通過(guò)抑制IL-6部分發(fā)揮其療效，IL-6是AS發(fā)病機(jī)制中又一重要的細(xì)胞因子。 2.Infliximab在體內(nèi)部分通過(guò)中和可溶性的TNF-α而發(fā)揮作用；基線時(shí)TNF-α活性水平與infliximab的療效無(wú)關(guān)。 3.Infliximab治療下調(diào)T細(xì)胞TNF-α和IFN-